Двухколоночные методы

Двухколоночный метод анализа [4 [c.343]

При определении кислых и нейтральных аминокислот двухколоночным методом прибору задается такая же программа, как и при одноколоночном методе, но анализ останавливают после того, как выходит пик фенилаланина. [c.184]

По методу Пье и Морриса [82] все аминокислоты (кислые, нейтральные и основные) определяются на одной колонке за один цикл анализа с помощью градиентного элюирования. При использовании техники градиентного элюирования отпадает стадия регенерации колонки, необходимая при двухколоночном методе анализа, поскольку все аминокислоты элюируются из колонки . Кроме того, при таком способе анализа не требуются соленоидные клапаны для переключения буферов и отпадает необходимость в некоторых других деталях анализатора (например, в насосах). [c.16]

При повторном разделении один и тот же образец разделяют несколько раз, используя различные экспериментальные условия. Таким образом можно оптимизировать значения к для различных компонентов образца, а окончательные данные можно получить, объединяя результаты разделения. Примером может служить хорошо известный двухколоночный метод, используемый для анализа аминокислот. На одной колонке разделяются и определяются кислые аминокислоты, на другой—основные аминокислоты. Недостаток повторного разделения заключается в необходимости регенерации колонки, если не все компоненты образца элюированы во время разделения (как, например, при определении аминокислот, о котором говорилось выше), и сложности проведения двух или более разделений (по сравнению с одним разделением другим методом). Повторное разделение также иногда расточительно для образца, и этот фактор будет значительным в препаративном разделки, [c.119]

В двухколоночном методе используются две колонки разделительная и компенсационная. Для разделения применяют колонки с малой емкостью в качестве элюентов при анализе анионов используют гидроксиды щелочных металлов и соли слабых кислот, а при анализе катионов — азотную или другую минеральную кислоту. В анионной хроматографии компенсационная колонка заполняется сильнокислотным катионитом, при пропускании через который щелочной раствор нейтрализуется. В катионной хроматографии компенсационную колонку с той же целью заполняют сильноосновным анионитом. Электрическая проводимость раствора на выходе из компенсационной колонки определяется главным образом ионами анализируемого образца. [c.358]

Следующие четыре главы посвящены системам хроматографического разделения, в которых применяется детектор электропроводности. В гл. 4 обсуждаются двухколоночные методы хроматографирования анионов с привлечением кондуктометрического детектора. В ос- [c.13]

Описанным двухколоночным методом можно удовлетворительно разделять соли слабых как неорганических, так и органических кислот [11]. На рис. 9.7 показано превосходное разделение гипофосфита, цитрата, лактата и цианида. Как видно из рис. 9.8, можно также разделить фторид и бикарбонат и измерить с хорошей чувствительностью их содержание в водопроводной воде. [c.214]

Было высказано предположение, что более эффективное разделение можно осуществить, используя двухколоночный метод [96]. Первая колонка должна содержать краситель, не связывающий нужный фермент. С помощью этой колонки удаляются очень сильно связывающиеся белки, которые в противном случае адсорбировались бы и занимали связывающие участки на второй колонке. Вторая колонка должна содержать краситель, имеющий высокое сродство к нужному ферменту, но относительно низкое к другим белкам. Чтобы найти оптимальные условия, необходимо провести обследование многих окрашенных адсорбентов, измеряя при этом активность фермента и содержание белка в исследуемой смеси до и после ее пропускания через колонку, а также после элюирования фермента подходящим буфером. Этот способ пригоден в тех случаях, когда для выделения необходимого фермента иными методами требуются большие количества адсорбента. [c.171]

Во втором методе для определения всех аминокислот используют лишь одну колонку. Время, необходимое для анализа, в этом случае зависит от числа используемых буферных растворов, что в свою очередь определяется имеющейся аппаратурой. Если прибор, например анализатор Унихром фирмы Весктап (США), автоматически позволит производить однократную смену одного буферного раствора на другой, то предпочтительнее применять двухбуферную систему. В этом случае весь анализ занимает 4 ч. Если же прибор позволяет автоматически менять протекающий буферный раствор два или несколько раз, то используют систему из трех буферных растворов, что сокращает продолжительность анализа до 3 ч. При соответствующей комбинации методов продолжительность анализа двухколоночным методом можно еще уменьшить (см. ниже). [c.174]

Заполнение большой колонки для разделения кислых и нейтральных аминокислот при двухколоночном методе. Для одной колонки требуется около 50 г смолы. Большая колонка заполняется так же, как и малая (описано выше), за исключением того, что вслед за обработкой ш,елочью смолу суспендируют в растворе А и последующую обработку в колонке также производят щелочью и раствором А. [c.177]

Аппаратуру для анализа двухколоночным методом Мура, Спекмана и Стейна [5] предлагают все фирмы-изготовители, причем некоторые приборы обеспечиваются дублирующими колонками, что позволяет одновременно регенерировать одни колонки и производить разделение на других. [c.289]

В книге мы описываем и сравниваем два основных метода ионной хроматографии с кондуктометрическим детектированием. Первый метод, впервые предложенный Смоллом и сотр. [7], представляет собой двухколоночный метод, а другой метод, разработанный Гьерде, Фритцем и Шмуклер [8, 9], является одноколоночным. Тщательный подбор разделяющей колонки и элюента позволяет исключить компенсационную колонку. Некоторые исследователи, сравнивая оба метода, применяют название ионная хроматография с компенсацией в отличие от ионной хроматографии без компенсации или название ионная хроматография с колоночной компенсацией в отличие от ионной хроматографии с электрической компенсацией . Нам кажется, что эти названия вводят в заблуждение и даже ошибочны. В обоих вариантах ионной хроматографии генерируется фоновый сигнал, который необходимо компенсировать электрически. Кроме того, некоторые типы элюентов после прохождения через компенсационную колонку в действительности дают даже более высокую фоновую электропроводность (причины этого явления обсуждаются в гл. 5). Нам кажется, что термины одноколоночная ионная хроматография и двухколоночная ионная хроматография являются более точными. [c.10]

Метиламин, диметиламин и триметиламин определяли [3] в атмосфере двухколоночным методом с кондуктометрическим детектором. Амины разделяли на колонке Dionex ation (6X250мм), используя в качестве элюента 2,5 мМ раствор азотной кислоты. Градуировочный график линеен в интервале концентраций 5— 25 мкг/мл, относительное стандартное отклонение не превышает 5%. Амины сорбировали на фильтре, импрегнированном ща- [c.176]

К раствору белка до гидролиза добавляется точно известное количество аминокислоты — внутреннего стандарта, выход которого принимается за основу для расчета выходов аминокислот белка. При использовании двухколоночного метода требуются разные стандарты. Выбор стандартного соединения определяется индивидуальными особенностями каждой колонки и отчасти пристрастиями и привычками исследователя. В любом случае надо попытаться найти оптимальный вариант. Для длинной колонки можно попробовать норлейцин, норвалин или нитроти-po3Hii, для короткой колонки (для основных аминокислот) — диаминопимелиновую кислоту или гомоаргинин [314]. [c.275]