Кадмий-нингидрин

Идентификация аминокислот и пептидов во фракциях. А. Нингидриновая реакция. Нингидрин реагирует со всеми аминокислотами, имеющими а-МНа-группу, давая фиолетовое окрашивание, за исключением пролина или оксипролина, в реакции с которыми нингидрин дает желтое окрашивание.Некоторые примеси (медь, кадмий и др.) могут влиять на цвет пятен. Для проявления хрома- [c.192]

Проявление нингидрином. Раствор нингидрина наливают в ванночку и равномерно пропитывают им хроматограмму. Хроматограмму высушивают под тягой и выдерживают в темноте при комнатной температуре около 12 ч. В этих условиях с нингидрином реагируют все а-аминокислоты (другие аминокислоты дают реакцию при более высокой температуре — около 100°С). Проявление хроматограмм при качественной хроматографии можно ускорить, помещая последние на 5—10 мин в термостат при 60° С. Окраска, получаемая при проявлении аминокислот нингидрином, неустойчива. Ее можно закрепить, опрыскивая проявленную хроматограмму из пульверизатора раствором ацетона, содержащим азотнокислую медь. Стойкую окраску можно получить при внесении в нингидриновый реактив кадмия (с. 135) или стронция. Окраска сохраняется в течение нескольких недель при проявлении аминокислот смесью 1%-ного раствора нингид-рнна в ацетоне и 1%-ного раствора хлористого стронция в 20%-ном растворе СН3СООН (1 6). [c.129]

Приготовление кадмий-нингидрина. 1,0 г нингидрина растворяют в 100 мл ацетона. 100 мл ацетата кадмия растворяют в 10 мл дистиллированной воды и прибавляют 5 мл уксусной кислоты. Оба полученных раствора объединяют и хранят в склянке из темного стекла. [c.193]

Нингидрин — ацетат кадмия [c.374]

Раствор 0,2 г нингидрина, 0,5 г ацетата кадмия и 2 мл ледяной уксусной кислоты в 100 мл этанола (ацетона). После опрыскивания хроматограмму выдерживают 20 мин при 120 °С. [c.374]

Растворяют 0,5 г ацетата кадмия в смеси 50 мл воды и 10 мл концентрированной уксусной кислоты. Доводят до объема 500 мл ацетоном. К порции этого раствора прибавляют твердый нингидрин до конечной концентрации 0,2 7о. После опрыскивания хроматограмму наг девают 15 мин при 60 °С. Отмечают пятна аминокислот сразу же и через 24 ч хранения при комнатной температуре. Не возникает окрашенного фона, если хроматограмму после обработки реагентом без нагревания оставляют на ночь в темноте при комнатной температуре. У некоторых соединений (таурин, треонин) окраска проявляется очень медленно. Чувствительность обнаружения [c.269]

Окрашивание реагентом нингидрин — ацетат кадмия. Нингидрин хранят в виде 0,25%-ного (масс./об) раствора в ацетоне, а ацетат кадмия — в водной уксусной кислоте (1 г Сс1(СНзС00)2 2Н20 — 50 мл ледяной уксусной кислоты и 100 мл воды). Бумагу погружают в смесь, приготовленную из 100 мл раствора иингидрина и 15 мл раствора ацетата кадмия, сушат при комнатной температуре и затем нагревают при 100 °С в тече 1ие [c.363]

Для получения проявителя смешивают 100 мл раствора I и 20 мл раствора 2. Кадмий-нингидриновый реагент дает стабильную красную окраску со всеми аминокислотами (кроме Про, который в первые минуты проявления желтеет, а через несколько минут обесцвечивается). При одномерном разделении 16 аминокислот для достоверного отличия Гли от Ала, имеющих близкие значения Яр целесообразно применять коллидиновый раствор нингидрина, [c.248]

Шефер, Пук и Ян изучали поведение эпоксидных соединений при хроматографировании и методы их проявления на бумаге, а также хроматографирование производных эпоксидных соединений. Авторы проверяли методику хроматографирования эпоксидных соединений в смеси растворителей н-пропиловый спирт — вода — петролейный эфир (7 2 1) и последующего открытия их растворами Ыа- ЗдОз и фенолфталеина. Показано, что эта методика дает удовлетворительные результаты лишь для глицидола, диглицидного эфира и 1,2-эпокси-З-феноксипропан (чувствительность 150 мкг/мл). Лучшие результаты дает проявление пятен на бумаге при помощи Na2S20з и бромтимолового синего или путем превращения эпоксидных соединений в а-оксиамины при обработке хроматограммы газообразным аммиаком с последующим опрыскиванием раствором нингидрина с хлористым кадмием или раствором о-ацетоацетилфенола. [c.138]

Количественное определение глютаминовой кислоты проводилось по следующему методу [12]. Хроматограмму протягивали через 1%-иый раствор нингидрина, испаряли ацетон на воздухе (1—2 мин) и для развития окраски пятен выдерживали в течение 25 мин в термостате при 60 . Нингидриковые производные аминокислот элюировали 4 мл 40%-ного метилового спирта i 2 мл 0,5%-ного раствора хлористого кадмия в 40%-ноы метиловом спирте в течение 2 ч. Растворы колориметрировали на колориметре ФЭК-М со светофильтром № 2 (длина волны 530 ммк). В связи с тем, что цветовой выход нингидриновых производных аминокислот подвержен некоторым колебаниям и оптические плотности растворов различаются даже для различных хроматограмм из одной камеры, на каждый лист наносили стандартный раствор аминокислоты в количестве 10—20у. [c.214]

Мешающие вещества. В сточных водах могут содержаться ве- щества, ингибирующие реакцию с нингидрином. Устранить их влияние разбавлением пробы невозможно. При подозрении на возможность их присутствия следует применять метод стандартной добавки и, если окажется необходимым, вводить соответствующую поправку. Если проба содержит тяжелые металлы (медь, кадмий, железо) в концентрациях, превышающих 5 мг/л, надо ввести со-отвественно большее количество цианида. [c.68]

Весьма существенна зависимость интенсивности окраски раствора от времени проведения реакции, т. е. от времени нагревания. Графически эта зависимость представляет собой кривую с максимумом, характерную для консекутивной реакции, указывающую на то, что в данном случае одновременно протекают, по крайней мере, две реакции образование окрашенного соединения (ди-кетогидриндилидендикетогидринамина) и разрушение его с образованием неокрашенных продуктов. Интересно, что увеличение концентрации нингидрина в реакционной смеси, способствуя более полному протеканию первой реакции, в то же время ускоряет вторую, т. е. избыток нингидрина разрушает образующееся окрашенное соединение. Вследствие этого чувствительность реакции аминокислот с нингидрином в водном растворе сравнительно невелика. Таким способом можно определять аминокислоты в количествах 25—80 мкг и более в пробе (в пересчете на аминный азоту. Окраска раствора неустойчива и развивается довольно неравномерно. Более равномерное развитие окраски наблюдается при связывании образующегося в результате реакции аминокислот с нингидрином соединения в комплекс с ионами некоторых тяжелых металлов, например с ионами двувалентного кадмия. [c.64]

Реактив. В смеси 50 мл воды и 20 мл уксусной кислоты растворяют 0,5 г ацетата кадмия и доводят объем смеси до 500 мл иропанолом. Отбирают нужное количество раствора, добавляют нингидрин (с точностью 1 мг) с таким расчетом,чтобы концентрация последнего составила 0,2% (масса/объем). [c.261]

Эссер [131] разработал количественный метод определения аминосахаров. Обработанное нингидрином пятно соскабливают в раствор ацетата кадмия в метаноле и измеряют поглощение комплекса при 494 нм. [c.572]

Содержащиеся в речной и в морской водах аминокислоты могут быть как естественной примесью, так и следствием биологического загрязнения воды. Их можно концентрировать и выделять из воды путем адсорбции на сильнокислотной катионообменной смоле при низких значениях pH среды. Затем, если необходимо, их можно разделить методами ионообменной хроматографии на колонке с катионитом, тонкослойной хроматографии или хроматографии на бумаге, используя общепринятые методики. Согласно типичной методике [62], образцы воды объемом 1 л пропускают через небольшую колонку, заполненную Н+-формой сильнокислотной катионообменной смолы. Аминокислоты затем вымывают небольшим объемом концентрированного водного раствора аммиака. Элюат выпаривают досуха и фотометрически с использованием реагента нингидрин — хлорид кадмия рпределяют суммарное со- [c.514]

Контроль степени чистоты пептидов. Гомогенность пептидов может быть определена двумерным разделением на большом листе бумаги ватман 3 ММ (460X570 мм). Б первом направденни — электрофорез в системе пиридин — уксусная кислота —вода (10 100 2800), pH 3.6, 2,2 кВ, 80 мин (могут быть использованы системы с другими pH). Во втором направлении — хроматография в системе я-бутанол — пиридин уксусная кислота — вода (150 100 30 120). Локализация пятен флуорескамииом или реагентом нингидрин-кадмий. [c.235]

Нингидрин — ацетат кадмия 148. В отличие от иингидрина этот реагент дает прочное окрашивание (для всех аминокислот — красное, для пролина — желтое), не выцветающее со временем. [c.269]

Высушенный после электрофореза или хроматографии лист бумаги нсс.ю-дуют в ультрафиолетовом свете для локализации флуоресцентных пятен (окисленные остатки триптофана). Пептиды затем проявляют обработкой флуорескамииом [74] и/или реагентом нингидрин — ацетат кадмия [28]. [c.363]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология