Биосинтез меченых препаратов

Возможную роль аминокислот в качестве предшественников, в биосинтезе пуринового ядра изучали уже давно. В опытах с применением меченых соединений было найдено, что гистидин и аргинин, несмотря на их структурное сходство с пуринами, не являются непосредственными источниками азота для синтеза пуринов [669, 670]. Вместе с тем было показано, что срезы печени голубя синтезируют гипоксантин и что добавление глутамина или щавелевоуксусной кислоты к таким тканевым препаратам повышает количество синтезируемого гипоксантина [671—673]. [c.283]

С использованием классических и новейших методов колоночной хроматографии, которая вообще незаменима при выделении и исследовании антибиотиков, решается широкий круг задач. К ним относятся а) выделение и очистка антибиотиков в лабораторных и промышленных масштабах, б) разделение смесей антибиотиков, в) структурные исследования, г) исследование механизма биосинтеза и получение меченых антибиотиков, д) изучение химической модификации и биохимической трансформации антибиотиков, е) контроль чистоты препаратов. [c.203]

Тимидин легко включается в клетки, синтезирующие ДНК. поэтому включение меченого тимидина как специфического предшественника ДНК широко используется при изучении биосинтеза ДНК. Быстрое включение N -T или С -Т непосредственно в ДНК было продемонстрировано на крысах [87], зародышах цыплят [93], клетках костного мозга [94], растущих клетках из кончика корня лука [95] и в культуре тканей [96]. При радиоавтографических исследованиях процесса воспроизведения хромосом недавно начали применять тимидин, меченный тритием [39, 97—100], обладающий особыми преимуществами. Ни/ке мы остановимся еще на использовании меченого тимидина при изучении биосинтеза ДНК в бесклеточных препаратах из тканей млекопитающих [101—105]. [c.181]

Недостатком метода биосинтеза является образование в большинстве случаев равномерномеченых соединений, как это можно видеть на примере биосинтеза равномерномеченой -глюкозы 1,6—С . Систематическое изложение методов биосинтеза выходит за рамки настоящего сообщения. Поэтому ограничимся лишь указанием на то, что успешно разрешен биосинтез глюкозы 1,6— С с достаточно высоким радиохимическим выходом. Получены меченные углеродом препараты инулин (фруктоза на основе корней георгина) и крахмал. [c.139]

До недавнего времени источником всех данных по биосинтезу поликетидов было применение меченых соединений [97], содержащих (иногда) или С (большей частью). Конечно, параллельно развивались исследования в других областях применения радиоактивных изотопов в биохимии этой теме посвящено несколько монографий [100—103]. Оба изотопа являются источниками мягкого (3-излучения периоды их полураспада достаточно велики, что позволяет осуществить их транспортировку и исключает необходимость введения поправок на распад в ходе эксперимента ( Н обладает меньшим периодом полураспада срок годности меченых соединений ограничивает не их распад, а индуцированное радиацией химическое разложение препаратов). Современное оборудование позволяет определять оба изотопа легко, с высокой степенью точности (часто взвешивание образца менее точно, чем подсчет уровня радиоактивности) и чувствительности достаточно часто надежно определяются продукты реакции с активностью в несколько стотысячных долей от исходной. Один и тот же образец может быть использован для одновременного и независимого определения и С, что делает метод двойного маркирования особенно удобным. Менее точные методы определения радиоактивности используют при различных способах хроматографического разделения смесей. [c.470]

Наряду с развитием чисто химических методов синтеза меченых органических соединений большое значение имеют методы биосинтеза. Необходимо отметить, что только биосинтез дает возможность получать биологически активные, наиболее близкие к природным препараты. Из большого числа препаратов, получаемых биосинтезом, в первую очередь следует назвать группу углеводов и из них в особенности глюкозу 1,6-С . [c.200]

В работе [15] был предложен полуколичественный метод оценки препаратов. Кинетическое изучение процесса биосинтеза белка позволяет в этом случае лишь точно установить значение стационарной концентрации меченых белков в клетках и тем самым строго оценить степень подавления процесса биосинтеза. [c.542]

Наряду с синтезом, биосинтезом, изотопным обменом, методом непосредственного облучения и другими подобными методами, некоторые меченые препараты можно получить электрохимическим путем. Этот метод по сравнению с другими обладает преимуществом в части перспектив организации автоматического идистан-ционного управления процессом. [c.170]

Количественную бумажную хроматографию применяли для определения содержания отдельных компонентов в антибиотической смеси [1, 2, 5, 6, 49, 231, 284, 314, 342—344], при изучении биосинтеза антибиотиков (стр. 38), для количественных определений антибиотиков в кормовых и фармацевтических препаратах [97, 345], в почве [346, 347], при изучении динамики превращений антибиотиков в организме человека [348, 349], при определении удельной радиоактивности меченых препаратов [160, 188]. Описано интересное использование количественной хроматографии антибиотиков для определения небольших количеств хлоридов. Метод основан на способности некоторых штаммов Streptomy es aureofa iens полностью извлекать хлориды из среды, используя их для биосинтеза хлортетрациклина. По количеству хлортетрациклина судили об исходной концентрации хлоридов [350]. [c.36]

Введение изотопной метки [20] используется для изучения биосинтеза и биораспада природных соединений, изучения метаболизма фармацевтических препаратов и других химических соединений в растительных и животных организмах, а также для радиоиммунологического анализа [21] и анализа методом изотопного разведения. Кроме того, меченые изотопами соединения успешно используются для выяснения механизмов реакций [22]. С помощью воды, меченной изотопом 0 (Нз О), можно разрешить вопрос о месте разрыва сложнозфирной связи при [c.444]

При разработке таких схем получения меченых соединений главной задачей является возможно более полное превращение дефицитного и дорогостоящего исходного соединения в искомый продукт. Например, при проведении биосинтезов использовались ферменты с высокой степенью очистки, а также проводился подбор их наилучшего соотношения, чтобы скорость образования высокомеченых препаратов была максимальна. При проведении химических реакций для реализации той же задачи оптимизировались температура, время реакции и концентрации немеченых реагентов. [c.526]

Для индикации водорода раньше применяли только его стабильный изотоп — дейтерий. Благодаря сравнительной легкости получения и определения он быстро получил широкое применение и число выполненных с его помощью работ измеряется тысячами [96]. В последнее время все возрастающее распространение получает радиоактивный изотоп водорода — тритий с полупериодом 12,4 лет, который стал также широко доступным благодаря ядерным реакторам, в которых его получают в больших количествах. Работа с тритием, как уже указывалось, значительно затрудняется из-за исключительно мягкого его -излучения. Однако это осложнение может быть успешно преодолено при помощи специально разработанных измерительных методик, а особенно — применением сцинтилляциоиных счетчиков, работающих в воздухе при атмосферном давлении. Разработаны и подробно описаны методы получения многих органических и биохимических соединений, меченых дейтерием и тритием [33, 96]. Введение этих изотопов в связи С — Н органических радикалов иногда довольно затруднительно. В большинство других связей их можно вводить путем простых реакций изотопного обмена с дейтерийной или тритиевой водой. Для получения более сложных биохимических препаратов также широко пользуются биосинтезами в средах, содержащих эти изотопы. Биосинтез служит также распространенным способом получения многих органических веществ, меченых углеродом, азотом, серой и др. [c.198]

То, что это действительно так, т. е. что аминоацил-тРНК являются единственным источником аминокислотных остатков при биосинтезе белка, доказано в опытах с аминоацил-тРНК, содержащими С-аминокислоты по мере инкубации в белоксинтезирующей системе содержание меченой аминокислоты в препарате аминоацил-тРНК падает, но в такой же пропорции зеркально возрастает в синтезируемом белке (рис. 94). [c.284]