Р а-б о т а 23. Осаждение белков при нагревании

Ход работы. Яичный белок смешать с пятикратным объемом воды и выпавший яичный глобулин отфильтровать. В полученном фильтрате определить наличие альбумина осаждением путем нагревания и применением алкалоидных реактивов, а затем для подтверждения альбуминового характера обнаруженного белка- определить границы высаливания. Для этого в девять пробирок налить (в каждую ) по 1 мл раствора белка. После этого долить различное количество воды так, как это указано в приведенной форме, а затем в первые восемь пробирок добавить возрастающий объем насыщенного раствора сернокислого аммония, а в девятую твердой соли (МН4)2304 до полного насыщения. [c.178]

Вызвать осаждение белков из растворов можно различными способами, например прибавлением солей (сернокислого аммония и др.). кислот, спирта, а также нагреванием, при котором происходит свертывание белка. В зависимости от того, чем вызвано осаждение, а также от характера самого белка, осадок белка может оказаться мало или, наоборот, сильно измененным. Осаждение солями в большинстве случаев приводит к наименьшим изменениям осадок, полученный при прибавлении солей, обычно можно опять растворить и раствор в большинстве случаев будет обладать прежними свойствами. Другие способы осаждения, например нагревание (кипячение), приводят к более глубоким изменениям свернувшийся при кипячении белок при обычных условиях уже более не растворяется. [c.312]

При реакциях осаждения белок выпадает в осадок или необратимо (свертывание) или обратимо (высаливание). Так, например, из водных растворов белки высаливаются солями легких металлов — сернокислым магнием, хлористым натрием, сернокислым аммонием здесь процесс обратим при разбавлении водой белок снова переходит в раствор. При действии же солей тяжелых металлов (железа, свинца, меди, ртути) белки осаждаются необратимо и достаточно полно. Также необратимо осаждают белки таннин, пикриновая кислота, фосфорномолибденовая и фосфорновольфрамовая кислоты, азотная кислота. Большинство белков свертывается при нагревании с водой (например, белок куриного яйца), а также при действии спирта. Температура свертывания для разных белков различна и характерна, что служит иногда их отличительным признаком. Свертываются белки и при действии ферментов так, например, белок молока [c.339]

При реакциях осаждения белок вьшадает в осадок или необратимо (свертывание), или обратимо высаливание). Так, нйпример, из водных растворов белки высаливаются солями легких металлов — сернокислым магнием, хлористым натрием, сернокислым аммонием здесь процесс обратим при разбавлении водой белок снова переходит в раствор. При действии же солей тяжелых металлов (железа, свинца, меди, ртути) белки осаждаются необратимо и достаточно полно. Также необратимо осаждают белки таннин, пикриновая кислота, фосфорномолибденовая и фосфорновольфрамовая кислоты, азотная кислота. Большинство белков свертывается при нагревании с водой (например, белок куриного яйца), а также при действии спирта. Температура свертывания для разных белков различна и характерна, что служит иногда их отличительным признаком. Свертываются белки и при действии ферментов так, например, белок молока — казеин — свертывается при прибавлении сычужного фермента (добываемого из телячьего желудка) кровь, выпущенная из сосудов, свертывается под влиянием фермеН тов, появляющихся Б самой крови, и т. п. [c.337]

Г0 белка, осадок белка может оказаться мало или, наоборот, сильно измененным. Осаждение солями в большинстве случаев приводит к наименьшим изменениям осадок, полученный при прибавлении солей, обычно можно опять растворить и раствор в большинстве случаев будет обладать прежними свойствами. Другие способы осаждения, как, например, нагревание (кипячение), приводят к более глубоким изменениям свернувшийся при кипячении белок при обычных условиях уже более не растворяется. [c.344]

Из всех физических свойств природного белка растворимость наиболее легко изменяется, причем эти изменения удобно наблюдать. Нагревание белка в водном растворе или в солевых растворах при изоэлектрической точке приводит к полному осаждению. Если же денатурация белка происходит в присутствии растворяющего агента, например в присутствии кислоты или основания, то денатурированный белок остается в растворе и осаждение происходит лишь после установления pH изоэлектрической точки. Денатурированные белки не могут быть [c.439]

Денатурация белка может быть вызвана также нагреванием его раствора до 70—100°. Белок, осажденный таким образом, отличается нерастворимостью в чистой воде и слабых растворах нейтральных солей. [c.19]

Интактную РНК можно отделить от белка путем добавления детергентов и последующего осаждения фракций, при котором бело экстрагируют с помощью фенола или применяя нагревание в присутствии соли. Белок, освобожденный от РНК, легко полимеризуется при низких pH, образуя стержни того же диаметра, что и у нормального вируса, но различной длины. [c.359]

Коагуляция (необратимое осаждение). Нагревание и сильные минеральные кислоты вызывают в белках физические изменения, сообщая им устойчивл ю нерастворимость. Это явление называется денатурацией белков. Абсолютный сппрт осаждает белки в неизмененном виде, но если осажденный белок находится 27 [c.419]

Следует остановится на исторически самых старых методах разделения и очистки белков, основанных на фракционном осаждении и соосаждении, т. е. на разнице в растворимости различных белков. В некоторых случаях, когда разница в растворимости белков может быть очень велика, методы осаждения весьма эффективны и сохраняют свое значение и сейчас. Такой случай представляется, например, когда мы выделяем термостабильный белок, не денатурируемый при нагревании из смеси других белков. Мы прибегаем к нагреву смеси и переводим все белки в малорастворимое денатурированное состояние. Подгоняя pH среды к изоэлектрической точке большинства белков, мы осаждаем все термолабильные белки, и в растворе остается лишь термостабильный белок. Так поступают при выделении рибонуклеазы, миокиназы и ряда других белков. Этот прием позволяет избавиться одним ударом от массы балласта и обогатить раствор нужным компонентом во много раз. [c.132]

Дифтерийный токсин очищают при помощи фракционированного осаждения сернокислым аммонием. Молекулярный вес очищенного токсина составляет 74 ООО, а отношение осей в его молекулах равно 4,7 1 [2]. Обработка формальдегидом приводит к потере токсичности, что указывает на существенное значение свободных аминогрупп токсина для его действия [3]. Дифтерийный токсин представляет собой глобулиноподобный белок, разрушающийся при нагревании и под действием протеолитических ферментов. Он легко соединяется с железом пор-фиринового кольца, и возможно, что именно он является белковым компонентом дыхательного фермента oryneba terium diphtheriae [1]. [c.355]

Белок большинства вирусов мона-ю выделить в денатурированном состоянии путем соответствующей кислотной обработки. Например, нагревание до 90 °С в 5—10%-ной трихлоруксусной кислоте в течение 10 мин обычно приводит к деградации РНК до низкомолекуляриого материала. Денатурированный белок может быть выделен путем осаждения этанолом. [c.74]

Обработка фенолом, применявшаяся для выделения вирусных РНК, вызывает денатурацию вирусного белка. В большинстве случаев эта денатурация, вероятно, необратима. Одиако Андерер [20, 21] нашел, что денатурированный белок ВТМ может быть выделен из фенольной фазы осаждением метанолом и ренатурирован нагреванием до 60 °С при pH 7,0—7,5. О рена-турации белка ВТМ свидетельствовали его растворимость в нейтральной водной среде, серологическая aiiTHBHO Tb, а также способность образовывать вирусоподобные палочки при реполимеризации, а при инкубации с РНК ВТМ — инфекционные вирусные частицы. [c.75]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология