Разделение олигопептидов

Действительно, многочисленные экспериментальные факты подтверждают этот теоретический прогноз. Наибольшее количество работ посвящено изучению миграции энергии от тирозина к триптофану. В опытах на модельных соединениях (ди- и олигопептидах, содержащих тирозин и триптофан) в спектрах возбуждения триптофановой флуоресценции выявлен вклад тирозинового поглощения — сенсибилизированная флуоресценция. Наибольшая эффективность миграции энергии отмечалась для тех соединений, в которых тирозин и триптофан непосредственно соединены между собой пептидной связью. Разделение тирозина и триптофана алифатическими аминокислотами в полипептиде, т. е. увеличение расстояния между ними, снижало эффективность миграции энергии. С помощью метода спектров возбуждения выявлен также тирозин-триптофановый перенос энергии и в белках. Так, по данным Кронмана и Холмса, эффективность миграции энергии у пепсина составляет 80, у карбоксипептидазы — 81, у трипсиногена — 91, [c.253]

Пластинки могут быть использованы для разделения аминокислот, олигопептидов, аминов и др. [c.133]

С химической точки зрения гормоны гипофиза представляют собой либо олигопептиды, например окситоцин и вазопрессин, о которых сказано выше, либо полипептиды со сравнительно небольшими молекулами, состоящими из одной полипептидной цепи. Адренокортикотропный гормон (АКТГ), называемый также кортикотро-пином, выделенный из гипофиза свиньи, был разделен в процессе операций очистки хроматографическим путем и другими методами на два компонента — кортикотро-пины А иВ (применяют также обозначения аир). Кортикотропин Р имеет молекулярный вес 4567, установленный методом центрифугирования. При номощи методов, впервые примененных к инсулину, установлено, что препараты А, а и р являются тождественными или очень сходными соединениями, обладающими полипептидной цепью, состоящей из 39 аминокислотных остатков, происходящих из 15 аминокислот, с серином у аминного конца и фенилаланином у карбоксильного конца. Была определена последовательность всех аминокислот, причем найдено, что препараты, выдо-ленные из различных животных, несколько отличаются друг от друга строением определенных участков цепи. Кортикотропин В образуется из кортикотропина А в результате потери 11 аминокислотных остатков от карбоксильного конца таким образом, он содержит в своей цепи всего 28 аминокислот. [c.448]

Методология и технические приемы установления первичной структуры белка, основанные на определении М-и С-концевых аминокислот, включающие фрагментацию полипептидной цепи, разделение олигопептидов, пептидов, определение аминокислотной последовательности в олигопептидах, являются предметом биохимии и описаны в [85, 91,92] [c.882]

Бумажный электрофорез является простейшим методом разделения аминокислот и олигопептидов с молекулярной массой до 2000—4000. При низких градиентах потенциала хорошие результаты дает нисходящий электрофорез (до 1500 В) при pH 5,6, [c.331]

XI. Разделение олигопептидов для определения последовательности аминокислот в белках [c.239]

При сравнении конформационных возможностей природных олигопептидов и белков следует иметь в виду некоторую условность такого разделения. Встречающиеся в природе последовательности содержат от нескольких единиц до многих сотен аминокислотных остатков. По мере [c.403]

В заключение можно сказать, что с помощью ГХ можно идентифицировать в виде дипептидов большинство природных аминокислот. Возможность детектирования многих аминокислот даже в виде трипептидов, а в исключительных случаях и тетрапептидов, дает в руки исследователя быстрый и относительно несложный метод определения последовательности олигопептидов средней длины. ГХ применяется сейчас в основном как быстрый и эффективный метод разделения. Более полное использование достоинств ГХ до- [c.349]

Разделение пептидов. Для пептидов в принципе применимы те же способы разделения, что и для аминокислот. Вследствие гораздо большего числа всех возможных ди-, три- и олигопептидов их разделение [c.914]

Как следует из названия главы, в ней рассмотрены методы разделения аминокислот и олигопептидов, причем особое внимание уделено последним достижениям в этой области, а также сравнительно новым методикам. Методы, не претерпевшие существенных изменений со времени выхода в свет последнего издания этой книги [1], либо вообще не упомянуты (электрофорез и ТСХ), либо только дополнены (ионообменная хроматография). Применение рассматриваемых методов в клинической химии обсуждается в недавно опубликованной книге Бремера и др. [2]. [c.37]

Разделение аминокислот, дипептидов и олигопептидов [c.41]

Главное требование, предъявляемое к методикам хроматографического анализа пептидов, заключается в том, чтобы они позволяли разделять близкородственные аналоги. По традиции разделение олигопептидов проводят методом ионообменной или тонкослойной хроматографии. Однако разработанный позднее метод ВЭЖХ позволяет следить за ходом реакций, контролировать чистоту синтетических пептидов, изучать пути метаболизма. а также осуществлять препаративное разделение смесей. В силу полярности незащищенных пептидов их разделение на силикагеле сопряжено со значительными трудностями [142— 144], поэтому чаще всего пептиды разделяют в виде их производных. [c.59]

В 10-13 главах были обсуждены результаты теоретического конформационного анализа достаточно представительной группы олигопептидов Более полный перечень природных пептидов и их синтетических аналогов, пространственное строение которых рассмотрено автором данной монографии и сотрудниками до начала 1995 г., приведен в табл. 111.32. Напомним, что наш интерес к пространственной структуре сравнительно низкомолекулярных пептидов связан, прежде всего, с белками, изучение структурной организации которых требовало получения детального представления о характере и значении средних межостаточных взаимодействий и умения давать им правильную количественную оценку. Согласно бифур-кацинной теории (см. разд. 2.1) сборка белка начинается с образования на локальных олигопептидных участках аминокислотной последовательности конформационно жестких нуклеаций, разделенных лабильными участками Их формирование должно иметь много общих черт, если почти буквально не совпадать, с процессом, особенно на первых его стадиях, свертывания белковой цепи. Поэтому априорный расчет трехмерной структуры белка, математическое моделирование механизма спонтанной, быстрой и безоши- [c.384]

Эфиры N-замещенных аминокислот, ди- и трипепти-дов разделяли [189] на слое силикагель — гипс в системах хлороформ— ацетон (9 1) и (8 2) или циклогексан — уксусная кислота (1 1). Для разделения ацильных производных эфиров олигопептидов и ди- и трииептидов с полярными заместителями в боковой цепи применяли систему хлороформ — метанол (9 1). [c.99]

В гидрофильной фазе системы растворителей, а затем уравновешивали с липофильной фазой [139]. В табл. 29 приводится ряд систем растворителей, которые нашли применение при разделении других веществ методом распределительной хроматографии на гелях сефадекса. Для выделения токсинов (циклических олигопептидов) из Amanita phalloides очень [c.197]

Хроматография олигопептидов является трудной задачей из-за очень близких физико-химических свойств разделяемых компонентов. Например, предпринятые ранее попытки разделить олигопептиды лизина с помощью хроматографии на бумаге привели к разделению только семи низших членов гомологического ряда (от лизина до гептализина), высшие члены разделению не поддавались. [c.182]

Хроматография гидролизата полилизина, содержащего набор всех олигопептидов начиная с лизина, на карбоксиметилцеллюлозе с градиентом концентрации Na l позволила получить разделение первых 20 членов гомологического ряда. В этом случае, как оказалось, пептиды появляются на выходе колонки в порядке возрастания молекулярного веса, номер пика соответствует числу остатков лизина в пептиде. При этом имеет место линейная зависимость между числом остатков лизина в пептиде и молярностью КаС1, требующейся для элюции этого пептида. Очень важно тщательное соблюдение условий разделения (постоянство объема [c.182]

Таким образом, видно, что проблема фракционирования олигопептидов как кислого, так и основного характера успешно решена. Нейтральные полиаминокислоты пока разделить не удалось, если не считать работ Янари с сотрудниками по разделению трех первых членов гомологического ряда полиглицина. [c.184]

Введение в практику обращенно-фазовой ВЭЖХ значительно расширило возможности методов разделения и выделения олигопептидов [145—156]. Удерживание разделяемых образцов на такой фазе зависит от силы их гидрофобных взаимодействий со связанными с носителями алкильными остатками с увеличением гидрофобности анализируемого соединения возрастает время его удерживания [145]. Присутствие полярных растворителей (например, спиртов) в элюенте или полярных функциональных [c.59]

При ковалентном закреплении оптически активных краун-эфиров можно получить хиральную фазу, для которой устойчивость комплексов по типу гость-хозяин будет различной для оптических антиподов разделяемых соединений. Хотя первые разделения оптических изомеров были сделаны более 25 лет назад [35], данные хиральные фазы получили ограниченное распространение из-за сложности синтеза оптически активных краун-эфиров, высокой стоимости и весьма ограниченного круга разделяемых соединений (табл. 7.4). Последний фактор связан с определенными требованиями к разделяемым энантиомерам по размеру и наличию нескольких функциональных групп для координации по гетероатомам привитого макроциклического соединения. Только в этом случае комплексообразование гость — хозяин будет протекать в заметной степени. Аналогичный механизм разделения реализуется на хиральных неподвижных фазах с ковалентно закрепленными циклическими олигопептидами (ванкомицин, тикопланин, тикопланина агликон), циклическими олигополисахаридами (а-, /3-, 7-циклодекстринами). Эти селекторы более доступны и имеют дополнительные возможности для взаимодействий с энантиомерами органических соединений за счет заместителей в боковой цепи. Основными типами взаимодействий являются водородные связи и диполь-дипольные взаимодействия, поэтому на таких хиральных фазах удобно разделять небольшие молекулы с несколькими полярными группами. [c.368]