Белки вирусные выделение

Для выделения вирусных белков можно было бы использовать в принципе те же методы, что и для выделения вирусов или других типичных белков, если бы не необходимость предварительной диссоциации, дезагрегации, а следовательно, и частичной денатурации вирусного белка для освобождения его от других, связанных с ним многочисленными связями белковых молекул и нуклеиновой кислоты. [c.49]

На ранних этапах изучения инфекционной РНК ВТМ важно было установить отсутствие в ней вирусного белка с большей точностью, чем это позволяет чувствительность описанных методов. При использовании стандартных методов выделения нуклеиновых кислот содержание белка в выделенном препарате редко бывает ниже 1 %, а в случае ВТМ это соответствует комплексу одной молекулы РНК ВТМ с одной субъединицей оболочечного белка. Однако если выделять РНК в присутствии бентонита, то загрязнение препарата белком значительно снижается. А в случае ВТМ содержание примеси можно снизить еш,е больше (до 1 белковой субъединицы на 20—50 молекул РНК), если использовать метод реконструкции вируса (см. ниже). Определение следовых количеств примесей всегда сопряжено с трудностями методического характера, а достоверность результатов, полученных с помощью различных тестов на минимальных концентрациях веществ, сомнительна. Для определения примеси белка в препаратах вирусных нуклеиновых кислот были поставлены опыты с радиоактивной меткой ( 8) белка. Все, что удалось извлечь из этих опытов, сводится к тому, что содержание остаточного белка, судя по количеству метки, соответствует 0,04% (при пересчете на содержание серы в белковой оболочке ВТМ). Действительно, то соотношение аминокислот, которые в следовых количествах были обнаружены в препаратах нуклеиновых кислот, не соответствует количественным соотношениям этих же аминокислот в белковой оболочке. Тот факт, что препараты, содержащие 0,04 и 1% белка, не различаются по своей инфекционности (на 1 мг РНК), убедительно доказывает, что инфекционность — свойство, присущее вирусной РНК [142, 455]. Положение это убедительно было доказано только для РНК ВТМ. Однако нет никаких оснований сомневаться в том, что вывод этот носит общий характер и что инфекционность всех вирусов заключена в их нуклеиновых кислотах. [c.179]

В частицах ряда вирусов роль ДНК играет РНК. Установлено, что РНК, выделенная из вируса табачной мозаики (ВТМ), обладает инфицирующим действием [3, 24, 25]. Это означает, что молекулы вирусной РНК, попадая в клетки, организуют синтез белков новых вирусных частиц. Вирусная РНК ВТМ с белкам последнего образует частицы, обладающие свойствами исходного вируса. Удалось получить также гибридные вирусы путем комбинирования РНК одного штамма с белком другого штамма. В белке потомства гибридного вируса содержались аминокислот- [c.487]

Нуклеопротеиды представляют огромный интерес и потому, что к этой группе белков принадлежат вирусные белки. Выделенный из растения (табака), пораженного мозаичной болезнью, специфический нуклеопротеид представляет собой белок, который может быть получен в кристаллическом состоянии, многократно перекристаллизован, очищен и т. д. По всем своим свойствам он является определенным химическим соединением. Однако при введении в организм растения этот белок начинает вести себя как [c.53]

Поскольку вирусы могут быть перекристаллизованы тем же путем, что и типичные белки, многие исследователи рассматривают вирусные частицы как отдельные молекулы и вес этих частиц, определенный при помощи ультрацентрифугирования или электронной микроскопии, называют молекулярным весом. Однако частицы выделенного вируса имеют не совсем одинаковые размеры, и найденный молекулярный вес является средней величиной. Впрочем, вряд ли вообще мы имеем право называть вирусные частицы молекулами [130]. [c.400]

Классический метод выделения вирусного белка предполагает использование контролируемого щелочного значения pH, что достигается путем диализа против буферных растворов с pH 10,.5 при О—4° [423, 424]. В случае выделения белка ВТМ —8Н-группы при таком значении pH остаются достаточно защищенными и не подвергаются самоокислению. Все вирусы, оставшиеся неразрушенными, отделяют с помощью высокоскоростного центрифугирования, а белок осаждают добавлением сульфата аммония до /з полного насыщения. К вопросу о влиянии щелочи на типичный изометрический вирус мы еще вернемся в следующей главе. [c.53]

Выделение вирусных белков сопряжено с разрывом множества связей, соединяющих белковые субъединицы друг с другом и с РНК, но, поскольку это связи того же типа, что и связи, обеспечивающие конформацию самих субъединиц, все вирусные белки в процессе выделения в той или иной степени денатурируют. Однако хорошо известно, что нативная конформация белков определяется их аминокислотной последовательностью, а денатурированные белки способны к самопроизвольному восстановлению своей нативной конформации, если для этого созданы подходящие условия [7]. Точно так же вновь синтезированные пептидные цепи автоматически сворачиваются в присущую им нативную конформацию (см. гл. IX, разд. Б). [c.216]

Нуклеопротеиды представ.ляют огромный интерес и потому, что к этой группе белков принадлежат вирусные белки, причисляемые некоторыми учеными к неклеточ-нон форме жизни. Так, выделенный из пораженного мозаичной болезнью табака специфический нуклеопротеид представляет собой вне организма белок, который может быть получен в кристаллическом состоянии, многократно перекристаллизован, очищен и т. д. По всем своим свойствам оп является определенным химическим соединением. Однако при введении в организм растения этот белок начинает вести себя, как настоящее живое патогенное начало количество его быстро нарастает, увеличиваясь в десятки и даже сотни раз. По-видимому, в основе этого размножения лежит извращенный синтез белка клетками зараженного организма, который приводит к появлению новых вирусных частиц. Растение при этом заболевает и, в конце концов, погибает. Основную роль в патогенности указанных вирусных белков, по-видимому, играют нуклеиновые кислоты. Френкель-Конрату удалось отделить нуклеиновую кислоту кристаллического вируса от белка, причем каждый компонент в отдельности был неактивен или малоактивен, однако если смешать нуклеиновую кислоту с белком, то такой искусственно изготовленный, реконструированный вирусный белок об.падает исходными патогенными свойствами. [c.54]

Белки вирусов, как и любые другие белки, обусловливают отрицательный заряд вирусных частиц. В связи с этим, некоторые ионообменники основного типа оказались способными адсорбировать и удалять вирусы из воды. В настоящее время уже апробированы ионообменные смолы в качестве адсорбентов для концентрирования вирусов при выделении их из зараженной воды [12, 34, 64]. Наиболее активными оказались Дауэкс-1, Амберлайт Ш-45, а также смолы АВ-17 и ЭДЭ-10П. Развитие исследований в этом направлении весьма перспективно при создании эффективных адсорбентов для концентрирования вирусов Б воде. [c.72]

Интерфероны — низкомолекулярные белки, обладающие выраженной противовирусной активностью. Кроме того, интерфероны проявляют фармакологический эффект при таких заболеваниях, как гепатит В, рассеянный склероз, некоторые локализации опухолей. Различают три класса интерферо-нов по месту их синтеза в клетках человека и животных а-интерферон из лейкоцитов, -интерферон из фибробластов и у-интерферон из тимуса. а-Интер-ферон является простым белком, - и у-белки — гликозилированы. Интерферон является одним из самых эффективных средств лечения вирусных инфекций, но он видоспецифичен и может быть получен только из клеток человека. Технология выделения и очистки интерферонов малоэффективна прежде всего из-за крайне малого выхода конечного продукта. Поэтому получение генно-инженерного продукта является перспективной альтернативой традиционным методам вьщеления интерферона. [c.503]

Результаты многочисленных исследований свидетельствуют о том что генетический код, установленный для Е. соИ, является универсальным. Так, например, в лабораториях Уитмана и Френкель-Конрата препарат РНК, экстрагированный из вируса табачной мозаики, обработали азотистой кислотой известно, что при этом происходит дезаминирование многих остатков цитозина с образованием урациловых остатков, в результате чего кодоны U U (серин) превращаются в UUU (фенилаланин). Аналогичным путем из кодона ССС (пролин) может образоваться СиС (лейцин). Оказалось, что при заражении растений табака препаратом РНК, обработанной азотистой кислотой, аминокислотная последовательность вирусного белка оболочки, выделенного из мутантных штаммов, действительно меняется [22]. Причем многие из происшедших изменений можно было точно предсказать исходя из данных, приведенных в табл. 15-3. Сходным образом, замены аминокислот в дефектных молекулах гемоглобина (рис. 4-17) в большинстве случаев могут быть обусловлены изменением только одного основания. Так, гемоглобин S может образовываться в результате одного из следующих изменений в седьмом кодоне GAA(Glu) GUA(Val) или GAG(Glu)- ->GUG(Val). Еще один аргумент в пользу универсальности генетического кода состоит в способности рибосом и молекул тРНК из Е.соН осуществлять трансляцию цепи мРНК, кодирующей синтез гемоглобина, и синтезировать при этом полноценный гемоглобин [23]. [c.195]

Чувствительность РНК к нуклеазам — явление обычное, а в случае вирусных РНК, соответствуюш,их по размерам РНК ВТМ, когда для инактивации РНК достаточно разрыва лишь одной связи на 6400 нуклеотидов, присутствие даже следовых количеств нуклеаз или фосфоди-эстераз может сыграть решающую роль в том, насколько успешными окажутся опыты с не защищенной белком вирусной РНК. Для устранения этой опасности были предложены различные методы. В результате предварительной обработки ВТМ комплексообразующими соединениями (например, в результате инкубации с цитратом или ЭДТА) происходит освобождение вируса главным образом от таких нуклеаз, которые обычно адсорбируются на его поверхности. Более широкое распространение получило применение в процессе выделения РНК ингибиторов нуклеаз. Бентонит, представляющий собой поли-кислотную глину, является, по-видимому, по крайней мере таким же эффективным ингибитором, как и другие ноликислотные минералы или полимеры, предложенные позже [142, 455]. Суспензию промытого и отмученного бентонита можно добавлять во время фенольной экстракции до 10—30% (относительно веса вируса). Мелкие частицы бентонита остаются суснендированными в водной фазе, однако от них можно избавиться с помощью высокоскоростного центрифугирования раствора РНК после частичного или полного удаления этилового спирта. [c.58]

Вирусы, как известно, построены из отдельных макромолекул, удерживаемых вместе в результате возникновения между ними ионных и гидрофобных взаимодействий и водородных связей с помощью различных агентов, ослабляющих эти взаимодействия или же разрывающих водородные связи, вирусы можно разложить на составляющие их элементы. Кроме того, в растительных, бактериальных и животных клетках, инфицированных многими просто устроенными вирусами, наблюдается образование не только полных вирусных частиц, но также и вирусоподобных образований, не содержащих нуклеиновой кислоты. Следовательно, форма этих частиц, будь они палочковидные или изометрические, определяется отнюдь не нуклеиновой кислотой, а характером специфической агрегации белковых молекул (см. гл. VIII, разд. Б). Поэтому есть все основания думать, что в определенных условиях вирусные белки могут агрегировать с образованием вирусоподобных частиц даже in vitro. Впервые эта особенность была обнаружена у белков ВТМ, выделенных из инфицированных клеток [495] и из вирусных частиц [423]. [c.215]

Для получения интерферона используются клеточные линии лейкоцитов, фибро-бластов, побуждаемые к синтезу и выделению интерферона вирусной инфекцией или такими индукторами, как поли(1 0. DEAE-декстран и GMP-аскорбиновая кислота. Так как в данном процессе выход нужного белка в высшей степени незначителен, особое внимание уделяется генной технологии. Однако в этом случае может образовываться лишь чисто белковый компонент интерфероид. [c.431]

Для идентификации вирусов применяют РТГадс, РТГА, РСК, ИФА (в РТТадс используют сыворотки с титрами не менее 1 160). Если выделенный вирус имеет измененную антигенную структуру, то РТГадс и РТГА с имеющимися специфическими сыворотками могут быть отрицательными. В таком случае используют РСК, выявляющую более стабильные в антигенном отношении типоспецифические вирусные белки. Для идентификации вируса в куриных эмбрионах и тканевых культурах широко применяется PH. [c.280]

Выделение вируса. При проведении вирусологических исследований следует учитывать, что для культивирования 5-19 обычные клеточные культуры не подходят. Он развивается в культурах клеток костного мозга человека, селезенки плода, пуповинной крови и культурах периферической крови, стимулированных эрит-ропоэтином. Выход вирусов при этом незначительный. Идентификацию вируса в культуре клеток проводят путем выявления специфических вирусных белков (преимущественно в ядре и периферической части цитоплазмы) в РИФ, а также путем выявления вирусной ДНК с помощью ПЦР или ДНК-гибридизации. При [c.309]

С развитием эффективных методов выделения и идентификации следовых количеств белков и их генов было установлено, что интерфероны-это гликопро-теины, состоящие приблизительно из 160 аминокислотных остатков. Каждый вид позвоночных может продуцировать в ходе вирусной инфекции по меньшей мере три разных типа интерферонов один синтезируется фибробластами соединительных тканей, другой-лейкоцитами, третий-Т-лимфоцитами разд. 6.11). Связываясь с мембраной здоровых клеток, интерфероны стимулируют образование специфических ферментов, которые способны разрушать вирусные мРНК и инактивировать фактор инициации белкового синтеза в рибосомах, препятствуя тем самым экспрессии вирусных генов в клетке-хозяине. [c.990]

Как правило, все ДНК и РНК животного и вирусного происхождения (за исключением, возможно, транспортных РНК) in vivo более или менее прочно связаны с белками. Особый интерес с этой точки зрения представляют гистоны — семейство чрезвычайно гетерогенных основных белков относительно низкого молекулярного веса, которые, по-видимому, образуют прочные стехиометрические комплексы с ДНК во всех соматических клетках любого высшего организма, растения или животного. Гистоны можно отделить от ДНК и подвергнуть хроматографическому разделению. При этом удается получить четыре основные фракции. Другие методы разделения позволили установить, что каждая из этих фракций, начиная от фракции I, наиболее богатой лизином, и кончая фракцией IV, наиболее богатой аргинином, в свою очередь может быть разделена на несколько фракций. С помощью рентгеноструктурного анализа были получены некоторые данные о вторичной структуре свободных гистонов, выделенных из нуклеопротеидов, а также о структуре белка и ДНК в составе нуклеопротеида. В свободных гистонах, судя [c.159]

Белки вирусов. — Вирус —субмикроскопическое инфекционное тело, которое проходит сквозь фильтр (Беркфельд), задерживающий любую известную живую клетку. Вирусы способны к аутокаталитическому росту и размножению в живых тканях и рассматривались в свое время как наименьщие известные живые организмы. Один из вирусов, вирус табачной мозаики, присутствующий в отфильтрованном соке растений, зараженных табачной мозаикой, был выделен Стенли в кристаллической форме (1935). Установлено, что он является нуклеопротеидом. Его молекулярный вес необычно высок (40 миллионов), содержание нуклеиновой кислоты 6% по весу. Кристаллический нуклеопротеид весьма инфекционный, его вирусная активность почти параллельна зависимости стабильности от pH. Вещество способно к самовоспроизведению в табачных листьях из растений, зараженных 1 мкг вируса, выделено 2—3 г вируса. После работ Стенли было найдено значительное число растительных вирусов и показано, что все они являются нуклеопротеидами (огуречная мозаика, вирус кустистости томатов, картофельный х-вирус, вирус кольцевых пятен табака). [c.727]

При заражении растений табака вирусом табачной мозаики внутрь клеток проникает только РНК вируса, освобожденная от белковой оболочки. Вслед за этим в ядре клетки начинается синтез новой вирусной РНК. Под контролем этой вновь синтезированной РНК происходит синтез вирусного белка в цитоплазме. В результате соединения вновь синтезированной РНК с белком образуется новая полная вирусная частица. В нормальных условиях из 10 вирусных частиц только одна способна вызывать инфекцию, но из этой одной частицы за сутки образуется примерно 10 новых. Синтез ВТМ, обладающих инфекционной способностью, был осуществлен в выделенных из растений бес-клеточных системах, в которые вводили рибонуклеозидтрифос-фаты всех четырех типов и М ++. [c.362]

Для очистки вирусов используют общие методы выделения белков. Методы отделения вирусов от клеточных белков основаны, во-первых, на том, что вирусы по своей природе представляют собой обособленные частицы, а во-вторых,— на более высокой плавучей плотности вирусных частиц, обусловленной присутствием в них нуклеиновой кислоты. Однако для отделения вирусов от нуклеопротеидных частиц самой клетки, имеющих такой же состав и размеры, как и вирусная частица, требуются специальные методы. [c.33]

Достаточно поломки вирусной частицы в любом месте, т. е. одного, разрыва в нити РНК, чтобы лишить ее биологической активности. Макромолекулярная спиральная структура РНК в этом случае навязана белковой оболочкой. Когда производится депро-теинизация РНК вируса, получается монодисперсная РНК, даю-Ш,ая в ультрацентрифуге исключительно острый пик. Ясно, что вторичная структура этой выделенной из вируса РНК совсем иная, чем внутри вируса. В выделенной макромолекуле образуются внутримолекулярные водородные связи между основаниями, в то время как внутри белковой оболочки вируса существовали только водородные связи между нуклеиновой кислотой и белком. [c.274]

Воздействие антите.ла при встрече его с антигеном выражается в том, что происходит слипание макромолекул белков друг с другом с образованием осадка (реакция преципитации) или склеивание бактерий или вирусных частиц друг с другом (реакция аглютинации), или разрушение (лизис) бактериальных клеток, или, наконец, когда бактерии захвачены фагоцитами, чувствительность их повышается и они гибнут внутри фагоцитов. Все явление в целом, т. о. образование антител и воздействие их на антигены, называется иммунологической реакцией. Появление антител в крови изучено на выделенных из крови сыворотках и даже на очиш,енных белковых фракциях — у лобулинах. Основные виды воздействия антисывороток на бактериальные и.ли другие антигены (например, упомянутые реакции преципитации, аглютинации и другие подобные феномены) называются серологическими реакциями. [c.501]

Книга принадлежит перу одного из создателей современной вирусологии. Чрезвычайно сжато, но вместе с тем очень шиво и интересно автор рассматривает на основе новейших данных все аспекты науки о вирусах методы выделения и очистки вирусов и их отдельных компонентов, свойства вирусных белков и нуклеиновых кислот, связь структуры вирусных частиц и их функций, природу инфекционности вирусов, их биологию и классификацию и т. д. Книга очень хорошо иллюстрирована многочисленными микрофотографиями, схемами и графиками. [c.4]

К главным событиям этого периода, благодаря которым вирусология из описательной науки превратилась в экспериментальную, вероятно, следует отнести следующие выделение чистых вирусов, начавшееся с работы Стенли по выделению вируса табачной мозаики выяснение Дельбрюком с сотрудниками механизма репликации фагов развитие представлений о ДНК и РНК как об активном начале вирусов (работы Херши и Чейз, Гирера и Шрамма, Френкель-Конрата) реконструкция вирусов и получение смешанных вирусных частиц (опыты Френкель-Конрата, выполненные совместно с Вильямсом и Сингером) ренатурация вирусных белков, проведенная [c.12]

При нейтральном или близких к нему значениях pH большинство вирусов диссоциирует лишь при добавлении сильных денатурирующих агентов. Добавлением мочевины или формамида до концентрации 8—10 М при pH 7—8 можно вызвать диссоциацию многих вирусов, а для отделения высвободившегося белка от вирусной РНК часто прибегают к методу осаждения белка сульфатом аммония. Белок ВТМ, выделенный таким способом при 20%-ном насыщении сульфата аммония, нерастворим даже в присутствии дитиотреитола, предотвращающего самоокисление. Денатурированный белок ВТМ успешно ренатурирует при растворении в 8 М растворе мочевины и последующем диализе против 0,02 М фосфата при pH 6 [7]. Под действием мочевины ренатурация белка может произойти даже после его обработки галоидоводородными солями гуанидина (4 М), которые относятся к более сильным денатурирующим агентам. У таких детергентов, как додецилсульфат натрия, наблюдается тенденция слишком прочно связываться с белками, что и является основным недостатком при их использовании для выделения белков. [c.50]

Мутации часто приводят к появлению белков, неполноценных как по своим химическим свойствам, так и но функциональной активности. Как уже было отмечено, все до сих пор полученные штаммы ВТМ, мутантные по белку оболочки, менее стабильны, чем дикий тип. Многие из таких мутантов оказались настолько нестабильными, что вообще не удалось выделить мутантный вирус. Для нескольких дефектных штаммов вирусные белки, выделенные из тканей, листьев, инфицированных этими вирусами, хотя и сохраняли способность к образованию спиральных агрегатов, не могли образовывать палочковидные частицы с РНК ВТМ (как дикого тина, так и мутантного). Два из этих белков были проанализированы [182, 449, 450], и выяснилось, что у одного из них произошла одна замена, а у другого — две. При этом две из этих трех аминокислот оказались расположенными у края немутирующего участка (остатки 95 и 112 см. фиг. 13). [c.207]

Было показано также, что в процессе экстрагирования вирусных нуклеиновых кислот и отделения их от белка может происходить комплексирование в действительности одноценочечных комплементарных молекул, так что обнаруживаемая двухцепочечность может быть на деле артефактом, связанным с фенольным или детергентным методами выделения внутриклеточной РНК. Были получены данные в пользу гипотезы, что матричная (—)-цень удерживается в комплексе с возникающей (4-)-цепью в основном не за счет спаривания оснований, а каким-то менее жестким способом, возможно с помощью молекул репликазы [117, 549]. Именно выраженной способностью образующейся РНК действовать в качестве информационной РНК и связываться с рибосомами, может быть, и объясняется быстрое снятие этой цепи с матрицы. Наряду с этими данными, однако, в последнее время были получены новые данные о существовании РФ- и РПФ-форм РНК у фагов и вирусов растений [25, 46, 221]. Проведенный недавно анализ образующихся 5 -концевых групп [c.241]

Успехи биохимической науки в значительной мере определяют не только современный уровень развития медицины, но и ее дальнейший прогресс. В настоящее время одной из основных задач биохимии и молекулярной биологии становится решение проблемы исправления дефектов генетического аппарата. Радикальная терапия наследственных болезней, связанных с мутационными изменениями тех или иных генов, ответственных за синтез определенных белков и ферментов, в принципе возможна лишь путем трансплантации синтезированных in vitro или выделенных из живых организмов аналогичных здоровых генов. Весьма сложной, но заманчивой идеей является овладение механизмами регуляции считывания генетической информации, заложенной в полинуклеотидной последовательности ДНК, и расшифровки молекулярных механизмов дифференциации клеток. Проблема терапии ряда вирусных заболеваний, особенно лейкозов, вероятно, не будет решена до тех пор, пока не станет полностью ясен механизм взаимодействия вирусов (в частности, онкогенных) с инфицируемой клеткой. В этом направлении интенсивно ведутся работы во многих лабораториях мира. Выяснение картины жизни на молекулярном уровне не только позволит полностью понять происходящие в организме процессы, но и откроет новые возможности создания эффективных лекарственных средств предотвращения преждевременного старения, сердечно-сосудистых заболеваний, поиска способов продления жизни и др. Наряду с вышеперечисленными следует отметить и другие важные направления биохимии [c.22]

Демонстрация ключевой роли сиаловой кислоты как компонента многих гликонротеинов в их отношении к частице вируса гриппа и к вирусной инфекции (обзор см. [186]) имела большое влияние на современные исследования гликонротеинов. Можно отметить лишь немногие направления в современном развитии исследований. Многие уже известные и очищенные гликонротеины, включая групповые вещества крови и белки сыворотки, были исследованы вновь и вскоре стала очевидной широкая распространенность гликонротеинов, содержащих сиаловые кислоты. Присутствие сиаловой кислоты во многих гликопротеинах, представляющих биологический интерес, делает необходимым развитие мягких методов их выделения и очистки, поскольку кетозидная связь, соединяющая концевой остаток сиаловой кислоты с ее партнером, чувствительна даже к 0,05 п. минеральной кислоте. Ферментативное отщепление сиаловой кислоты от гликонротеинов позволило оценить ее вклад в физические, химические и биологические свойства индивидуальных гликопротеинов. Этот подход был очень плодотворным. Так, оказалось, что сиаловая кислота ответственна за низкую изоэлектрическую точку и высокую электрофоретическую подвин ность сиалогликопротеинов, за электрофоретическую подвижность эритроцитов и раковых клеток, за вязкость гликонротеинов слюны, за биологическую активность гонадотропинов и других гормонов и за правильное функционирование фактора Кэстла. По счастливому стечению обстоятельств этот рост исследований гликонротеинов происходил в то время, когда был доступен арсенал чувствительных, мощных и специфических методов исследования состава и структуры сложных белков и определения их физических свойств и химической реакционной способности. Ниже будут рассмотрены успехи, достигнутые к настоящему времени. [c.23]

Наследственная информация кодируется последовательностью нуклеотидов в молекуле ДНК. Любая экспериментальная методика, предназначенная для определения последовательности нуклеотидов, требует химически чистых препаратов ДНК. Слово чистый в данном случае означает не только отсутствие примесей других типов молекул, например РНК и белков, но и гомогенность нуклеотидных последовательностей. Все молекулы ДНК в таком образце должны быть одинаковы как по размерам, так и в отношении последовательности нуклеотидов. По этой причине первыми для изучения генетической организации на уровне нуклеотидов были выбраны вирусы прокариотических и эукариотических организмов. Геномы вирусов относительно малы, и вирусные частицы можно довольно легко отделить от клеточного материала еще до химического выделения интактных молекул ДНК из вирусных частиц. Описанное в гл. 7 гетероду-плексное картирование фага X основано на умении генетиков выделять интактные молекулы ДНК из различных линий фага X, геномы которых с генетической точки зрения уже изучены. То же самое относится и к исследованиям, показавшим концевую избыточность нуклеотидных последовательностей фагов Т2 и Т4 и циклические перестановки в их геномах. [c.260]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология