Техника электрофореза

Если поместить в коллоидный раствор электроды, соединенные с источником постоянного тока, то частицы двигаются по направлению к полюсу, имеющему заряд, простивоположный заряду внутренней обкладки двойного слоя. Достигнув электрода, частицы, разряжаясь, прилипают к его поверхности. Часть ионов внешней обкладки двойного слоя (ближайшие к ядру мицеллы) увлекаются вместе с коллоидной частицей, а часть движется к другому полюсу. Потенциал поверхности движущейся в электрическом поле частицы (на рис. 57 она примерно соответствует обведенной пунктиром) называется электро-кинетическим и обозначается буквой С (дзэта), а самое явление движения частиц в электрическом поле называется электрофорезом (катафорезом — в случае движения частиц к отрицательному полюсу). Движение жидкости под влиянием электрического поля, например через гель, называется электроосмосом. Это электрокинетические явления. Они находят разнообразное применение в технике. Электрофорезом пользуются для покрытия вольфрамовых катодов диоксидом тория ТКО , для нанесения алундовых покрытий на вольфрамовые спирали подогревателей в подогревных катодах, для нанесения высокодисперсных частиц карбонатов щелочноземельных металлов на вольфрамовые или никелевые керны при изготовлении оксидных катодов электронных ламп (см. гл. XI). [c.178]

Говоря о возможности определить наследуемость содержания белков количественно, наверняка не учитывается вся сложность этого явления и имеется мало средств воздействия на данный признак. Ввиду этого, а также благодаря впечатляющему развитию техники электрофореза за последнее десятилетие у многих растений изучен генетический детерминизм белков и ферментов. Тредставляется более полезным разложить сложный признак содержания белков на сумму свойств, каждое из которых определяется геном. Таким путем переходят от количественной наследственности (наследуемости признака) к наследственности полименделевской . [c.48]

Описанные выше явления получили название электро-кинетических явлений. Они играют большую роль в геологии, почвоведении, агротехнике, а также широко используются в технике электрофорез и электроосмос применяют для обезвоживания суспензий, осушки торфа и дерева, получения чистого каолина, осаждения латексов при покрытии каучуком деталей машин. [c.14]

Принцип и ограничения метода. Техника электрофореза основана на принципе дифференциальной подвижности белковых молекул в поддерживающей среде, или носителе (крахмал, полиакриламид, ацетат целлюлозы и др.), под действием электрического тока. Подвижность есть функция суммарного электрического заряда молекулы, который зависит от ионизации аминокислот белка и отсюда — от pH, а также от размеров молекулы белка. [c.39]

В настоящее время метод электрофореза на бумаге и в агаровых блоках особенно часто используется в. медицине для изучения фракционного состава белков сыворотки и плазмы крови. Подробнее этот вопрос рассматривается на стр. 477. Техника электрофореза белков плазмы крови излагается в практических руководствах по биохимии. [c.23]

Для измерения электрофореза наблюдают перемещение границы между золем и наслоенной на него жидкостью в электрическом поле. Совершенная техника электрофореза сложных смесей белков и других веществ была разработана А. Тизелиусом. [c.95]

Для измерения электрофореза наблюдают перемещение границы между золем и наслоенной на него жидкостью в электрическом поле. Совершенная техника электрофореза [c.107]

Когда исследования этого типа могли быть выполнены, учитывалось, что техника электрофореза преуменьшает реальную изменчивость в среднем в два раза. [c.61]

Принципы и техника электрофореза не требуют специального описания [14—16]. Обнаружение одиночного пика при двух или трех достаточно далеких значениях pH является признаком гомогенности. Применение для этой цели интерференционной онтики менее удовлетворительно, несмотря на ее высокую чувствительность, поскольку полученная кривая требует дифференцирования. Электрофоретическая подвижность зависит как от заряда молекулы, так и от гидродинамического сопротивления, причем оба эти фактора независимы. Они могут компенсироваться, давая в результате одинаковую подвижность для двух физически совершенно различных молекул, по это не может происходить при различных значениях pH. Поэтому важно проверить устойчивость гликопротеина в изучаемом интервале pH многие гликонротеины неустойчивы, особенно при высоких pH [17—19]. Полезная дополнительная информация может быть получена, если гликопротеин содержит заметные количества концевой сиаловой кислоты. В таких случаях заряд молекулы онределяется главным образом этим компонентом, и в большинстве случаев сиаловую кислоту можно почти полностью удалить с помош ью нейраминидазы. Если используемое количество фермента таково, что его можно обнаружить при последуюш,ем электрофоретическом анализе, фермент лучше сначала удалить, если это можно сделать удобным способом. Часто для этого пригодна гель-фильтрация. Молекулярный вес нейраминидазы холерного вибриона составляет около 9 -10 (Лэйвер [20]). Если после обработки нейраминидазой наблюдается два или более электрофоретически различных компонента вместо одного, наблюдавшегося перед обработкой, это значит, что материал, несмотря на его электрофоретическую гомогенность, содержит молекулы, различающиеся по химической природе остатков, от которых зависит заряд молекулы. Эта процедура может повысить степень полидисперсности, если реакция пе доведена до конца, но она не будет превращать гомогенные препараты в гетерогенные. Очевидно, важно убедиться, что используемая нейраминидаза не обладает никакой иной ферментативной активностью, особенно протеолитической. Описаны методы получения нейраминидазы необходимой чистоты [21, 22]. Проверке по этому способу был подвергнут а1-кислый гликопротеин человека [23], после обработки нейраминидазой наблюдалось два электрофоретических ника, несмотря на кажущуюся гомогенность необработанного материала в широком интервале рЬ1. [c.45]

Наиболее совершенная техника электрофореза сложных белков (а также других веществ) была разработана Тизелиусом. [c.429]

Если поместить в коллоидный раствор электроды, соединенные с источником постоянного тока, то частицы двигаются по направлению к полюсу, имеющему заряд, противоположный заряду внутренней обкладки двойного слоя. Достигнув электрода, частицы, разряжаясь, прилипают к его поверхности. Часть ионов внешней обкладки двойного слоя (ближайшие к ядру мицеллы) увлекается вместе с коллоидной частицей, а часть движется к другому полюсу. Потенциал поверхности движущейся в электрическом поле частицы (иа рис. 57 она примерно соответствует обведенной пунктиром) называется электро-кинетическим и обозначается буквой I (дзэта), а самое явление движения частиц в электрическом поле называется электрофорезом (катафорезом — в случае движения частиц к отрицательному полюсу). Движение жидкости под влиянием электрического поля, например через гель, называется электроосмосом. Это электрокинетичес-кие явления. Они находят разнообразное применение в технике. Электрофорезом пользуются для покрытия [c.220]

С первыми же успехами электрофореза как метода разделения близких по химическим свойствам веществ и элементов, естественно, встал вопрос о препаративном его применении. Частично эта задача решается техникой электрофореза в вертикальных колонках. Для уменьшения конвекционных потоков колонки либо заполняют пористой насадкой [123, 124], либо по высоте колонки создают градиент плотности, например, с помощью раствора сахара, концентрация которого постепенно уменьшается по высоте [125—127]. [c.68]

Количество работ, посвященных выявлению возможностей разделения микроколичеств различных элементов методом электромиграции в расплавах солей, невелико. Для этой цели, как правило, применяли технику электрофореза на пористых подложках из асбеста или стекловолокна, [c.262]

Для отбора нужных клонов гибридных соматических клеток применяют селективные среды. Для идентификации многих белков используют технику электрофореза, позволяющую различать гомологичные белки человека и мыши. Таким образом локализуют гены в определенных хромосомах. [c.261]

Теория и техника электрофореза на бумаге описаны в не--скольких монографиях [16, 124, 125]. Методы электрофоретического разделения основаны на различной подвижности заряженных частиц в электрическом поле. Из различных методов для исследования красителей наиболее приемлем электрофорез на бумаге. При анализе очень сложных смесей необходимо сочетание электрофореза с хроматографией. Для анализа красителей элек- [c.97]

По-видимому, высшим достижением техники электрофореза в настоящее время являются результаты, полученные Тэрнером [121, 122] при разделении микроколичеств нерадиоактивных элементов (менее 10 г). Процесс ведется в очень тонком слое жидкости (0,01— 10 мкм) на полированном стекле во влажной камере. Объем пробы определяется по отражательным интерференционным кольцам. За время 20—180 сек при градиенте потенциала 30—70 в/см удается нацело разделить и количественно определить менее 10 г каждого из присутствующих в смеси элементов. [c.68]

В качестве примера приведем частоты генотипов по локусу Ьар 5 у О. willistoni. Этот локус контролирует структуру фермента лейцинаминопептида-зы. Применяя технику электрофореза, можно определить те или иные ИЗОЗИМЫ с различной электрофоретической подвижностью у каждой мухи, отловленной в природной популяции. [c.457]

Вначале в полиакриламидных гелях удавалось выявить лишь часть из 10 реовирусных белков [171, 283]. Совершенствование техники электрофореза, включая применение диск-электрофореза в гр с-глициновой системе, позволило идентифицировать все реовирусные белки [41, 57]. Определены последовательности аминокислот на С- и К-концах некоторых капсидных белков 1220, 244]. [c.276]