Низкие температуры, использование флуоресценции

В 30-е годы появилось несколько работ по тушению флуоресценции и по фотостационарному состоянию. Использование этих явлений позволяло измерять очень большие скорости. Имелось также несколько исследований скорости реакций при низких температурах. Этим к 1939 г. ограничивались специальные методы, разработанные для быстрых реакций в растворе. Однако к 1954 г., когда Фарадеевское общество провело дискуссию по исследованию быстрых реакций, уже существовал целый ряд методов . Часть из них явилась развитием струевых методов. [c.11]

Многие из ароматических углеводородов обладают интенсивной флуоресценцией, но использование их в качестве органических люминофоров ограничено сложностью синтеза и канцерогенностью некоторых из них. С теоретической точки зрения изучение люминесцентных свойств ароматических углеводородов представляет интерес благодаря тому, что в видимой и ближней ультрафиолетовой области у них можно ожидать только один вид электронных переходов, а именно, переходы ля -тина. Действительно, для соединений этой группы при комнатной температуре характерна только флуоресценция пя -типа, а при низких температурах в некоторых случаях наблюдается длительная яя -фосфоресценция. Исключение составляют те углеводороды, Т 8или 51 [c.25]

Из всех экспериментальных фотолюминесцентных методов наиболее широко применяется измерение быстрой флуоресценции в жидком растворе при комнатной температуре. Этот метод является простым и быстрым, а имеющееся в настоящее время оборудование обеспечивает высокую эффективность и чувствительность во всех областях спектра. Если бы удалось создать источник света, дающий достаточно интенсивный непрерывный спектр ниже 250 нм, то в этой спектральной области можно было измерять спектры возбуждения очень разбавленных растворов. Определенные преимущества измерения флуоресценции и фосфоресценции при низкой температуре находят все более широкое признание, и в ближайшие годы область применения таких измерений должна расшириться. Долгоживущая люминесценция в жидком растворе пока еще применяется редко, и анализ следовых количеств по сенсибилизованной замедленной флуоресценции при концентрациях, которые низки, но достаточны для тушения долгоживущих триплетных молекул, имеет большие перспективы. Улучшение временного разрешения фосфориметра или усовершенствование другого простого оборудования для разрешения люминесценции с временем жизни 10 —10 с должно обеспечить дополнительные возможности, например, для использования аннигиляционной замедленной флуоресценции относительно короткоживущих триплетов. [c.476]

Ясно, что при работе с микроколичествами лазер как источник возбуждения имеет преимущество, поскольку обеспечивает концентрацию большого потока возбуждающего света на очень малую площадь. Фотохимическое разложение, несомненно, создаст трудности, но при работе в твердой среде при низкой температуре они могут быть сведены к минимуму. При исследованиях несколько больших образцов лазер можно использовать для получения световых потоков, достаточно больших, чтобы даже в случае короткоживущих триплетов можно было наблюдать аннигиляционную замедленную флуоресценцию. Мощные лазеры позволяют возбуждать фосфоресценцию и замедленную флуоресценцию при триилет-синглетном поглощении (см., например, работы [439, 440]). Уже имеются лазеры, дающие излучение при нескольких длинах волн в ультрафиолетовой области, и быстрый прогресс в лазерной технологии позволяет рассчитывать на широкое использование их в качестве источников возбуждения во многих областях исследования и применения фотолюминесценции. [c.478]

В результате творческого подхода к методам молекулярного анализа раскрываются возможности к открытию новых областей его применения, например, можно рассмотреть исследование спектров люминесценции сложных органических соединений при низких температурах. Мы указывали, что спектры люминесценции жидкости или твердых тел являются недостаточно характерными, представляя собой широкие расплывчатые полосы, с плохо выраженными максимумами, что значительно затрудняет их использование для спектроаналитических целей. Однако, если вызвать люминесценцию некоторых веществ при температуре жидкого азота или водорода и подобрать растворитель для данного вещества, то спектр резко меняет свой вид спектр флуоресценции или фосфоресценции представляет собой ряд резких спектральных линий, ширина которых не превосходит [c.135]

Из подобных примеров, близких к аналитическим методам, можно назвать автоионную эмиссию в электрических полях большой напряженности (до 10 в см) и возможность наблюдать отдельные атомы в структуре твердых тел с помощью автоионного микроскопа. Использование резонансного поглощения света органическими соединениями, охлажденными до низких температур (эффект Шпольского), позволило получить квазилинейчатые спектры флуоресценции, что нашло применение в аналитической химии [31. Такие методы, как мёссбауэровская спектроскопия, ядерный магнитый, электронный парамагнитный резонанс отличаются высокой чувствительностью и избирательностью благодаря их резонансным характеристикам. С помощью этих методов может быть исследована структура сложных молекул, определено состояние окисления атомов, изучены процессы комплексообрааования, выявлен характер и определена энергия связи в соединениях. [c.44]

Высокая результативность применения этого способ оценки редокс-состояния дыхательной цепи показана толь ко для низких температур. Основные ограничения связан с низкой интенсивностью флуоресценции флавинов. Мож но ожидать, однако, что использование современной лазер ной техники для возбуждения люминесценции, с сопут ствующим увеличением ее интенсивности и повышение монохроматичности откроет новые возможности для прс ведения прижизненных наблюдений окислительно-восста новительных превращений в клетке. [c.230]

В качестве детекторов на настоящей стадии разработки метода наиболее часто применяются устройства, основанные на ультрафиолетовой спектрофотометрии, на измерении показателя преломления или на измерениях флуоресценции. Для фармацевтических целей наиболее подходящим является ультрафиолетовый спектрофотометр, обладающий высокой чувствительностью (низший уровень обнаружения составляет 1—2 нг для материала, имеющего хорошие светопоглощающие свойства) и стабильностью (в частности он отличается низкой чувствительностью к контролируемым изменениям в составе растворителя и неравномерности потока) естественно, что такой детектор не может быть использован, если элюируется материал, не имеющий заметного поглощения в ультрафиолетовой области. Рефрактометр реагирует на разницу в показателе преломления чистой подвижной фазы и подвижной фазы, содержащей элюируемый материал этот метод имеет более широкое применение, чем адсорбционная опектрофото-метрия в ультрафиолетовой области, но он малочувствителен и в значительной степени зависит от небольших изменений в составе растворителя, от скорости потока и температуры. [c.104]

Из спектроскопических методов особое место призваны занять методы атомной абсорбции, рентгеновской флуоресценции, масс-спектрометрии на вооружении сохранятся эмиссионный спектральный анализ и спектрофотометрия. Атомно-абсорбционный метод станет одним из наиболее распространенных и важных. Будут созданы атомно-абсорбционные квантометры, прецизионные спектрофотометры, разработаны методы анализа твердых проб. Лазеры, в частности с плавно изменяющейся длиной волны, будут применяться в инфракрасной и электронной спектроскопии, для спектрофотометрического и люминесцентного анализа. Можно предполагать разработку высокочувствительных и точных методов молекулярного анализа с использованием микроволновой и ра-диоволновой спектроскопии. В люминесцентном анализе расширится использование низких и сверхнизких температур для повышения чувствительности и точности анализа. [c.238]

В последнее время наряду с детектированием по реакции с нингидрином широкое распространение получило детектирование по флуоресценции продуктов реакции с флуорескамином [93]. Реакция идет при комнатной температуре, а в остальном анализ напоминает обычную схему с использованием нингидрина [94]. Анализируемые вещества разделяются по колонке с ионообменной смолой, затем проходят через реакционную спираль (реактор), а флуоресценция регистрируется с помощью флуориметра. Показано, что эту систему можно использовать для анализа белковых гидролизатов [95, 96]. Схема модифицированного анализатора аминокислот приведена на рис. 32.11. Для работы на одной колонке необходимо три микронасоса первый — для подачи буферного раствора на колонку второй — чтобы довести величину pH элюата до значения 9 и третий предназначен для смешивания элюата с реагентом, представляющим собой раствор флуорескамина в ацетоне. Скорость реакции достаточно высока, что позволяет использовать короткую реакционную спираль. Далее смесь проходит через проточную кювету флуориметра, и интенсивность флуоресценции регистрируется самописцем. Одновременно много внимания было уделено выделению продуктов реакции аминов с флуорескамином, обладающих низкой полярностью, для анализа которых могла оказаться пригодной высокоскоростная хроматография. Более того, в этом случае можно было бы обойтись без реакционной спирали. Такой путь оказался приемлемым для анализа первичных аминов [97—99]. Что касается аминокислот, то большинство из них, вопреки ожиданиям, давали с флуорескамином два продукта реакции, соотношение которых определялось природой аминокислоты. [c.340]