Разделение ионов I- и Вг методом колоночной хроматографии

Хроматографические методы подразделяют также по способу выполнения. Различают плоскостные и колоночные методы. К плоскостным методам относятся бумажная и тонкослойная хроматография. Здесь разделение веществ происходит в весьма тонком плоском слое. В бумажной хроматографии это бумага, на волокнах которой имеется тонкий слой воды, играющий роль неподвижной фазы. Следовательно, бумажная хроматография относится к распределительной. В, тонкослойной хроматографии порошкообразная неподвижная фаза (адсорбент, ионит, гель) тонким слоем наносится на стеклянную пластинку. Подвижная фаза вместе с разделяемыми веществами перемещается в этом слое. [c.255]

Рис. 6,8. Разделение ионов К и Na методом колоночной хроматографии о использованием иммобилизованного на эпоксидной смоле краун-вфира SG- 1B (носитель - силикагель) в растворе метанола.

Преимуществом колоночной хроматографии является возможность количественного фракционирования больших количеств веществ без превращения их в какие-либо производные. Однако хорошее разделение часто возможно лишь при малых скоростях элюирования, поэтому были разработаны новые виды колоночной хроматографии. Методы аффинной и адсорбционной хроматографии основаны на избирательной адсорбции молекул на нерастворимом адсорбенте, который содержит группы (молекулы), специфически взаимодействующие с молекулами подлежащих очистке соединений, например ингибиторы (для очистки ферментов) или антитела (для очистки антигенов) в настоящее время эти методы нашли широкое применение и для разделения углеводов. Невзаимодействующие с адсорбентом примеси удаляются, а связанный с адсорбентом сахар затем десорбируют способом, не приводящим к его разрушению. Десорбцию можно осуществить, изменяя pH, ионную силу среды или применяя соответствующий ингибитор взаимодействия, удерживающего вещество на адсорбенте. Для разделения ряда полисахаридов были использованы иммобилизованные формы (см. разд. 26.3.7.6) конканавалина А [40], являющегося фитогемагглютинином (лектином), который специфически взаимодействует с разветвленными полисахаридами определенного строения в настоящее время применяют и другие иммобилизованные фитогемагглютинины. Колоночная хроматография на носителях, покрытых полиароматическими соединениями [41], также находит применение для разделения полисахаридов. Благодаря достижениям в производстве носителей для жидкостной хроматографии под высоким давлением можно осуществить хроматографическое разделение быстро и избирательно описаны методы фракционирования небольших олигосахаридов, продолжающегося менее 1 ч [42]. [c.224]

Разделение ионов 1 и Вг- методом колоночной хроматографии [c.130]

Для разделения галогенидов методом колоночной распределительной хроматографии можно использовать катионит СБС в Na-форме. В качестве элюента применяют органические растворители (например, ацетон), неограниченно смешивающиеся с водой. При этом ионит как сильно гидрофильный носитель удерживает преимущественно воду, которая не вымывается органическим растворителем. За счет многократного повторения процессов распределения происходит разделение компонентов смеси. [c.130]

Работа 12. Концентрирование микроколичеств меди, хрома цинка методом экстракционной колоночной хроматографии. Работа 13. Разделение на бумаге смеси ионов марганца(П [c.7]

Избыток детергента может мешать фракционированию. Например, высаливание сульфатом аммония приводит к появлению на поверхности раствора слоя тритона Х-100, в котором часто содержатся нужные белки. Однако эффективного разделения при этом не происходит. Можно провести колоночную хроматографию или отделить белки с помощью гель-фильтрации (разд. 5.1), но не исключено, что мицеллы детергента будут двигаться в той же зоне, что и белок, и, следовательно, окажутся в одной фракции. Ионообменная хроматография успешно осуществляется в присутствии неионных детергентов (разд. 4.2 и 4.3). Действительно, тритон Х-100 в концентрации до 1% оказывает незначительное влияние на ионообменные свойства нормальных водорастворимых белков. Но солюбилизированные белки мембран могут находиться только в составе детергентных мицелл, что существенно влияет на процесс ионного обмена. Если исследуемый белок удается адсорбировать на ионообменнике, то избыток детергента свободно проходит через колонку. Это позволяет элюировать свободный (относительно) от детергента белок. С другой стороны, если полное удаление детергента приводит к денатурации белка, то, чтобы предотвратить это, в буфер вносят небольшое количество детергента (<0,1 7о). Собранная фракция будет, конечно, тоже содержать некоторое количество детергента. Тем не менее, так как обычно из смеси белков выделяют какой-то определенный фермент, присутствие в конечном препарате незначительной концентрации чистого детергента, не загрязненного жирами, не принесет большого вреда. Методы удаления избытка детергентов были недавно суммированы в обзоре [23]. [c.55]

Правильный выбор сорбента и соответствующей элюирующей системы — это первый и наиболее важный этап решения поставленной задачи. Поэтому необходимо обстоятельно знать свойства всех типов используемых в ТСХ сорбентов. Выбрать оптимальную хроматографическую систему достаточно сложно, поскольку разделение методом ТСХ обычно совершается в результате сочетания различных механизмов, чаще всего адсорбции и распределения между фазами, а также ионного обмена или затрудненной диффузии (гель-хроматография). Однако, еслп условия выбраны правильно, один из механизмов разделения становится преобладающим. Если разделяемые соединения неполярны, следует создать условия, благоприятные для адсорбционной хроматографии (применение сорбента с большой адсорбционной способностью), а для разделения полярных (растворимых в воде) соединений следует использовать принципы, применяемые в жидко-жидкостной хроматографии. Наконец, при работе с ионогенными соединениями следует избрать методику ионообменной хроматографии. Очевидно, что налицо определенная аналогия с колоночной хроматографией. [c.97]

Разделение ионов ванадия (IV) и (V) и железа (III) методом колоночной распределительной хроматографии. Лугинин В. А., Слесарь Н. И., Церковницкая И. А. В кн. Инструментальные и химические методы анализа. Изд-во Ленингр. ун-та, 1973, с. 125—129. [c.150]

Предложен метод разделения ионов ванадия (IV) и (V) и железа (III) колоночной распределительной хроматографией с обращенной фазой с использованием в кач естве экстрагента неразбавленного ТБФ. Разделение возможно в присутствии 100-кратного избытка сульфат-ионов. Табл.— 3, библ.—15 назв. [c.150]

Среди современных методов анализа ионов одним из наиболее простых и эффективных является хроматография. В ней разделение осуществляется в результате неодинакового распределения ионов между двумя фазами—подвижной и неподвижной. Так как преимущественно используют водные растворы, то в основном наибольшее значение имеет жидкостная хроматография в виде ее таких вариантов, как колоночная ионообменная, тонкослойная распределительная и бумажная распределительная хроматография. [c.63]

Отмучивание. Носитель можно разделить на отдельные фракции, суспендируя смесь частиц в движущемся вверх с определенной скоростью потоке жидкости. Частицы меньше заданного определенного размера будут уноситься вместе с потоком жидкости, в то время как частицы большого размера останутся в сосуде. Разделение на фракции проводят, используя поток жидкости различной скорости. Этот метод требует простого и недорогого оборудования и успешно используется для фракционирования смолы для ионного обмена [5—7] и носителя для колоночной экстракционной хроматографии [8], [c.70]

Целлюлозу наиболее часто используют в качестве сорбента при хроматографии в системе жидкость—жидкость основы этого метода являются общими для колоночной и бумажной хроматографии. Эта аналогия очень полезна главным образом при выборе соответствующей системы растворителей [22]. Кроме того, при разделении в системе жидкая фаза—жидкая фаза удерживание растворенного вещества на целлюлозе часто зависит от адсорбции и ионного обмена, и все эти эффекты вносят определенный вклад в коэффициент распределения. [c.63]

Использование ступенчатых градиентов. Как отмечено в разд. 1.2.3 и на рис. 1.3, препаративную ЖХ можно использовать как быстрое средство выделения или обогащения классов соединений в условиях ступенчатого градиента. Иногда для простых смесей на этом может быть закончена необходимая очистка (см. пример на рис. 1.27). В других случаях для разделения сложного образца с компонентами, сильно отличающимися по полярности, может быть необходимо использовать многоступенчатую последовательность. Если оставить в стороне вопросы, связанные с растворимостью образца (см. разд. 1.6.2.2.6), то в адсорбционной ЖХ с помощью комбинации только четырех растворителей можно создать последовательность восьми градиентных ступеней и быстро разделить образец на фракции, которые затем можно индивидуально очистить в изократическом режиме. В каждой фракции спектр компонентов будет перекрывать диапазон к примерно только на 5—10 единиц. При скорости 1 мертвый объем в минуту процесс разделения, показанный в табл. 1.8, потенциально может быть закончен менее чем за 20 мин. Размер колонки может быть выбран в соответствии с имеющимся в наличии образцом. Для быстрого фракционирования образца можно аналогичным образом достаточно эффективно использовать градиентные схемы и в других методах разделения (ионный обмен, аффинная хроматография, распределение и т.д.). Классическая колоночная хроматография на открытых колонках часто выполнялась с использованием ступенчатого градиента, создаваемого элюотроп-ным рядом, подходящим для используемой неподвижной фазы. Однако, поскольку приготовление хорошей препаративной ЖХ-колонки требовало искусства и длительного времени. [c.100]

Разделение четырех галогенид-ионов осуществлено методом колоночной хроматографии с использованием в качестве сорбента катионита СБС с 70% стирола [2491. В колонку размером 2 X ЬО см загружают 32 г катиопитав Ка+-форме с зернением 0,025—0,050 см набухшего в смеси 20% воды и 80% ацетона. Анализируемую, смесь вводят в верхнюю часть колонки в виде твердых солей (по 15—20 мг каждого галогенида) и элюируют со скоростью 0,5 мл/мин водно-органическими смесями, содержащими следующие количества ацетона (мол.%) для NaJ 80, NaBr 70, Na l 50, NaF 30. В той же последовательности выходят с колонки компоненты смеси. Как показал интерферометрический анализ фракций объемом 10 мл каждая, галогениды отлично отделяются друг от друга, причем между кривыми элюирования компонентов имеются разрывы i 50 мл. Преимуществом метода является отсутствие посторонних электролитов в элюатах. Содержащийся в них ацетон при необходимости можно удалить нагреванием на водяной бане. [c.64]

Мейнхард и Холл [1] первыми предложили применять в ТСХ комплексообразователи, однако цель, которую они перед собой ставили, состояла не в том, чтобы улучшить разделение, а в том, чтобы облегчить таким образом обнаружение пятен компонентов. Эти авторы вводили в некоторые адсорбенты 8-оксихино-лпн, но получить достаточно воспроизводимых результатов им не удалось. В 1961 г. Димов [115] применил принцип модифицирования поверхности силикагеля ионами серебра в газовой хроматографии. В том же году Гёринг и сотр. [116] провели разделение методом колоночной хроматографии на силикагеле, обработанном раствором нитрата серебра, а Моррис [118] и Баррет [23] в 1962 г. применили тот же адсорбент в ТСХ. Очень важная особенность этого адсорбента состоит в том, что он селективен к олефинам благодаря образованию комплексов последних с катионами серебра. Он пригоден для разделения молекул, различающихся по числу двойных связей и их конфигурации (цис- и гранс-изомеры). Баррет и сотр. [23] готовили суспензию, смешивая 30 г силикагеля О с 60 мл 12,5 %-ного водного раствора нитрата серебра. Моррис [19] вначале наносил нитрат серебра на уже готовую пластинку с помощью пульверизатора, однако позднее [218] он также готовил суспензии, смешивая 23,7 г силикагеля О с 50 мл раствора, содержащего [c.63]

Рис, в.7. Разделение ионов к и Na методом колоночной хроматографии с использованием иммобилизоеанного на эпоксидной смоле краун-эфира S G-B18 (носитель силикагель) в водном растворе. [c.336]

Рис. в.е. Разделение ионов Саи 8 методом колоночной хроматографии с использованием иммобилизованно го на эпоксидной смоле краун-эфира 8С-В18 (носитель — силикагель) в водном растворе. [c.337]

Разделение ионов металлов методом колоночной хроматографии с обращенными фазами на хлориде метилтрикаприламмония (аликват-336), нанесенном на кель-Р. [c.560]

Большинство ранних хроматографических разделений проводили на колонках с использованием подходящих сорбентов, но на некоторое время колоночная хроматография была вытеснена методами бумажной, тонкослойной и газожидкостной хроматографии (ГЖХ), которые обладали большей эффективностью и разрешающей способностью. Методом колоночной хроматографии проводили лишь препаративные разделения. Однако растущее использование ионного обмена и гель-фильтрации, а также бурное развитие высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) вновь сделали колоночную хроматографию одним из важнейших методов. [c.10]

Разделению энантиомеров аминокислот методом колоночной хроматографии посвящен обзор Ауберта 141]. Автор отмечает, что в аналитических целях более всего удобны методики, ос нованные на добавлении асимметрического реагента в подвижную фазу. Лефебру и др. [127] удалось полностью разделить аминокислоты, используя пористые гели на основе акриламида с привитыми остатками Ь-а-аминокислот, образующими комплексы с ионами металлов. Авторы [127] рассмотрели влияние структуры геля, кинетики жидкостного обмена, а также природы ионов металла и хирального привитого компонента на хроматографические характеристики энантиомеров аминокислот. [c.59]

Наиболее эффективным и широко применяемым методом фракционирования сложных смесей липидов является хроматография. Главную роль при аналитическом фракционировании играет адсорбционная хроматография в тонком слое сорбента. Этот метод также применяется в препаративных целях, когда разделению подвергается небольшое количество липидов (50—300 мг). Если масса липидов превышает 300 мг, используют колоночную хроматографию, хотя по разделяющей способности и времени разделения этот метод часто уступает тонкослойной и газовой хроматографии. Однократного хроматографирования обычно бывает недостаточно для выделения индивидуальных веществ, в связи с этим полученные фракции подвергают препаративной тонкослойной хроматографии или колоночной хроматографии другого типа. При колоночрюй хроматографии липидов используют не только принцип адсорбции, но и принцип распределения между двумя несмеши-вающимися жидкостями, гель-фильтрации, ионного обмена. [c.69]

Хорошие результаты получены при разделении нейтральных и ионных металлоценов (т. е. соединений, различающихся величиной заряда на атоме металла), замещенных и незамещенных соединений, металлоценов с разными лигандами или изомеров, различающихся положением атомов углерода. Смеси этих соединений часто интенсивно окрашены, и поэтому их удобно разделять методом сухой колоночной хроматографии. Типичные примеры разделения металлокарборанов приведены в табл. 43.4. [c.172]

Расположение (А) позволяет координировать катионы, ионный радиус которых превышает приблизительно 0,06 нм, тогда как при расположении (В) нижним пределом является примерно 0,08 нм. Эффективность комплексообразования в случае ациклических полиолов зависит от доступности конформеров с расположением гидроксильных групп типа (В) и наиболее высока для альдитов, содержащих /ссмло-конфигурацию, например для ксилита и сорбита (от С-2 до С-4) [377, 378]. Таким образом, комплексообразование в случае ксилита включает вторичные гидроксильные группы и конформационный переход серп-зигзаг (166). Такие взаимодействия удобно наблюдать м-етодом спектроскопии ЯМР с использованием лантанидных парамагнитных сдвигающих реагентов [например, солей Ей(III), Рг(1П) или Yb(III)] в [377—380]. Практическое применение комплексообразований включает разделение и идентификацию полиолов методом электрофореза в присутствии солей металлов и колоночной хроматографии на катионообменных смолах [381], а также определение конфигурации диолов (обычно вицинальных) путем хироптических измерений. К числу последних относятся применение кругового дихроизма к хорошо известным медно-аммиачным растворам гликолей [c.122]

Для разделения щелочных элементов в качестве ионообмен-ников используются ферроцианиды различных металлов, предложенные для этой цели Тананаевым [35]. Сорбция щелочных элементов ферроцианидами уменьшается в следующей последовательности s (Т1) > Rb > К > Na [35—38]. Применение ферроцианидов для ионообменной хроматографии впервые исследовано Коур-жимом с сотр. [87]. Использованы ферроцианиды различных элементов (Zn, Си, Ni, Со, Fe (П1), РЬ, d, Bi и Ag). Наиболее подходящими материалами для колоночной хроматографии являются ферроцианиды меди и цинка. Механические свойства (стабильность по отношению к воде, 6 М растворам солей натрия и аммония и т. д.) данных сорбентов зависят от метода их приготовления. Найдены оптимальные условия (концентрация растворов, температура осаждения и высушивания, природа присутствующих анионов и инертного носителя) приготовления наиболее стабильных ионо-обменников. [c.282]

Большая скорость выполнения ЭВМ логических и арифметических операций позволяет применять метод перебора большого числа возможных вариантов для нахождения наиболее оптимального решения и во многих других задачах аналитической химии. Например, уже на первом этапе анализа разделения смеси исходных веществ, в принципе, предполагается колоссальное число возможных решений, и доказательство того, что применяемые традиционные методы являются наиболее подходящими, без ЭВМ немыслимо. Паузманн [38] при водит следующие соображения по числу возможных спо собов разделительного процесса, их изображению 1 интерпретации. К наиболее популярным методам разде ления веществ смеси, применяемым в аналитической хи мии, можно отнести газовую хроматографию (ГХ) газо-жидкостную хроматографию (ГЖХ), тонкослойную хроматографию (ТСХ), абсорбционную, гелевую, ионо обменную, колоночные виды хроматографии, ионофорез электрофорез, дистилляцию, зонную плавку, колоночную. кристаллизацию, седиментацию и другие методы раз деления. Для анализа всех этих методов с единых пози ций автор вводит три элементарные величины, опреде ляющие разделительные процессы, и восемь индексов характеризующих направление приложения этих ве личин [c.46]

Получивший в последнее время значительное распространение метод колоночной распределительной хроматографии с обращенной фазой позволяет работать с неразбавленными растворами экстрагентов, что не всегда возмояно в обычных статических условиях ввиду образования трудно расслаивающихся жадностей и стойких эмульсий.Использование этого метода повышает фактор разделения исследуемых ионов, можно добиться их извлечения из сильно кислых растворов, а также получить сведения о коэффициентах распределения, на основании которых сделать некоторые предположения о механизме процесса. [c.150]

Система для создания градиента. При разделении компонентов нуклеиновых кислот с помощью колоночной хроматографии часто бывает необходимо изменять pH растворителя или концентрацию ионов в нем. При автоматической хроматографии состав растворителя удобнее изменять пе ступенчато, а непрерывно (градиентное элюирование), что упрощает метод кроме того, при этом не появляются дополнительные начальные пики, как это бывает при пропускании канлдого нового растворителя при [c.76]

Теоретически любые растворимые вещества можно разде--лить с помощью подходящего метода жидкостной хроматографии. Ионообменная хроматография и электрофорез применимы в тех случаях, когда соединения имеют ионный характер или содержат ионогенные группы. Область применения гель-хроматографии ограничена соединениями с относительно высокой молекулярной массой (10 —10 дальтон). Адсорбционная и распределительная хроматография используются для разделения веществ со средней молекулярной массой (10 —10 дальтон),. и поэтому эти методы представляют особый интерес для хими-ков-органиков. Небольшие количества веществ можно разделить с помощью различных методов плоскостной хроматографии. Преимуществом последних является возможность анализа одновременно нескольких образцов, а также низкая стоимость, оборудования. Методы плоскостной хроматографии отличаются очень простым аппаратурным оформлением, однако требуют от экспериментатора определенных навыков. Разработано несколько вариантов препаративной плоскостной хроматографии и количественного анализа хроматограмм, однако они в известной степени несовершенны. Современная колоночная хроматография обладает теми же достоинствами и недостатками, что и газовая хроматография, однако в отличие от последней ее можно рекомендовать не только для анализа, но и для препаративного выделения веществ, особенно если эти вещества недостаточно термостойки, разлагаются на свету или легко окисляются. [c.31]

Хроматография на носителях, содержащих ионы серебра, используется для разделения жирных кислот в комбинации с колоночной хроматографией [397], ВЭЖХ [398] и особенно с ТСХ [399[. Метод основан на том, что между ионами серебра и двой- [c.167]

В классической колоночной хроматографии содержание элементов во фракциях элюата устанавливают различными методами неорганического анализа. Поскольку разделение ионов, а также соединений требует сравнительно больших объемов растворителя, то при разделении методом колоночной хро.матографни часто наблюдаются значительные эффекты разбавления, и в результате для количественного анализа следов в элюатах (без дополнительного обогащения) пригодны лишь высокочувствительные способы обнаружения. В табл. 37 приведена сводка таких методов, в которых колоночная хроматография сочетается с различными способами обнаружения и служит для удаления соединений, мешающих определению (или даже основного компонента), для разделения фракций, содержащих отдельные элементы, или для обогащения сильно разбавленных проб. [c.101]

Распределительная хроматография занимает промежуточное положение между адсорбционной хроматографией и хроматографией на обращенных фазах. Распределительные системы предпочтительны при разделении членов гомологического ряда. Такое разделение можно провести и в системах с обращенной фазой. Методом адсорбционной хроматографии можно разделить только низшие члены гомологического ряда. Оптические изомеры удается разделить только в форме пар диасгереомеров (см. рис. VI.21), что в ( щем не представляет трудностей. Для расщепления рацематов в принципе пригодны оптически активные подвижные фазы. Подобные фазы для классической колоночной хроматографии известны только в форме производных целлюлозы [2, 3], для жидкостной хроматографии при высоком давлении они не пригодны. Область применения ионообменной хроматографии ограничена, так как использовать можно лишь чисто водные системы. В таких системах можно разделять те ионы или соединения, которые легко и обратимо образуют комплексы (обмен лигандов) с ионами, связанными с ионообменником. Кроме того, на органической матрице ионообменника может также происходить неионообменная сорбция. Если в системах с ионообменниками к водным элюентам добавляют органические растворители, то элюенты разделяются и образуется распределительная система. Если бы дополнительно учитывали обе эти возможности разделения на ионообменниках, то возможности использования этого метода были бы более многообразны, чем это следует из табл. Х.1. [c.218]

Весьма разнообразны методы хроматографии, играющие большую роль в аналитической химии, особенно в анализе органических веществ. Разделение смесей осуществляется при движении жидкой или газообразной фазы сквозь слой неподвижного сорбента, состоящего из дискретных элементов — обычно зерен или волокон. Сорбент обладает большой суммарной поверхностью. Разница в адсорбируемости компонентов разделяемой смеси или в кинетике их сорбции и десорбции обеспечивает разделение. Дело в том, что при движении смеси через слой сорбента элементарные акты сорбции и десорбции повторяются множество раз это позволяет эффективно использовать даже очень малую разницу в сорбируе-мости компонентов или разницу в кинетике сорбции — десорбции. Механизм сорбции может быть различным — простая адсорбция, ионный обмен, образование осадков, растворимых комплексных соединений, распределяемых между двумя жидкими фазами. Соответственно известны и применяются адсорбционная, ионообменная, осадочная, распределительная хроматография. Различна и техника хроматографического разделения сорбентом можно заполнить колонку, его можно использовать в виде тонкого слоя — мы будем иметь дело с колоночной, бумажной или тонкослойной хроматографией. Иногда хроматографическое разделение осуществляют ири наложении электрического поля и тогда появляется [c.80]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология