Инсулин изоэлектрическая точка

Одним из затруднений является нерастворимость некоторых производных белка. Это приводит к необходимости титрования в гетерогенной среде, что дает неясные результаты. О влиянии формальдегида на те участки кривых титрования белков, которые расположены в щелочной области, было уже упомянуто выше вопрос этот рассмотрен также в статье IV т. II. При дезаминировании белков <=.-аминогруппа лизина превращается в алифатическую гидроксильную группу, которая не реагирует с кислотами и основаниями. При дезаминировании желатины конечная кривая титрования обнаруживает почти полную потерю групп, титрующихся в интервале рН 8,5—12, и смещение изоэлектрической точки в кислую сторону однако та часть кривой, которая соответствует карбоксильным группам, повидимому, не изменяется [155, 156]. Эти результаты давно уже привели к выводам, имеющим важное значение для интерпретации кривых титрования белков [157]. Поведение карбоксильных групп также можно было бы изучить, блокируя их путем обработки кислым раствором метилового спирта, что обеспечивает полную и специфическую этерификацию. Указанный метод был применен к инсулину, однако неизмененный гормон, к сожалению, осаждается как раз в области рК карбоксильных групп. Тем не менее Моммертс и Нейрат [84] нашли, что подавление буферного действия до нуля, указывающее на полное отсутствие титруемых карбоксильных групп, достигалось только в том случае, когда содержание метоксильных групп соответствовало исходному количеству карбоксильных групп. Таким образом, кривые титрования измененных белков можно использовать для оценки природы и числа ионизирующихся групп в исходном белке или для расчета количества введенного группоспецифического реагента. [c.346]

Рибонуклеаза (РНК-аза). Рибонуклеаза из поджелудочной железы быка (молекулярный вес 13 683) была вторым белком после инсулина (содержащего 51 аминокислоту), в котором удалось полностью установить последовательность расположения аминокислот. Молекула этого белка представляет собой поли-пептидную цепочку, состоящую из 124 аминокислотных остатков, в том числе восьми остатков цистеина. Последние соединены попарно четырьмя дисульфидными мостиками, которые заметно ограничивают набор возможных конформаций молекулы. Рибонуклеаза представляет собой фермент, катализирующий гидролитическое расщепление рибонуклеиновой кислоты. Из-за преобладания основных аминокислот его изоэлектрическая точка довольно высока — около pH 9,7. [c.118]

Выше было уже упомянуто об образовании слабо растворимых солей (например, хлоридов и сульфатов) белковых катионов з кислой по отношению к изоэлектрической точке области [195, 202] и об использовании этого явления, например, для выделёнйя кристаллического сульфата альбумина плазмы [106]. Было получено также несколько кристаллических солей лизоцима [204]. Белковые соли, содержащие тяжелые комплексные анионы, например воль-фрамат-, фосфовольфрамат-, трихлорацетат- или метафосфатионы, а также соли, содержащие катионы тяжелых металлов — цинка, меди или ртути, — известны уже давно и применялись для освобождения раствора от белков перед некоторыми анализами [10, 78]. Предполагалось, что эти реагенты при их применений действуют на белки сильно денатурирующим образом. Вслед з-а кристаллизацией цинковой соли инсулина [205, 206] и метафос-фата яичного альбумина [207] недавно последовало приготовление серии кристаллических производных инсулина [208] и сывороточных альбуминов человека [209, 210]. Последние были получены в присутствии ионов, концентрация которых была недостаточна для высаливания (если не добавлять в количестве 5—30% органического растворителя и во избежание денатурации не вести процесс при низких температурах). В этих условиях многие из указанных солей менее растворимы, чем свободный белок или соли с такими катионами, как натрий или калий, и, следовательно, могут найти применение при выделении белков [51] (4). Были получены также кристаллические додецилсульфатпроизводные Р-лактоглобулина [211]. [c.51]

ГЛЮКОЗЫ в крови и появлением в моче сахара и ацетоновых тел, являющихся продуктами неполного окисления углеводов (ацетоуксусная и р-оксимасляная кислоты, ацетон). Бантинг и Мак-Леод предложили в 1921 г. метод выделения из поджелудочной железы быка концентрированного активного экстракта, пригодного для лечения диабета. При выделении были использованы специальные приемы для защиты гормона от расщепления ферментом, присутствующим в железе. В 1926 г. Абель выделил кристаллический инсулин методом осаждения в изоэлектрической точке и показал, что в нем содержится 0,52% цинка. [c.698]

Ч, стр. 480 8, стр, 404), растекание которых наблюдалось и на более щелочных растворах, причём максимум на щелочных растворах имел место при ря>12. Цеин (j) и пепсин (v) дают одинаковые максимумы на кислых растворах и в изоэлектрической точке. Некоторые протеины (например, оксигемоглобин и инсулин) имеют максимум на кислых растворах и подъём в изоэлектрической точке, но не до максимума. Желатин, глиадин и пептон не растекаются из водных растворов (y), причём плёнок желатина не удаётс олучить также и другими методами, вероятно, благодаря его большой растворимости. Кератин не растекается с твёрдой поверхности, очевидно, благодаря его большой внутренней когезии, которая обусювливает его нерастворимость. Склеропротеины, к счастью, также не растворяются и не дают плёнок, иначе волосы, копыта и т. п. быстро исчезали бы при частом смачивании. [c.124]

Последовательность аминокислот в пептидных цепях белков, например инсулина, производит впечатление случайного и лишенного систематичности набора однако она может оказывать влияние на свойства белков несколькими способами. Прежде всего электрические свойства белков и их изоэлектрические точки определяются числом и расположением кислых и основных аминокислот . Пространственное влияние замещающих групп определяет ста- [c.123]

Последовательность аминокислот в пептидных цепях белков, например инсулина, производит впечатление случайного и лишенного систематичности набора однако она может оказывать влияние на свойства белков несколькими способами. Так, кислотно-основные свойства белков и их изоэлектрические точки определяются числом и расположением кислых и основных аминокислот. Пространственное влияние замещающих групп определяет стабильность и точки изгиба пептидных спиралей. Последовательность аминокислот также может оказывать влияние на степень межмолекулярных взаимодействий и растворимость белков. Пептиды, состоящие из аминокислот одного типа, часто оказываются чрезвычайно мало растворимыми вследствие сильных внутримолекулярных взаимодействий. Если однородность цепи нарушается в результате включения в нее других аминокис- [c.388]

Интенсивность сорбции в динамических условиях можно характеризовать объемом элюции, т. е. объемом буферного раствора, необходимого для вытеснения белка из колонки до максимума его концентрации в элюате. Инсулин имеет изоэлектрическую точку р1 5,3. [c.217]

Несмотря на относительно низкую изоэлектрическую точку, инсулин сорбируется высокопроницаемыми сульфокатионитами гелевого (СДВ-Т) и макропористого типа (КУ-23) с относительно большой сорбционной емкостью, особенно при pH 4 (рис. 3.55). [c.145]

На рис. 210, например, приводятся данные по обмену для инсулина . В изоэлектрической точке его макромолекулы должны иметь по 85 атомов В в макромолекуле, из которых 48 атомов связаны с СОЫН-группами в двух полипептидных цепях, шесть атомов связаны с NHз-гpyппaми на концах цепей и остальные 31 атом с группами боковых цепей. Если белок до своей изоэлектрической точки имеет кислотный характер, то предполагаемое число обменивающихся атомов В увеличивается (до максимальной величины—91 атом при рН=2) вследствие более сильного связывания ионов Н или В" при низких значениях pH. Если белок до своей изоэлектрической точки имеет щелочной характер, то тео- [c.749]

Инсулин — гормон, выделенный из островков Лангеранса поджелудочной железы крупного рогатого скота, свиней и овец и понижающий содержание сахара в крови. Он представляет собой кристаллический полипептид с молекулярной массой около 6000. i мг инсулина имеет активность не менее 23 М, Е. За одну М. Е. (международную единицу) принимают активность 0,04082 мг кристаллического инсулина (стандарта). Содержание азота 13—15%, цинка 0,3—1%. Почти белый или слегка желтоватый мелкокристаллический порошок без запаха и вкуса, почти нерастворим в воде, спирте и эфире, растворим в 0,01 н. растворе едкого натра и 0,01 н. соляной кислоты. Изоэлектрическая точка 5,0—5,5. [c.462]

Молекулярный вес растворенного инсулина равен примерно 48 000 [27, 28], однако он варьирует в зависимости от концентрации раствора и его pH. При pH меньше 4 и больше 7,5 происходит диссоциация молекул инсулина на меньшие единицы [27], молекулярный вес которых равен приблизительно 12 000. Рент-геноструктурный анализ показал, что кристаллы инсулина состоят из трех подобных субъединиц следовательно, эквивалентный вес кристаллического инсулина равен 36 ООО. При электрофорезе инсулин ведет себя как однородное вещество [29]. Изоэлектрическая точка инсулина находится вблизи pH 5,3—5,8 [28]. [c.316]

Очищенный рецептор инсулина представляет собой белок с радиусом Стокса 72 А и молекулярным весом 300 ООО. При электрофорезе в присутствии додецил-сульфата натрия белок распадается на субъединицы, основная из-которых имеет молекулярный вес 135000. Изоэлектрическая точка рецептора равна 4,0. По-видимому, это,гликопротеид, так как он связывается с кон-кавалин Л-агарозой и затем специфически элюируется а-метилманнопиранозидом. [c.170]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология