Двумерное разделение

Двумерное разделение пептидов, наиример гидролизатов белков, на целлюлозных н силикагелевых пластинках, где в одном (чаш е первом) направлении используется электрофорез в тонком слое (ТСЭ) при кислом pH буфера, а во втором — распределительная ТСХ. Оно применяется как для целей идентификации и сопоставления родственных белков (например, для выявления мутационных или патологических изменений), так и в качестве препаративного метода для последуюш,его анализа аминокислотной последовательности в пептидах. [c.460]

На рис. 1-13 приведены результаты двумерного разделения гидролизата В-цепи инсулина на силикагеле О. [c.58]

Весьма наглядно двумерное разделение аминокислот на бумаге —метод отпечатков пальцев . В этом случае сорбентом [c.72]

Независимость результатов детектирования от формы зоны является важным фактором при исследовании экстрактов. В этих условиях становится возможным получение дополнительной информации за счет сравнения пятен, полученных при одномерном и двумерном разделении. [c.193]

Двумерное разделение взаимодействий [c.428]

Рис. 7.1.1. Простой пример двумерного разделения спектр С с неподавленными протон-углеродными взаимодействиями и перекрывающимися мультиплетами можно расшифровать с помощью 2М-спектра, в котором Ш1-область содержит информацию только о химических сдвигах, а в ш2-области проявляются как константы взаимодействия, так и химические сдвиги. Этого можно достичь при включении щироко-полосной развязки в период эволюции

Гл. 7. Двумерное разделение взаимодействий [c.432]

Двумерное разделение в гетероядерных системах [c.438]

В случае двумерного разделения взаимодействий и Жгз возможны четыре различные ситуации. [c.469]

В текущей литературе очень часто встречаются описания двумерного разделения пептидов (например, триптических гидролизатов белка) на пластинках микрогранулированной целлюлозы, где в первом направлении проводится электрофорез в кислой среде, а во [c.485]

Особенно легко и быстро удается разделить смесь аминокисаот с помощью комбинации двумерного разделения, например тонкослойного электрофореза на целлюлозе и хроматографии (метод отпечатков пальцев ). Сначала проводят электрофорез (низковольтный электрофорез без охлаждения, 20 В/см, муравьиная кислота), а затем хроматографируют во втором направлении, например с элюентом состава /Г Ре/п-бутанол метанол пиридин муравьиная кислота вода (33 43 9,6 0,4 20). В слу- [c.58]

Существует три этапа в этом классическом методе анализа последовательности. Первоначально РНК расщепляют иа фрагменты умеренной длины (примерно 50 пар оснований) частичным гидролизом РНазой. Затем анализируют общий состав оснований этих дискретных фрагментов с последующим их расщеплением до маленьких блоков, для которых можно непосредственно установить последовательность оснований. И наконец, большие по размеру фрагменты располагают в нужном порядке, используя частичное перекрывание последовательностей. Такие частичные перекрывания возникают в результате различных способов расщепления, получаемых при действии панкреатической РНазы (специфичной к пиримидинам) и такадиастазы Т] (специфичной к гуанозину). Сложное разделение большого числа фрагментов, получаемых в результате частичного расщепления нуклеазами, удается наилучшим образом осуществить при использовании двумерного разделения ( фингерпринт ), сочетая ионофорез на ацетате целлюлозы при pH 3,5 в одном направлении и ионофорез- на ДЕАЕ-целлюлозной бумаге при кислых значениях pH [30]. Во всех случаях фрагменты детектируют без деструкции с использованием Р-меченных нуклеотидов. [c.193]

Непрерывная стационарная двумерная хроматография с использованием вращающегося щелевого зазора была первоначально предложена Мартином [49]. После этого многие разрабатывали эту систему, используя либо вращающийся щелевой зазор, либо серию колонок, как в барабане пистолета. Более раннее экспериментальное оборудование рассмотрено Свенссо-ном и сотр. [50]. Применение для ситовой хроматографии рассмотрено Николасом и Фоксом [51]. Современный непрерывный хроматограф высокого давления был разработан группой исследователей в Окридже [52, 53]. Вопросы соотношения между различными одномерными и двумерными разделениями были [c.172]

Для двумерного разделения используют 4 смеси растворителей, которые применяют в трех разных комбинациях 1) н-бутиловый спирт — ацетон — диэтиламин — вода (10 10 2 5), 2) изопро-панол — муравьиная кислота — вода (40 2 10), 3) втлр-бу-тиловый спирт — 2-бутанон (метилэтилкетон) — дициклогексила-мин — вода (10 10 2 5), 4) фенол — вода (75 25) в атмосфере 3%-ного ЫН40Н. [c.234]

Тонкослойная хроматография на силикагеле оказалась весьма полезной для идентификации фенйлтиогидантоиновых производных аминокислот (ФТГ-аминокислот). Для предварительного определения этих соединений Бреннер и др. [4] рекомендовали двумерное разделение сначала в смеси хлороформ—метанол (9 1) и затем в смеси хлороформ — муравьиная кислота (100 5). Чтобы идентифицировать ФТГ-аминокислоты, на той же хроматографической пластинке фракционируют стандартные растворы известных аминокислот. [c.236]

Комбинированное использование тонкослойной гель-фильтрации с электрофорезом или иммунодиффузией до настоящего времени представляет собой один из наиболее тонких методов микроанализа белков. Хансон и др. [10] разработали метод двумерного разделения, используемый для анализа белков. На первом этапе белки подвергают гель-фильтрации в тонком слое сефадекса G-200 или G-100, а на втором — электрофорезу. Они предложили прибор, в котором хроматографическую пластинку можно закреплять под углом для гель-фильтрации и горизонтально для электрофореза. В описанных экспериментах использовали стеклянные пластинки размером 30 x 30 см и толщиной 1 мм, на которые наносили слой геля сефадекса толщиной 0,5 мм. Для набухания сефадекс оставляли в 0,05 М вероналовом буферном растворе pH 8,6. Сначала проводили гель-фильтрацию, а затем в направлении, перпендикулярном первому, в течение 3 ч вели электрофорез при градиенте напряжения 10 В/см. Этот метод весьма успешно был применен для анализа сывороток крови человека, спинномозговой жидкости и гормона роста. [c.240]

Метод круговой ТСХ предназначен для проведения градиентного разделения, поскольку его рабочая методика (разд, 3,3,6) проста, результаты воспроизводимы, а занимающее много врел1ени предварите.тьное приведение системы в равновесие проводить не обязательно (в противоположность ЖХ), Это в известной степени компепси-рует большой недостаток КТСХ по сравнению с линейной — невозможность проведения двумерного разделения, о котором, однако, не следует забывать, [c.87]

В большинстве случаев пробы афлатоксипов определяли на одной пластинке со стандартами, разделенными в одном направлении (рис. 8.24). Однако в этом случае разность наклонов калибровочных графиков, соответствующих двумерному и одномерному разделению, достигала 15%, что обусловлено воздействием второго элюента при двумерном разделении на квантовый выход флуоресценции определяемого вещества. Чтобы предотвратить воздействие второго элюента, Белжаарс [15 предложил так называемый антидиагональный метод, основанный на элюировании определяемых и стандартных растворов идентичными растворителями на одних и тех же пластинках. Как показано на рис. 8.24, одну пробу и два стандарта наносят в левом углу пластинки не по диагонали. Для идентификации на участки сорбента, где проводят одномерное разделение, дополнительно наносят два стандарта. С помощью подобранного элюента примеси перемещают в верхнюю часть пластинки (рис. 8.24). Для количественной оценки участки позади и впереди фронта афлатоксипов при облучении УФ-светом следует отметить точками, которые помогают определить соответствующие участки сорбента на стадии сканирования фотометром. Количественные результаты представлены па рис. 8.25. [c.208]

При двумерном разделении в левый угол квадратной пластинки размером, например, 20X20 см наносят смесь веществ хроматограмму элюируют, высушивают и повторно элюируют в той же или в другой системе растворителей в направлении, перпендикулярном направлению первого проявления. Двумерная хроматография широко используется для разделения сложных смесей веществ (аминокислоты, пептиды). Иногда между первым и вторым разделениями смесь веществ подвергают химической или физической [c.97]

В гомоядерных методах двумерного разделения могут возникать артефакты, если под действием рефокусирующего импульса угол поворота отклоняется от своего номинального значения = -к [7.10]. В разд. 8.3.1 показано, что при значительных ошибках в углах поворота 2М-спектр напоминает корреляционный спектр с задержкой регистрации (так называемый спектр корреляций спинового эха). Если ошибки малы, то нежелательные пути переноса когерентности можно устранить с помощью процедуры Ехогсус1е [7.11] или с помощью более простой последовательности с трехступенчатым циклическим изменением фазы [7.12]. Осложнения, возникающие из-за сильного взаимодействия, будут рассмотрены в разд. 7.2.3. [c.438]

Смотреть страницы где упоминается термин Двумерное разделение: [c.148] [c.173] [c.461] [c.194] [c.173] [c.27] [c.206] [c.211] [c.430] [c.434] [c.436] [c.438] [c.440] [c.442] [c.444] [c.446] [c.448] [c.450] [c.452] [c.458] [c.462] [c.464] [c.472] [c.476]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология