Элюирование через гель

Если на поверхность геля внести смесь высоко- и низкомолекулярных соединений (рис. 15, а) и пропускать растворитель через колонку, то маленькие частицы будут задерживаться и входить в поры геля. Частицы с большим молекулярным весом распределяются в жидкой, среде, окружающей кусочки геля (рис. 15, б). Дальнейшая элюация дает полное разделение компонентов (рис. 15, в) маленькие частицы, имеющие более длинный путь через гель, задерживаются в нем, в то время как большие вымываются. При последующем элюировании частицы с меньшим молекулярным весом также вымываются из колонки. [c.140]

В качестве колоночной насадки в большинстве случаев применяют сефадекс LH-20 и стиролдивинилбензольные гели, через которые алканы и циклоалканы элюируются растворителями по молекулярно-ситовому механизму. Порядок элюирования полициклических аренов зависит от применяемого растворителя. При использовании хлороформа, тетрагидрофурана и для аренов сохраняется порядок, типичный для гель-фильтрации. Однако при элюировании кетонами, спиртами, ацетонитрилом может проявляться адсорбционный эффект, вследствие которого с увеличением числа ароматических колец время удерживания соединений увеличивается. [c.133]

Метод элюирования состоит в том, что порцию разделяемой смеси вводят в хроматографическую колонку и затем через колонку пропускают чистый растворитель. В случае газообразной смеси в качестве растворителя используют какой-либо чистый газ, относительно слабо сорбируемый адсорбентом, например гелий, водород, азот, воздух, аргон, углекислый газ. Аналогичным образом аналитическое разделение смесей проводят при помощи газо-жидкостной хроматографии. [c.259]

Анализируемый образец (1—10 мг для органических и неорганических соединений и 10—20 мг для крови) смешивают с 0,8 г перманганата серебра, добавляют немного оксида меди и сжигают в течение 30 с, используя высокочастотную индукционную печь. Образующиеся простые продукты пропускают в токе гелия через конвертор, заполненный на 5% оксидом меди и на 95% восстановленной медью. В конверторе происходит дальнейшее окисление первичных продуктов и восстановление оксидов азота до элементного азота. Воду и диоксид углерода поглощают перхлоратом магния и аскаритом. Непоглощенная вода превращается в ацетилен в следующем реакторе с карбидом кальция. Азот после элюирования из колонки с молекулярными ситами 5А регистрируется катарометром. [c.195]

Стеклянную трубку (внутренний диаметр 2—3 см, высота 20—50 см) с оттянутым концом располагают вертикально в узкую часть помещают тампон из стеклянной ваты, а затем надевают резиновый шланг с зажимом. Готовую колонку заполняют на одну треть 0,57о-ным раствором поваренной соли. Предварительно замачивают на 30 мин 17 г сефадекса 0-25 (тонкий), добавляя порошок к избытку 0,5%-ного, раствора поваренной соли. (Его используют в качестве растворителя на протяжении всего опыта.) Сливают избыток растворителя с набухшего геля, а суспензию количественно переносят в подготовленную колонку. Через 5 мин открывают зажим. Частицы геля начинают оседать в потоке вытекающий из колонки растворитель постоянно пополняют. В итоге формируется готовый к работе слой геля объемом около 87 мл. Чтобы при внесении смеси не нарушить верхний слой геля, зажим закрывают и избыток растворителя удаляют пипеткой. На гель затем осторожно наносят раствор 20 мг крахмала и 30 мг глюкозы в 2 мл солевого раствора. Зажим вновь открывают, чтобы дать раствору впитаться в гель. Аналогичным образом еще раз промывают верхний слой 2 мл растворителя, после чего наполняют им колонку и начинают элюирование. С момента внесения образца элюат собирают в мерный цилиндр, содержащий 1 мл раствора Гг + К1. После того как с колонки сойдет 32 мл раствора, элюат начинает окрашиваться в синий цвет, что свидетельствует о появлении в нем крахмала. Положительную реакцию на крахмал дают 12—13 мл элюата, затем она быстро исчезает. Когда будет собрано 66—67 мл элюата, в следующих порциях, общий объем которых составляет 13— [c.18]

Избыток элюента из колонки удаляют почти полностью. Остатку дают впитаться в гель, после чего в один прием осторожно вносят пипеткой раствор образца (указания относительно объемов даны в гл. IV). После того как раствор впитается, по-вер.хность геля дважды промывают равными объемами элюента. Лишь после этого колонку заполняют растворителем и начинают элюирование. Имея должный навык, эти операции можно осуществлять при постоянном токе растворителя через колонку в противном случае рекомендуется при выполнении отдельных стадий перекрывать выход с колонки. [c.74]

Разделение веществ методом ГПХ не связано с сорбцией в буквальном смысле (хотя в более широком смысле основной процесс на гелях можно рассматривать как абсорбцию). Скорость движения компонентов смеси по колонке зависит от того, насколько проницаем внутренний объем гранул для разделяемых молекул. Не разделяются (в пределах своей группы) вещества смоле-кулами крупнее так называемого предела эксклюзии (порога проницаемости) и вещества с очень мелкими молекулами, которые беспрепятственно проникают в гель. Первые проходят через колонку быстрее всех (их удерживаемый объем равен свободному, или транспортному, объему колонки Vm), вторые задерживаются в колонке и выходят из нее последними, так как проходят наибольший путь, включая путь во внутреннем объеме зерен. Для каждого из гелей имеется область ограниченной проницаемости, в пределах которой скорость элюирования зависит от размера молекул (для однотипных молекул объем удерживания обратно пропорционален логарифму молекулярной массы). Вещества, молекулярные массы которых различаются на 10—25%, могут быть разделены методом ГПХ. [c.56]

При более высокой концентрации азота и присутствии водорода первая часть (примерно 300 мл) элюата хорошо очиш,ается перед измерительной бюреткой в азото-метре 9 (рис. 1), наполненном 50%-ной щелочью (КОН). Газовая смесь от 1 до 5 (Не — N2) пропускается через осушитель 10 и колонну с углем А длиной 120 см с помощью газа-носителя — воздуха. Эта колонна охлаждается сухим льдом 72 и при указанных условиях гелий и водород разделяются полностью (рис. 3). Хроматограмма получается обычным способом при помощи интерферометра или по теплопроводности. Сравнительная камера интерферометра наполняется при элюировании углекислотой, а при втором элюировании воздухом. Определение может быть проведено с помощью калибровочной кривой (но площади или по высоте пиков) в течение 10—20 мин. Время анализа можно еще уменьшить. [c.73]

В методе газо-жидкостной хроматографии подвижной фазой является инертный газ, а стационарной фазой служит жидкость, удерживаемая твердой поверхностью. Пробу в виде пара вводят в колонку компоненты, имеющие разную конечную растворимость в стационарной жидкой фазе, распределяются между этой фазой и газом по закону равновесия. Элюирование осуществляется пропусканием через колонку какого-либо инертного газа, например азота или гелия. Скорость миграции разных компонентов зависит от их способности растворяться в стационарной жидкой фазе. Компоненты с высоким коэффициентом распределения имеют низкую скорость продвижения. Наоборот, компоненты с низкой растворимостью в жидкой фазе мигрируют быстро. Качественная [c.269]

Преимущество фракционирования на колонках с гелем, заключающееся в большей разрешающей способности на единицу длины колонки и, следовательно, в более коротких колонках и меньших временах элюирования, обусловлено применением гранул геля небольшого диаметра. Меньшее сопротивление потоку жидкости наблюдалось при применении шариков сферической формы с очень узким распределением по размерам. Этот факт согласуется с данными Гамильтона [238] для ионообменной хроматографии. В этой же работе Гамильтон предложил также удобный гидравлический прибор для получения узких фракций шариков. Смесь шариков ионообменной смолы помещают в делительную воронку и следующие друг за другом но размерам фракции этих шариков поднимаются вверх и удаляются из воронки под действием потока воды возрастающей скорости, впускаемого через дно воронки. Поскольку несульфированные полистирольные шарики не смачиваются водой, для их разделения необходимо использовать смачивающие растворители, например ксилол или диэтилбензол. С помощью описанного способа легко удавалось получить фракции, содержащие 80% шариков, размеры которых отличались от среднего не более чем на 20%. На колонках, заполненных этими фракциями, достигали удовлетворительного разделения. [c.138]

На рис. 1 представлена одна из типичных хроматограмм разделения технического триэтаноламина в изотермическом режиме при расходе газа-носителя (гелия) 18 мл мин и давлении 385 мм рт. ст. на входе, 20 мм рт. ст. на выходе. Ввиду наложения пика воздуха на пик моноэтаноламина необходимо было провести опыты в режиме программирования температуры. Для этого на колонку наматывалась латунная трубка внутренним диаметром 2 мм на длину 35 см. Концы змеевика выводили из термостата наружу. Перед подачей образца через змеевик пропускали воду до определенной постоянной температуры колонки (110°). После выхода пика этиленгликоля поток воды прекращался и элюирование остальных компонентов осуществлялось при температуре 175°. [c.85]

Для того чтобы получить воспроизводимые спектры флуоресценции нерастворимых белков, необходимо начинать с полностью открытой кюветы. Микрокювету 4 с диском 5 (рис. 9.5) с помощью пастеровской пипетки наполняют гелем белок—агарозы (максимальный объем геля 100 мкл, но обычно достаточно 50 мкл) и гель немедленно покрывают 100 мкл буфера, пригодного для элюирования. Тефлоновый адаптер 3 соединяют с микрокюветой и ячейку частично собирают (части 3—7). Наконец, ячейку вставляют в кюветодержатель и помещают в спектрофлуориметр вместе с верхней частью (1). Затем с помощью перистальтического насоса через гель пропускают элюирующий буфер. Используют скорости потока 0,2—0,5 мл/мин. Все спектры записывают после того, как гель промывают в течение 10—15 мин буфером. Гели белок— сефарозы 4В облучают только в течение времени, необходимого для записи спектров излучения, для того чтобы фотоинактивация геля была минимальна. Образцы геля с присоединенным белком можно использовать повторно, если работать по описанной методике, причем показано, что фотоинактивация образцов белка незначительна. Легко можно получить спектры флуоресценции примерно для 0,2—300 мкг белка, ковалентно связанного с сефарозой 4В. [c.254]

Поток растворителя проходит только в пространстве между частицами геля. Следовательно, более крупные исключенные молекулы будут вымыты потоком из колонки первыми по времени. Меньшие по размеру молекулы задержатся в колонке. В обычных условиях прохождение через гель или диффузия молекул растворенного вещества внутрь геля происходят достаточно быстро по сравнению со скоростью элюирования. Поэтому можно принять, что в системе установилось диффузионное равновесие. Тогда разделение основывается на различных объемах внутри частиц геля, которые доступны молекулам растворенного вещества различных размеров. Молекулы, полностью исключенные из геля, элюируются при объеме элюирующей жидкости, равном объему пространства, окружающего частицы геля, или свободному объему Уд. Другие молекулы растворенного вещества элюируются при объеме жидкости, равной сумме свободного объема и той части внутреннего объема 7 , которая доступна этим молекулам. Элюирующий объем Fe некоторого компонента растворенного вещества равен, следовательно, = 7о + тр еКа— коэффициент объемного распределения. [c.112]

Недавно процесс проникания через гель был смоделирован на аналоговой электрической машине [198а]. С помощью такой модели можно предсказать влияние неравновесных условий на характер элюирования образца. Эта модель позволяет также решать обратную задачу, т. е. определять приближение к равновесным условиям на колонке путем сравнения экспериментальных и теоретических кривых элюирования. Подобные расчеты можно, разумеется, проводить только для колонок, на которых уширение зоны за счет неравномерной упаковки гораздо меньше, чем уширение, обусловленное, распределением молекул растворенного вещества между наружным и внутренним объемом. С помощью этой модели можно также проводить определение степени уширения зоны растворенного вещества, обусловленного тем или иным фактором. [c.122]

Довольно часто проводят определения молекулярных весов отобранных фракций и тем самым осуществляют калибровку колонки для данного растворенного вещества. Иногда бывает необходимо интерпретировать кривые элюирования в тех случаях, когда калибровка и исследование разрешающей способности системы для фракционируемых образцов непосредственно не проводились. Если колонка не слишком перегружена образцом и показано, что характеристические элюирующие объемы воспроизводятся в серии кривых, можно провести калибровку. По-видимому, можно принять, что степень вытеснения из геля находящихся в конформации статистического клубка молекул в очень разбавленном растворе определяется величиной эффективного гидродинамического диаметра этих молекул. На основании этого можно рассчитать калибровочную кривую по величинам элюирующих объемов для ряда охарактеризованных образцов другого полимера. Многие полимеры весьма сходны между собой по степени развернутости клубков, о чем свидетельствуют данные элюирования через колонку с гелем, а также характеристические вязкости этих полимеров. Поэтому можно провести предварительную оценку калибровочной кривой в терминах длины цепи. [c.151]

При более тщательном исследовании Флодин [19] установил следующие моменты. Действие колонки можно повысить наиболее эффективно путем уменьшения размера частиц декстранового геля. Вязкость исследуемого образца ставит некоторый предел применимости метода фильтрования через гели, однако эффекты разделения не зависят от концентрации растворенных веществ. Из раствора белка можно полностью удалить соли, используя для элюирования воду, но так как в этих условиях некоторые белки склонны выпадать в осадок, элюирование, видимо, лучше проводить при помощи летучего буферного раствора. Декстраны, помимо эффекта молекулярного сита, слабо адсорбируют ароматические и гетероциклические соединения кроме того, в зависимости от ионной силы и pH геля [20] может наблюдаться сильная адсорбция некоторых основных веществ. [c.219]

Остающиеся в растворе нуклеиновые кислоты очищают хроматографией на колонках с гидро исиапатитом. После элюции нуклеиновых кислот частицы геля можно отделить от раствора, отфильтровав их через бумагу ватман № 52 с помощью шприца [297]. Нуклеиновые кислоты, элюированные из геля, МОЖНО осаждать бромистым це-тилтриметиламмонием [1474]. [c.387]

Нередко в состав системы для ГВЭЖХ приходится добавлять дорогое устройство для эффективной дегазации растворителей продуванием гелия, действием вакуума на растворитель, подаваемый через специальные полупроницаемые трубки и т.д. Это связано с тем, что при смешении плохо дегазированных растворителей всегда выделяются пузырьки, так как растворимость газа в смеси растворителей обычно отличается от суммы растворимостей в чистых растворителях. Это особенно опасно при градиенте низкого давления, так как пузырек газа, попавший в клапанную систему и в насос, полностью нарушает их работу. Наконец, в градиентной системе существует довольно заметный объем от места формирования градиента растворителя до места его поступления в колонку обычно этот объем составляет от 1 до 3 мл или больше, поэтому состав растворителя, поступающего в колонку, отличается от того, который формируется в это же время. При работе на колонках малого диаметра (1—2 мм) и при небольших расходах растворителя (10—200 мкл/мин) это приводит к еще большим отличиям. Затруднительно гомогенное смешение сильного и слабого растворителей, поступающих в смеситель недостаточно эффективное смешение и неоднородность потока вызывают заметное увеличение шумов, что мешает использовать чувствительные шкалы детектора. Наконец, при градиентном элюировании практически исключается использование рефрактометрического детектора, так как изменение показателя преломления при изменении состава растворителя приводит к нарушению его работы. [c.66]

Сефадексы используют в качестве молекулярных сит при жидкостной хро-) матографии методом гель-фильтрации (синонимы гель-хроматография, гель-проникающая хроматография, молекулярно-исключакщая хроматография, экс-клюзиониая хроматография). Вещества с размерами молекул больше, чем размер пор геля, проходят через колонки с сефадексами без проникновения внутрь частиц геля, и элюируемый объем равен свободному, т. е. не занятому частицами геля объему колонки (обычно 38—42%). Мо/.екулы размером меньше, чем размер пор геля, будут проходить через зерна геля по этим порам, и в результате увеличения сечения колонки, проницаемого для таких молекул, их движение по колонке будет более медленным (элюируемый объем таких веществ будет больше свободного объема колонки). Другими словами, скорость движения отдельных веществ в колонках связана с коэффициентами распределения этих веществ между гелем и данным элюирующим раствором, чем больше коэффициент распределения, тем медленнее элюирование и тем больше величина элюируемого объема. [c.161]

Разделение на фильтрах из геля сефадекса позволяет использовать различие в молекулярном весе [21, 24, 126, 127]. Этот метод по своей эффективности приблизительно соответствует диализу, но может быть осуществлен гораздо быстрее. Линднер и др. [128] экстрагировали сухой препарат задней доли гипофиза свиньи (активность окситоцина и вазопрессина 2—3 Е /мг) пиридиноацетагным буфером. После нейтралит зации раствор пропускали через колонку с сефадексом G-25, элюировали этим же буфером и получили две фракции, дающие положительную реакцию с нингидрином. Первая, более подвижная фракция содержит окситоцин и вазопрессин в виде комплексов пептид — белок вторую фракцию, состоящую из низкомолекулярных неактивных соединений, отбрасывали. Десятиминутная обработка первой фракции 1 М муравьиной кислотой при 70 приводит к диссоциации комплекса и при повторном пропускании через сефадекс G-25 и элюировании 1 М муравьиной кислотой получили медленно передвигающуюся фракцию вазопрессина и окситоцина с активностью приблизительно 100 Е мг. [c.409]

Колонки и детекторы контроль потока подвижной фазы. Для гель-фильтрационной хроматографии с использованием декстрановых гелей обычно применяют простые стеклянные колонки диаметром 2,5 см и длиной 50 см. В таких колонках Уо равен от 50 до 100 мл, а (Уо Уг) —от 200 до 250 мл. Раствор пробы массой несколько миллиграммов вводят в колонку через ее верхнюю часть. Обнаружение зон растворенных веществ по мере их появления из колонки можно проводить посредством спектрофотометрического контроля элюата, измерением его показателя преломления или собирая аликвотные части для дальнейшего анализа. Подвижной фазе позволяют протекать через гeль-ф,ильтpaциoн yю колонну иод действием силы тяжести со скоростью около 3,5 мл/ч на каждый квадратный сантиметр сечения колонки. Так, для колонки диаметром 2,5 см скорость потока равна приблизительно 16 мл/ч, а время, необходимое для элюирования самых малых молекул, составляет около 16 ч. Большая скорость элюирования недопустима, так как мягкий гель деформируется потоком подвижной фазы и колонка выходит из строя (гель выдавливается или же спрессовывается и закупоривает колонку). [c.598]

Полученная слизь представляла собой раствор слизистого вещества в морской воде. Присутствие электролитов воды (особенно углекислых солей), обладающих способностью вступать в реакцию с кислотами и щелочами, затрудняет проведение достаточно точных титрований белков слизи. Поэтому слизь освобождали от солей морской воды путем гель-фильтрации через сефадекс Г-25 [91. При этом элюирование слизистого вещества проводили 0,1-мол. раствором хлористого натрия, присутствие которого создавало при титровании оптимальную ионную силу раствора. В связи с тем, что вследствие элюирования концентрация растворов слизистого вещества была ниже допустимой для потенциометрического титрования, элюаты [c.69]

Элюированные гелием газы пропускают через вторую аскари-товую колонку, чтобы обеспечить полноту удаления углекислого газа и паров воды. Элюированные газы проходят далее через разделительную колонку, которая предварительно промывается чистым гелием. Хроматограмму получают при помощи 1 л1в-потенциометра,, лента которого движется со скоростью 60 смЫас. [c.303]

Товарно-технические качества битума и выбор рациональных способов переработки определяются составляющими его компонентами. Малая изученность тяжелых нефтяных остатков не позволяет предсказывать поведение битумов в условиях практического их использования. Из вакуумных остатков 490—540 и >540°С сборной занадно-сибирской нефти выделены насыщенные углеводороды методом жидкостной адсорбционной хроматографии на силикагеле марки АСК. Элюирование проводили пет-ролейным эфиром (70—100 °С) с отбором проб по 10 мл через каждые 15 мин. Пробы объединялись но показателю преломления (ид до 1,49). Выделенный концентрат насыщенных углеводородов разделяли следующим образом. Нормальные алканы отделены клатратообразованием с карбамидом но ГОСТ 15095— 69. Изопарафино-пафтеновый концентрат разделяли методом гельфильтрационной хроматографии на Sephadex аН-20 [1]. Гель, набухший в течение суток в тетрагидрофуране, переносили в стеклянную колонну диаметром 10 мм и высотой 600 мм. Навеску пробы (0,3—0,5 г) растворяли в 2 мл тетрагидрофурана и вносили в колонну. Устанавливали скорость элюирования [c.135]

Плазматические мембраны лимфоцитов (содержащие 20 мг общего белка) экстрагировали 5 мл 1%-ного дезоксихолата, после чего растворимую фракцию (содержащую 85% мембранного белка) фильтровали через колонку с аффинным сорбентом. При элюировании 1 % -ным раствором дезоксихолата до нулевой базовой линии (при 280 нм) отмывали примерно 75% сорбированного белка. Рецепторные гликопротеины (составляющие 5% от фракции мембранных белков) элюировали раствором метил-а-D-глюкоииранозида (20 мг/мл) в 1%-ном дезоксихолате. Элюат подкисляли 2%-ной уксусной кислотой (добавляя 0,1 объема элюата), выпавший осадок промывали тремя порциями по 10 мл 95%-ного этанола для удаления моносахарида и дезоксихолата, а затем высушивали в токе воздуха. По данным электрофореза в акрил амидном геле (в присутствии 0,1%-ного додецилсуль-фата натрия) полученный препарат содержал пять компонентов. [c.454]

Скорость подачи здесь легко регулируется изменением разницы в уровнях сосудов. Максимально возможная скорость элюирования зависит от величины и формы частиц геля, а также от их упругости. Из графика (фиг. 14) видно, что при работе на различных сефадексах, обладающих сферическими ма-лонабухающими гранулами, скорость потока через столбик геля линейно возрастает с увеличением давления однако это положение справедливо лишь для области относительно невысоких давлений [61]. Подобными свойствами обладает жесткий аэрогель. Способность сильно набухающих пористых гранул легко деформироваться показана на фиг. 14 на примере сефадекса 0-200 при повышении гидростатического [c.78]

М хлорид магния (pH 7,5). Около 90% фермента, пропущенного через колонку, не задерживаются и только 10% остаются связанными в колонке посредством электростатических связей и могут быть элюированы растворами с высокой ионной силой, например 1 М хлористым натрием. На основании этих результатов можно сделать вывод, что в данных условиях аминная часть лиганда мало участвует в связывании фермента. При хроматографии р-галактозидазы в аналогичных условиях (единственное отличие состояло в том, что к 0,05 М трис-НС1-буферу не добавлялись соли) почти весь нанесенный фермент был неспецифически связан в колонке 85% фермента десорбировалось при увеличении ионной силы буферного раствора добавлением 1 М хлористого натрия. Очень хорошие результаты получались, если связывание р-галак-тозидазы на замещенном геле проводилось при высокой ионной силе (1,8 М фосфатный буферный раствор), а последующее элюирование при помощи растворов с понижающимся линейным градиентом ионной силы. [c.96]

Для сорбции лучше всего образец выделяемого вещества растворять непосредственно в буфере, из которого будет производиться сорбция, и, если необходимо, проводить замену состава солей, присутствующих в образце, с помощью диализа или гель-фильтрации. Если вещество, образующее в данных условиях прочный комплекс с иммобилизованным аффинным лигандом, выделяют колоночной хроматографией, то объем образца, вводимого в колонку, может быть любым. Однако, если выделяют аффинной хроматографией вещество с низким сродством к связанному аффинному лиганду, объем наносимого образца не должен превышать 5% удерживаемого объема, для того чтобы предотвратить элюирование выделяемого вещества неадсорбированным материалом. Если выделяют вещество с низким сродством к связанному аффинному лиганду, его элюирование с колонки происходит часто даже без замены буфера. В этом случае выделяемое вещество получают в разбавленном растворе. Для иллюстрации сказанного можно сопоставить хроматографию химотрипсина на сефарозе с присоединенным метиловым эфиром е-аминокапронил-О-триптофана с хроматографией этого же вещества на сефарозе с непосредственно связанным метиловым эфиром О-триитофаиа (рис. 5.4) [8]. Для элюирования химотриисина с нерастворимого носителя, на котором ингибитор укреплен через е-аминокапроновую кислоту в качестве прострапственной группы, необходимо изменение pH, при этом фракция химотрипсина элюируется в виде острого пика. Если ингибитор присоединен непосредственно к нерастворимому носителю, его пространственная доступность понижена, и химотрипсин только замедляет свое движение через колонку. Фермент элюируется в значительно большем объеме, при том же pH, в непосредственной близости к неактивному материалу. [c.264]

Гель-хроматографическому разделению подвергали натрийфосфатное стекло, состоящее из полифосфатов низкой степени полимеризации пиро-, Триполи-, тетра, и пентаполифосфата с примесью высокомолекулярных фосфатов (рис. 1, а). Разделение исследуемого образца на составляющие компоненты осуществлялось при элюировании образца в количестве О.Г) г. в Г) лгл воды (со скоростью 17—20 мл/час) через колонну высотой 175 см, диаметром 1.3 см, заполненную сефадексом марки G-15. Фракции элюата объемом 1 мл анализировали хролтатографически на бумаге по методике, опубликованной paiiee . [c.87]

Для отбора пробы краны устанавливают так, что поток гелия проходит мимо сосуда, содержащего пробу, по пути гпжзиклм, выходя в атмосферу через ротаметр н. В барботер di наливают дистиллированную воду 25 мл), а пробу анализируемого вещества (10—15 г) измельчают до 20—40 меш и помещаю т в сосуд для пробы д . Через мембрану с шприцем с приспособлением Чани вводят в газовую линию внутренний стандарт. Колонку з погружают в сосуд Дюара с жидким азотом. Уровень жидкого азота должен быть на 38 мм выше уровня набивки колонки, чтобы летучие вещества конденсировались на пробке из стеклянной ваты, помещенной в колонку з как раз над распределяющей жидкостью. Теперь краны г я ж поворачивают так, чтобы поток газа проходил через сосуд с пробой. Камеру д погружают в горячую воду и в течение 1 час собирают летучие компоненты. Затем поток газа направляют по линии гпжзиклм, а камеру, содержащую пробу, удаляют из системы. Сосуд с жидким азотом удаляют из-под колонки з и заменяют пустым сосудом Дюара. В момент удаления колонки з из хладоагента включают секундомер и по прошествии времени, достаточного для элюирования из нее углекислого газа (определяемого в предварительных опытах), ловуш- [c.233]

Методика обессоливания. Скорость элюирования зависит от размера частиц геля. Крупные частицы (биогель Р-2, 50—100 меш пли сефадекс ( i-25, 100—300 мк) почти не препятствуют протеканию раствора при обессоливании иа этих гелях скорость элюировашм составляет до I maImuhI m . Для того чтобы раствор протекал с такой н<е скоростью через более мелкий биогель Р-2 (100—200 меш), его следует прокачивать под давлением около 0,4—0,8 кг/см . Сосуд с раствором образца подсоединяют к насосу и колонке через 3-ходовой кран (фиг. 6). Пасос снабжен часовым [c.95]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология