Иммобилизованные молекулы

Привитый слой образован иммобилизованными молекулами, что в буквальном переводе означает лишенными подвижности . В действительности привитые молекулы лишены только возможности двигаться как целое, сохранив в значительной мере подвижность своих частей. Исследование подвижности молекул на поверхности необходимо для более полного описания привитых слоев и предсказания свойств химически модифицированных материалов. В настоящее время можно считать хорошо установленным, что подвижность привитых молекул уменьшается с ростом плотности прививки и снижением температуры. Литературные данные о влиянии растворителя на подвижность привитых молекул достаточно противоречивы. Процесс взаимодействия привитых слоев с растворителем во многом остается непонятным и требующим дальнейшего изучения. Для исследования динамики привитых слоев наиболее эффективным, вероятно, является метод твердотельной ЯМР-спектроскопии. Наряду с ЯМР также широко применяются методы спектроскопии ЭПР и флуоресценции с использованием меток и зондов. Данные методы. [c.212]

Рис. 2.9. Схематическое изображение моделей сольватации иона с образованием нескольких характерных областей а — растворители с низкой структурной упорядоченностью (например, углеводороды), в которых образуется только сольватная оболочка А и имеется неупорядоченный свободный раствори тель В [98] б—высокоупорядоченные растворители (например, вода), в кс торых создается сольватная оболочка А с иммобилизованными молекулами растворителя, окруженная областью В с нарушенной структурой растворителя, а затем упорядоченным свободным растворителем С (Франк и Вен [16]).

Поскольку у белков, как правило, имеется несколько однотипных аминокислотных остатков, в частности и остатков лизина, то разные молекулы фермента оказываются связанными с носителем через разные аминокислотные остатки. Если такой остаток расположен вблизи активного центра фермента или даже в самом активном центре, иммобилизация может привести к частичной или полной потере каталитической активности. Если же иммобилизация прошла по участку, удаленному от активного центра, то активность у фермента чаще всего остается. Поэтому в целом значительная часть иммобилизованных молекул частично или полностью сохраняет способность катализировать ферментативное превращение и наблюдается лишь падение суммарной активности фермента, ковалентно связанного с полимерным носителем. В связи с этим важной задачей является выбор такого типа иммобилизации, который приводит к наименьшим потерям активности. [c.160]

Иммобилизованные молекулы могут полностью или частично исключаться из процесса переноса вещества [33, 36, 41]. Так, методом ЯМР [351 было показано, что различие в подвижности иммобилизованных и подвижных молекул аммиака в полистироле может достигать 20 раз. [c.23]

Значительно более прецизионный подход основан на титровании активных центров иммобилизованных антител меченым антигеном. В качестве метки целесообразно использовать низкомолекулярные соединения (изотоп, флуоресцирующий краситель, кофактор и т. д.), чтобы в максимальной степени снизить вероятность экранирования меткой антигенных детерминант. Суть метода заключается в насыщении микроколичеств иммуносорбента меченым антигеном. Получаемая в результате опыта изотерма адсорбции позволяет вычислять концентрацию и константы связывания иммобилизованных молекул антител. Так как в подобном эксперименте определяется не абсолютная концентрация активных центров антител, а концентрация центров, доступных для взаимодействия с антигеном, следует ожидать, что эта величина будет различной для антигенов с разными размерами и молекулярной массой. Например, при иммобилизации антител разной специфичности часть центров может экранироваться носителем от контакта с макромолекулярным антигеном, но быть доступной для низкомолекулярного. [c.218]

Химия привитых поверхностных соединений — химия твердого состояния. Привитый слой образован иммобилизованными молекулами, что в буквальном переводе означает лишенными подвижности . В действительности привитые молекулы лишены только возможности двигаться как целое, сохранив в значительной мере подвижность своих частей. С помощью спектроскопии ЭПР бьшо показано, что время корреляции вращения спин-меченых привитых молекул составляет 10 —10 с. Время корреляции — параметр, характеризующий вращательную подвижность спиновых меток. Для сравнения время корреляции 10 с наблюдается для замороженных растворов нит-роксильного радикала при температуре жидкого азота, тогда как при комнатной [c.21]

Вообще тщательную промывку аффинного сорбента перед его использованием, а особенно после длительного хранения следует предусмотреть в любом варианте аффинной хроматографии. Дело в том, что при хранении идет медленный гидролиз связей лигандов с матрицей, приводящий к освобождению, или подтеканию , лигандов ( leakage , bleeding ). Это явление опасно не уменьшением емкости сорбента (на доли процента), а тем, что перешедшие в раствор молекулы лиганда могут оказаться на два-три порядка более активными в отношении связывания вещества, чем иммобилизованные молекулы. Это создает ситуацию конкурентной элюции в тот момент, когда должна происходить посадка вещества на сорбент. Результатом такой ситуации может оказаться заметное уменьшение и даже полное отсутствие задержания вещества на сорбенте. Подтекание лигандов может происходить не только за счет отрыва их ковалентно связанных молекул от матрицы, но и в результате постепенной десорбции тех молекул лиганда, которые не были отмыты после посадки его на матрицу. [c.410]

Для связывания белков наиболее часто используют такие группы молекулы белка, как N-концевая а-аминогруппа и s-ами-ногруппа лизина, а также С-концевая карбоксильная группа и карбоксильные группы глутаминовой и аспарагиновой кислот. Фенольные гидроксильные группы тирозина или SH-группы остатков цистеина могут также принимать участие в связывании. В углеводах и их производных чаще всего в связывании принимают участие гидроксильные и аминогруппы, в нуклеиновых кислотах — фосфатные группы, гидроксильные группы сахара и амино- или енольные группы оснований. Высокомолекулярные соединения, которые обладают большим числом групп, способных связываться, присоединяются несколькими участками. Вследствие этого значительно уменьшается риск отщепления связанной молекулы, однако многоточечное связывание может приводить к деформации нативной структуры иммобилизованной молекулы и таким образом изменять ее свойства. Иногда применяют методы более лабильного связывания, например через тиолсложноэфир- [c.231]

Липофильность молекулы не абсолютно необходима, что можно доказать токсичностью ионов серебра, меди ж ртути, не говоря уже о многих гидрофильных органических молекулах. Пестицид, растворенный в жире тела, настолько иммобилизуется, что не представляет большой опасности для здоровья, как показано опытами по скармливанию ДДТ людям и домашним животным. До тех пор, пока поглощение происходит на ничтожных уровнях, вещество отделяется в жир при постоянном уровне, а остаток обезвреживается и выделяется. Иммобилизованные молекулы находятся вне массы токсина, исключая две ситуации. Если животное внезапно переходит на голодную диету, может стать заметным ироявление токсичности. Кроме того, как мы все знаем, может происходить усиление действия, когда носитель (жир) поглощается в пищевой цепи, где конечным потребителем являются холоднокровные животные или птицы, как это бывает у некоторых форм хищных животных. [c.135]

Тот факт, что движущей силой образования ионных комплексов являются энтропийные эффекты, был весьма неожиданным. Скорее можно было думать, что они неблагоприятны для этого процесса, так как комплекс безусловно обладает меньшей трансляционной свободой, чем отдельные ионы. Тем не менее полученные результаты можно объяснить на основе простых качественных представлений о воде. Ионы легко сольватиру-ются благодаря сильным ион-дипольным взаимодействиям с молекулами воды. При формировании ионных пар освобождаются высокоупорядоченные и иммобилизованные молекулы воды, что увеличивает беспорядок или конфигурационную свободу растворителя. Это приводит к значительному росту общего изменения энтропии, связанного с образованием ионного комплекса. Нарушение энергетически выгодных взаимодействий ионов с водой объясняет, кроме того, положительное изменение энтальпии, связанное с образованием комплекса. [c.270]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология