Клеточное ядро, изолирование

Серьезные помехи в проведении реакции Фельгена иногда создаются под влиянием ядерных белков [13], [17]. Как выяснилось, определенные фракции негистоновых белков клеточного ядра являются ингибиторами реакции Фельгена. Эти белки сравнительно хорошо удаляются при фиксации препарата после замораживания, а также при получении изолированных ядер в сахарозной среде. По нашим данным, главная причина здесь заключается в том, что белковые компоненты блокируют ДНК, участвуя в молекулярной организации компактного хроматина [c.143]

Георгиев Г. П., Ченцов Ю. С. О структуре клеточного ядра (экспериментальное электронно-микроскопическое исследование изолированных ядер) // Докл, АН СССР, 1960, Т, 132, С, 199—202, [c.241]

Дифференциальное центрифугирование применяют для изучения химического состава ядер, митохондрий и дру-, гих структур. В этом случае объект измельчают с использованием сахарозы в специальном приборе — гомогенизаторе. Полученный гомогенат путем дробного центрифугирования разделяют по плотности на фракции, состоящие из определенных, но изолированных клеточных структур. При сравнительно небольших ускорениях на центрифуге из гомогената осаждают клеточные ядра. При значительно больших ускорениях центрифугированием надосадочной жидкости выделяют митохондрии, а затем рибосомы и другие структуры. [c.55]

После воздействия на клетки эпоксидной композиции через сутки с момента ее приготовления в препаратах отмечали клеточные элементы различной величины и формы (вытянутой, полигональной). Клетки располагались преимущественно изолированно друг от друга. Ядра клеток были сигарообразной и овальной формы с несколькими ядрышками, цитоплазма вакуолизирована. [c.125]

Соматическая гибридизация — процесс вовлечения в генетическую рекомбинацию хромосомы и гены ядра и органелл вне сексуального цикла, например, путем слияния изолированных протопластов. Приводит к появлению гибридных клеточных линий и соматических гибридов растений. [c.467]

Протопласты являются весьма лабильными образованиями и могут служить объектами для введения в клетку чужеродных материалов не только путем соматической гибридизации за счет слияния протопластов, но и посредством переноса в них изолированных ДНК или органелл других клеток. Удалось трансплантировать ядра, хлоропласты, что позволяет рассматривать данный прием в качестве достаточно перспективного для целей клеточной инженерии. Таким образом, в настоящее время уже существуют методы, позволяющие осуществлять [c.102]

Всякий биохимик должен быть не только химиком, но и биологом, по крайней мере настолько, чтобы иметь представление о разделах биологии, касающихся изучаемых им живых организмов. Например, исследование биохимических законов генетики и наследственности требует хорошего знакомства со строением клеточного ядра и цитоплазмы, протоплазмы клетки и хромосомного состава генов клеточного ядра. В некоторых случаях биохимику интересно исследовать протекание реакций непосредственно в организме (in vivo или in situ), а в других — выделить их из живого окружения и проследить за ними в изолированной системе (in vitro). Вследствие большой сложности даже наиболее распространенных биохимических процессов, как, скажем, метаболизм углеводов, ученым приходится проявлять большую изобретательность при разработке методов изолирования биохимических процессов и их изучения. Поэтому мы начнем с краткого обзора методов, применяемых в биохимии, а затем ознакомимся с основными областями исследований этой многогранной науки. [c.477]

При внутривенном введении амфотерицина В обнаружены также (Оксман, 1976 Асиновская и др., 1978) качественные изменения в составе белков плазматических мембран почек собак значительные структурные перестройки в хроматине и существенная протеолитическая деградация его кислоторастворимых белков, которые в силу крайне низкого биосинтеза служат показателем уровня протеазной активности в клетке. Аналогичные изменения хроматина обнаружены и в изолированных клеточных ядрах, что автор связывает с возможностью непосредственного воздействия амфотерицина на ядра. [c.189]

Большой интерес представляет т и м о н у к л е и н о в а я кисло-т а, входящая в состав нуклеопротеидов клеточных ядер. Эта кислота может быть легко выделена, например, из зобной железы (тимус) или из изолированных ядер клеток. В состав тимонуклеиновой кислоты в качестве углевода входит дезоксирибоза. Соединения, подобные тимонуклеиновой кислоте, поэтому называют обычно дезоксирибонуклеиновыми кислотами (ДНК). Из пиримидиновых оснований в ДНК входит в значительном количестве тимни. ДНК обнаружена в клеточных ядрах различных тканей. [c.59]

Контрактильный белок обнаружен также в изолированных клеточных ядрах (И. Б. Збарский и сотр.), митохондриях, оболочках эритроцитов [c.456]

ЧТО быстрее всего идет нарастание радиоактивной метки (речь идет об опытах с амебой, не11росноро11, а также с высшими организмами), вводимой в среду в форме неорганического фосфата, аденина, цитозина, оротовой кислоты или других предшественников нуклеиновых кислот, в РНК ядер. Разница в скорости образования меченой РНК в ядрах и цитоплазме больше чем на порядок. Ясно, что переход РНК из цитоплазмы в ядра маловероятен. Скорее следует ожидать обратного процесса. Мирским, Алфреем и другими наблюдалось включение меченых предшественников в РНК в изолированных ядрах клеток нечени и других органов. Здесь действие ДНК-азы подавляет процесс синтеза РНК, а действие РНК-азы, хотя и уменьшает количество РНК в ядре, но не нарушает ее синтеза. Сопоставление опытов на целом организме и опытов на изолированных ядрах приводит к несомненному выводу о синтезе РНК, и притом наиболее быстром, в клеточных ядрах без участия цитоплазмы. [c.445]

Гербицид вызывает фрагментацию и при непосредственном воздействии на нативный препарат хроматина. Значительно слабее иа структуру хроматина действует гиббереллин и очень слабо — кинетин. При этом ни один из этих физиологически активных веществ в опытах с изолированным нативным хроматином не дает эффекта уплотнения или усиления его метилофилии. Надо полагать, что уплотнение хроматина в клеточном ядре под влиянием высоких доз физиологически активных веществ представляет собой сложный физиологический и биохимический процесс. Он сопровождается исчезновением лабильной ДНК и изменением состава белкового комплекса за счет уменьшения количества негистоновых и прироста гистоновых белков. [c.17]

Рис. 8-4. Гипотезы эволюционного происхождения митохондрий, хлоропластов, ЭР и клеточного ядра, объясняющие топологические взаимоотношения этих внутриклеточных компартментов в эукариотических клетках. А. Митохондрии и хлоропласты могли возникнуть при поглощении бактерий эукариотической клеткой. С помошью этой гипотезы можно объяснить, почему полость перечисленных выше органелл остается изолированной от обширного везикулярного транспорта, связывающего полости многих других внутриклеточных компартментов. Б.

Рис. 7. Клетки и клеточные ядра, выделенные из мозга крысы [13]. Л и Б, Нейроны в окружении глии, выделенные с помощью микрс-манипулятора по методу Хидена. В. Нейроны, изолированные в са харозном градиенте по методу Сатаке и Абе.

Одиако до сих пор ии одна из попыток точно идентифицировать рецептор фитогормоиа не увенчалась успехом. В большинстве случаев исследователи пытаются выделить белковые рецепторы, используя при этом различные подходы. Чаще, всего применяют меченные изотопами фитогормоны с высокой удельной активностью. Один из методов заключается во введении радиоактивного гормона в растительные ткаии с их последующей гомогенизацией и фракционированием путем цеитрнфугироваиия или гель-фильтрации в надежде обнаружить радиоактивность только в определенной клеточной фракции. При использоваиии другого подхода радиоактивный гормон вносят в различные выделенные клеточные фракции, такие, как ядра, изолированный хроматин, фракции мембран, и измеряют сродсГво этих фракций к фитогормону по степени его связывания с ними. Кроме того, были сделаны попытки определить локализацию. меченых гормонов в клетках радиоавтографическими методами. Не вполне понятно, почему до сих пор не удалось выделить белковый рецептор ии для одного из фитогормонов. Следует сказать, что имеется ряд данных, предполагающих существование белковых рецепторов для цитокининов и гиббереллинов в растительных клетках, но наличие таких рецепторов еще не было подтверждено. [c.130]

По-видимому, существуют различия между мхами и высшими растениями в поглощении свинца и в его распределении в тканях. У различных мхов были найдены электроноплотные отложения свинца в ядрах, пластидах, вакуолях, митохондриях и плазмодесмах. В отличие от этого у рдеста (Potamogeton) свинец изолирован в виде электроноплотного осадка в клеточной стенке и лишь в незначительном количестве поглощается путем пиноцитоза. Видимо, таким же образом живые деревья депонируют свинец в коре вне клеток в форме электроноплотного материала. Эти различия могли бы быть одной из причин чувствительности низших растений к загрязнению воздуха. [c.72]

По-видимому, основная масса синтезированных в ядрышке белков иснользуется для образования рибосом. Наличие в ядрышке рибосом впервые было показано с помощью электронной микроскопии на электронных микрофотографиях в ядрышке обнаруживалось большое количе-ство частиц, по своим размерам сходных с рибосомами цитоплазмы. Было найдено, что[в экстрактах целых клеточных ядер содержатся частицы, состав и коэффициент седиментации которых сходны с соответствующими параметрами рибосом, описанных Тео и Сато [54]. Бёрнстил иего коллеги выделили эти частицы из изолированных ядрышек и показали, что они обладают основными свойствами рибосом, т. е. имеют коэффициент седиментации 80S, распадаются на субъединицы] при удалении ионов магния, а аминокислотный состав их белка сходен с аминокислотным составом белка цитоплазматических рибосом. Факт синтеза рибосомного белка в ядрышке был подтвержден опытами, в которых изолированные ядра инкубировали в течение короткого времени с меченой аминокислотой. Затем из таких ядер выделяли ядрышки, а из них выделяли белок, обладавший самой высокой скоростью включения аминокислот. [c.40]

После действия семисуточных образцов фосфат-цемен-та увеличивалось число фибробластов, которые располагались преимущественно изолированно, не соединяясь друг с другом. Клетки были неправильной формы, с овальным ядром, в котором четко определялись ядрышки и мелкая зернистость. В остальном клеточная культура имела очень сходную картину с культурой после действия двухсуточных образцов фосфат-цемента. [c.123]

Гибридизация соматических клеток. Следующий метод клеточной селекции — создание неполовых гибридов путем слияния изолированных протопластов, полученных из соматических клеток. Этот метод позволяет скрещивать филогенетически отдаленные виды растений, которые невозможно скрестить обычным половым путем, вызывать слияние трех и более родительских клеток, получать асимметричные гибриды, несущие весь генный набор одного из родителей наряду с несколькими хромосомами или генами, или только органеллами и цитоплазмой другого. Гибридизация соматических клеток дает возможность не только соеди-нить в одном ядре гены далеких видов растений, но и сочетать в гибридной клетке цитоплазматические гены партнеров. [c.154]

Tolbert [о] считает мнение докладчика о том, что дозы, применявшиеся для облучения сухих систем, не позволяют коррелировать данные этих опытов с эффектами облучения в живых системах, весьма спорным. Мы не знаем, что больше сродни радиационным эффектам в живых системах (включающих ядра, митохондрии и клеточные оболочки) —действие на слабые водные растворы иши на твердые соединения. Однако мы знаем, что эти клеточные образования имеют упорядоченную и кристаллоподобную структуру, и поэтому Tolbert подошел к решению проблемы, облучая изолированные биохимические соединения. Он нашел, что, для того чтобы разорвать химические связи в сухом состоянии, требуется энергия примерно в 5—10 эв, причем это приводит к исчезновению амииокислот или аминокислотных остатков ив пептида и некоторых других структур подобного типа. Сравнимые количества энергии оказывают такой же эффект и в водных растворах. Таким образом, весьма большие дозы, применяемые химиком, исследующим радиационные эффекты на вещества в твердом состоянии, отражают не необычайно высокую радиорезистентность этих веществ, а скорее факт, что радиационная энергия поглощается очень малыми количествами материала. Именно поэтому должны использоваться дозы порядка мегарад. [c.507]

Во второй серии опытов с ( С-метил)-метионином (или, лучше, с радиоактивным З-аденозилметионином) инкубировали не целые клетки, а только изолированные ядра, в которых, как известно, синтез ДНК не происходит из-за отсутствия пула нуклеозидтрифосфатов [48. В этих условиях путь синтеза ДНК был хирургически исключен [47]. В изолированных ядрах метилирование ДНК, прослеженное по включению метки в 5-метилцитозин, оставалось в фазе 5 таким же, как и в первой серии опытов, а радиоактивность аденина, гуанина и тими-на, которая указывала бы на синтез ДНК, полностью отсутствовала (рис. 14). Таким образом, метилирование ДНК в фазе 5 клеточного цикла всегда происходило и в отсутствие синтеза ДНК. [c.36]

Разработка методов индуцированного слияния протопластов, а также развитие техники культивировании растительных клеток in vitro, обеспечивающей возможность получения изолированных протопластов, их выращивания с образованием каллуса и в последующем целого растения, обеспечила формирование нового весьма перспективного метода гибридизации растений, получившего название соматической гибридизации. Сущность данного приема состоит в том, что в качестве гибридизуемых клеток используют не гаметы (репродукционные клетки), а клетки тела растений (соматические), из которых получаются протопласты. Слияние протопластов обеспечивает объединение не только клеточных геномов, но и двух различных цитоплазм. В большинстве описанных (известных) случаев слияние протопластов высших растений приводит к образованию либо гибрида, либо цибрида. Цибридное растение содержит цитоплазму обоих партнеров, а ядро - одного. [c.102]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология