Методы количественного определения антибиотиков

Из биологических методов количественного определения антибиотиков наибольшее распространение получил метод диф- фузии в агар с турбидиметрическим определением, основанным на измерении концентрации клеток тест-микроба, образующих определенную оптическую плотность среды (мутность) в. результате их роста в присутствии небольшого количества антибиотиков. [c.414]

Методы количественного определения антибиотиков [c.166]

Методы количественно го определеиия. Для определения активности препаратов пенициллина так же, как и других антибиотиков, применяют биологические, химические и физико-химические методы. [c.419]

ПОЛЯРИМЕТРИЯ — метод физикохимического исследования, основанный на измерении вращения плоскости поляризации света оптически активными веществами. Чаще всего такими веществами являются органические соединения с асимметрическим атомом углерода. Измерения производят с помощью поляриметров — оптических приборов, в которых луч света последовательно проходит через систему двух поляризующих призм. Благодаря пропорциональности, существующей между углом вращения и концентрацией оптически активного вешества, поляриметрические измерения используют для количественного определения оптически активного вещества. П. является основным методом контроля в сахарной промышленности по величине угла вращения определяют содержание сахара в растворе. Методы П. используются также для анализа эфирных масел, алкалоидов, антибиотиков и др. Большое значение имеет поляриметрический метод исследования в органической химии, где на основании определения знака и величины вращения плоскости поляризации можно судить о химическом строении и пространственной конфигурации соединения, делать выводы о механизме реакций и др. Для этого в последнее время особенно успешно используется спектрополяри-метрия. [c.201]

В этом разделе будут рассмотрены следующие способы обнаружения антибиотиков а) по люминесценции в УФ-свете, б) по поглощению УФ-света и в) по радиоактивности меченых антибиотиков. Все эти методы имеют то преимущество перед биологическими и химическими, что их использование, как правило, не связано с разрушением хроматографируемых веществ и сохраняет хроматограммы, которые можно употреблять для дальнейшей работы (количественных определений, проведения качественных реакций, препаративных целей и т. д.). [c.14]

Для количественного определения антибиотиков используются различные методы биологические, химические, физико-химические. [c.414]

Диффузионные методы. Количественное определение антибиотиков диффузионными методами основано на способности антибиотических веществ диффундировать в агаровых средах и образовывать зоны, в которых не развиваются используемые тест-организмы. Величина зоны диффузии антибиотика зависит прежде всего от химической природы антибиотического вещества и его концентрации, состава агаровой среды, ее pH, температуры и других факторов, которые необходимо учитывать при анализах. [c.170]

Активность образца антибиотика выражают как отношение дозы, которая угнетает рост соответствующего чувствительного микроорганизма, к дозе Международного биологического стандарта. Международного биологического эталонного препарата или Международного химического стандартного образца этого антибиотика, которая дает такую же степень угнетения. В количественном определении можно также использовать вторичные стандартные образцы, активность которых удостоверена соответствующим методом. Количест-ьенное определение основано на сравнении угнетения роста микроорганизмов, вызванного известными концентрациями стандартного образца, с угнетением, вызванным определенными разведениями испытуемого вещества. Этот эффект может быть измерен при помощи метода диффузии, ак описано ниже, или турбидиметрическим методом. [c.165]

Существенные экспериментальные трудности, которые до последнего времени ограничивали исследования в области белковой химии, в значительной степени обусловливались отсутствием простых и надежных способов анализа аминокислот. Лишь благодаря развитию за последние два десятилетия ионообменной и распределительной хроматографии удалось разработать автоматический метод количественного анализа аминокислот с использованием окисления аминокислот нингидрином и фотометрирования продуктов реакции [9]. Однако стремительное развитие химии белков и пептидов, среди которых обнаружены важнейшие биорегуляторы и антибиотики, уже сейчас предъявляет новые требования по чувствительности и быстроте анализа. Сложность аппаратурного оформления и дороговизна эксплуатации, безусловно, ограничивают применение автоматического анализатора Мура и Штейна и в значительной степени обусловливают интерес к разработке новых методов аналитического определения аминокислот, свободных от указанных недостатков. [c.252]

Дайте характеристику основных биологических, химических, физико-химических и иммунохимических методов количественного определения антибиотиков. [c.182]

В последние годы широкое распространение для количественного определения антибиотиков получили химические и физико-химические методы, из которых наибольшее применение имеют фотоколориметрический и спектрофотометрический методы. Последние основаны на использовании определенных свойств антибиотиков цветные реакции, появление или исчезновение характерных полос в УФ- или ИК-областях спектра под воздействием различных реагентов (кислот, щелочей и др.). [c.414]

Методы статистической оценки микробиологических количественных определений антибиотиков также описаны во многих национальных и региональных фармакопеях. [c.170]

В перечисленных ниже публикациях описаны подходящие методы, которые можно использовать для статистичской оценки микробиологических количественных определений антибиотиков. [c.170]

Применение метода хроматографии на бумаге для количественных определений антибиотиков имеет то преимущество, что позволяет проводить оценку содержания отдельных компонентов сложной смеси близких веществ. [c.36]

Количественное определение антибиотиков в культуральных жидкостях, готовых препаратах или в разнообразных растворах осуществляют различными методами биологическими, химическими, [c.166]

Было установлено, что при непродолжительном кипячении стрептомицина и маннозидострептомицина с водными растворами щелочей образуется мальтол [199—201]. Ввиду того, что в определенных условиях выход мальтола постоянен [199], а мальтол дает характерное окрашивание с солями трехвалентного железа, эта реакция нашла широкое применение для количественного определения антибиотиков группы стрептомицина колориметрическим методом [199—202]. При деструкции стрептомицина щелочами в мальтол превращается только стрептозная часть молекулы [2С0, 201]. Хотя механизм этого интересного превращения еше окончательно не выяснен, Шемякин, Хохлов и Колосов [203] предложили следующую схему образования мальтола из стрепто- [c.101]

Количественное определение. Для количественной оценки действия нтибиотика пользуются методом диффузии в агар (рис. 10.7), методом последовательных разведений и некоторыми другими методами. Для проведения теста с диффузией чашки заполняют до определенной высоты агаризованной средой, содержащей суспензию тест-организма. Затем в чашки вносят испытуемые растворы антибиотика. Их помещают в лунки, либо в стеклянный или металлический цилиндр, или же накладывают на агар пропитанные антибиотиком диски из фильтровальной бумаги. При положительной реакции во всех случаях после инкубации становится заметной зона подавления роста тест-организма. Диаметр этой зоны при соблюдении постоянных условий опыта (состав питательной среды, толщина слоя агара, плотность посева, время инкубации, температура и т.д.) пропорционален логарифму концентрации антибиотика (рис. 10.7). [c.339]

В настоящее время этот метод используется для разделения, идентификации и количественного определения таких сложных веществ, как смеси углеводородов, ароматических карбоновых кислот, стероидов, гербицидов, пестицидов, антибиотиков, различных красителей и их полупродуктов, алкалоидов, различных компонентов нуклеиновых кислот. [c.69]

В частности, сочетание такого высокоразрешающего метода, как хроматография на бумаге, с очень чувствительным и избирательным биоавтографическим методом обнаружения позволяет изучать превращения антибиотиков как в химических реакциях, так и в биологических системах при биосинтезе, в организме животных, человека, растений, в почве и т. д. При помощи хроматографии можно провести количественное определение отдельных компонентов смеси антибиотиков без их препаративного разделения. [c.21]

Пиролитическая газовая хроматография является эффективным методом качественного и количественного анализа антибиотиков [246-248]. Изучено около 20 различных антибиотиков [248]. Поскольку антибиотики представляют собой довольно лабильные соединения, то при анализе применили низкотемпературный пиролиз при 375 °С, при этом получены пирограммы, пригодные как для идентификации, так и для количественного анализа. Продукты пиролиза разделяли на колонке 3 м X 3 мм с 5% РРАР на диапорте или на колонке с 2% в изотермическом режиме при 75 °С или нри программировании температуры от 50 до 200 °С (или 230 °С) со скоростью 7,9°С/мин. Близкие по структуре анхибиотики, которые не удавалось ранее идентифицировать традиционными методами бумажной, тонкослойной хроматографии и ИК-спектроскопии, были идентифицированы по пирограммам. Низкотемпературный пиролиз позволил идентифицировать алкилзамещенные производные линкомицина с различным расположением заместителей в молекуле. Некоторые продукты пиролиза идентифицированы с помощью масс-спектрометра, что позволило определить структуру заместителей. На основе обнаруженных характеристических продуктов пиролиза возможно количественное определение антибиотиков. [c.227]

Бумажная хроматография относительно мало применяется в исследованиях циркуляции антибиотиков в организме человека и животных. При таких исследованиях, как правило, ограничиваются только количественными определениями, которые, по существу, показывают лишь суммарную биологическую активность всех имеющихся продуктов. Но антибиотики в организме подвергаются превращениям, образовавшиеся при этом продукты могут отличаться от исходных препаратов по антимикробной активности, токсичности, аллергенным свойствам и т, д. Поэтому использование только количественных методов (без выяснения качественной стороны процессов) не всегда позволяет выявить картину циркуляции антибиотиков. Между тем, знание конкретных путей превращения лекарственных веществ в организме со- [c.47]

Наиболее щирокое распространение среди биологических методов количественного определения антибиотиков получили метод последовательных разведений, диффузионные и тур-бидиметрические. [c.167]

Количественную бумажную хроматографию применяли для определения содержания отдельных компонентов в антибиотической смеси [1, 2, 5, 6, 49, 231, 284, 314, 342—344], при изучении биосинтеза антибиотиков (стр. 38), для количественных определений антибиотиков в кормовых и фармацевтических препаратах [97, 345], в почве [346, 347], при изучении динамики превращений антибиотиков в организме человека [348, 349], при определении удельной радиоактивности меченых препаратов [160, 188]. Описано интересное использование количественной хроматографии антибиотиков для определения небольших количеств хлоридов. Метод основан на способности некоторых штаммов Streptomy es aureofa iens полностью извлекать хлориды из среды, используя их для биосинтеза хлортетрациклина. По количеству хлортетрациклина судили об исходной концентрации хлоридов [350]. [c.36]

При изучении антрациклиновых антибиотиков хроматографию на бумаге применяли для решения различных задач изучения гомогенности, классификации препаратов, выделяемых из различных актиномицетов [324, 600, 804—806, 1000—1002], изучения биосинтеза [416], как препаративный метод [305, 306], для количественного определения отдельных компонентов смеси антрациклиновых антибиотиков [373]. [c.157]

Многие органические соединения, а также их комплексы с переходными элементами снижают перенапряжение водорода на ртутном электроде. В результате возникают каталитические водородные токи, величина которых в строго контролируемых условиях пропорциональна концентрации катализатора — вещества, снижающего перенапряжение водорода. Катализаторами могут быть многие азот- и серосодержащие органические соединения. Несмотря на все перечисленные сложности, полярография пригодна дпя количественного определения многих органических соединений в весьма сложных объектах. Есть и прямые методы определения электроактивных веществ (определяют следы С Н,К02 в анилине), и косвенные методы, основанные, например, на измерении степени подавления полярографических максимумов. Так можно оценивать молекулярные массы продуктов гидролиза крахмала ипи определять степень загрязнения различных вод природными и синтетическими ПАВ. Современные фармакопеи многих развитых стран рекомендуют полярографические методы определения лек хпвенных прещтов — алкалоидов, гормонов, антибиотиков, витаминов. [c.189]

Пропорциональность, существующая между вращением и концентрацией оптически активного вещества, позволяет использовать поляриметрич. измерения для количественного определения оптически активных веществ (естественно, что в этом случае концентрационная зависимость уд. вращения должна быть не слишком велика). В частности П. давно уже является основным методом контроля в сахарной пром-сти по величине угла вращения определяют содержание сахара в р-ре. Кроме того, поляриметрич. методы исиользуются для анализа эфирных масел, алкалоидов, антибиотиков и др. веществ. [c.129]

Количественную хроматографию на бумаге проводят двумя способами с разрезанием хроматограмм на части и на целых хроматограммах. В первом случае возможны два варианта всю хроматограмму разрезают на небольшие прямоугольники стандартного размера, которые затем отдельно помещают на агаровую пластинку, засеянную тест-микробом. Одновременно на эту же пластинку помещают контрольные куски хроматографической бумаги такого же размера, на которые нанесен стандартный антибиотик в известных количествах. Сравнивая размер зон подавления в опыте и контроле, можно определить содержание антибиотика в различных участках хроматограммы. Такой метод применяли для пенициллинов [6], стрептомицииов [351], ан-тимицинов [314, 352], геликсинов и эндомицинов [284], т. е. тогда, когда, кроме биоавтографического метода, не было других способов выявления веществ на хроматограммах. Если расположение изучаемого вещества можно определить заранее, то при количественных определениях вырезают только зону расположения антибиотика, вещество затем элюируют подходящим растворителем. Для определения содержания антибиотика чаще всего используют спектрофотометрический метод. Таким образом проводили определение тетрациклинов антибиотики и продукты их деградации выявляли по свечению в УФ-свете, для элюирования использовали фосфатный буфер с pH 4,5 или растворы соляной и серной кислот количественные определения проводили микробиологическими или спектрофотометрическими методами [97, 99, 101, 258, 350—355]. Метимицин и близкие антибиотики обнаруживали на хроматограммах в виде коричневых пятен по- [c.36]

Смотреть страницы где упоминается термин Методы количественного определения антибиотиков: [c.213] [c.213] [c.498] [c.201] [c.341] [c.149] [c.153] [c.185] [c.253] [c.555] [c.422] [c.319] [c.6] [c.34] [c.357] [c.283] [c.37] [c.38] [c.51] [c.136] [c.168] [c.174]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология