Сефадекс свойства

Благодаря перечисленным выше свойствам сефадексы интенсивно используются при изучении структуры белков. Чаще всего их применяют для разделения белков в зависимости от молекулярного веса, для очистки белковых фракций, для концентрирования разбавленных растворов белка и для обессоливания белковых препаратов. [c.24]

В то же время трудно найти материалы, посвященные анализу общей зависимости хроматографической подвижности от строения гетероциклических соединений. В отдельных работах исследовали гелевую хроматографию на сефадексе ряда индолов по сравнению с аналогичными ароматическими соединениями [6]. Было показано, что в случае карбоновых кислот природа. колец и заместителей в ядре оказывает слабое влияние на хроматографическую подвижность. Наоборот, строение алифатической части молекулы соединений гетероциклического и ароматического рядов в большой степени влияет на адсорбционные свойства у карбоксилсодержащих производных и в меньшей степени сказывается у аналогов с аминогруппой. Показано также, что копланарность молекулы приводит либо к исключению ионов, т. е. к ионной эксклюзии, либо к увеличению сорбции, что связывают с электронодонорными свойствами заместителей. Исследовалось влияние на адсорбируемость ароматических соединений карбокси- и нитрогрупп [7], а также влияние окси- и метоксигрупп на хроматографическую подвижность фенолов и индофенолов [6]. [c.111]

Колоночную хроматографию применяют для выделения органических соединений фосфора из реакционных смесей в ходе синтеза или при исследовании реакций с соединениями иных классов. Конкретные условия хроматографирования зависят от структуры исследуемых веществ и от состава смеси. В органической химии обычно используют твердо-жидкостную хроматографию, в биологической химии — ионообменную. Разделение фосфорорганических соединений осуществляется при помощи обычных приемов. Однако свойства этих соединений разли чаются в широких пределах, поэтому в каждом конкретном случае необходимо подбирать оптимальные условия эксперимента. Примеры применения колоночной хроматографии для разделения соединений этой группы приведены в табл. 42.1. Коэффициенты распределения фосфатов инозита на сефадексах приведены в табл. 42.2. [c.161]

Предварительное фракционирование с помощью полиакриламидного геля дает такие же результаты, как и гель-фильтрация на сефадексе. В отличие от природного декстранового геля, каким является сефадекс, полиакриламидный гель представляет собой гель синтетического полимера, обладающий чрезвычайно малыми абсорбционными свойствами. Поэтому разделение на полиакриламидном геле можно провести практически без потерь фракционируемого материала. Молекулярный вес фракционируемых веществ также очень существен для разделения на полиакриламидном геле. Чем ниже молекулярный вес компонентов разделяемой смеси, тем меньше индекс биогеля, который целесообразно использовать для фракционирования. [c.228]

Свойства и применение ионообменных целлюлоз и сефадексов [c.154]

Во влажном состоянии при нейтральных значениях pH сефадек-сы можно стерилизовать при температуре 110°. В сухом виде они выдерживают нагревание до 120°, однако при более высокой температуре начинается карамелизация. О сорбционных и ионообменных свойствах сефадексов было сказано выше. Добавим, что окисление кислородом, содержащимся в элюенте, приводит к появлению новых карбоксильных групп и постепенному усилению ионообменных свойств сефадекса, поэтому водные элюенты следует деаэрировать. Сильные окислители разрушают сефадексы степень их устойчивости к действию кислот и щелочей рассмотрена в гл. 2. Сефадексы не растворяются в органических растворителях, хотя и набухают во многих из них (особенно хорошо — в формамиде и диметилсульфокси- [c.116]

Механические свойства сефадексов двух категорий пористости тоже сущ ественно различаются (рис. 115). Легко видеть, что для сефадексов А-25 и С-25 скорость течения вплоть до 60 мл/см -ч почти ли- [c.274]

Из-за абсорбционных свойств сефадекса выход материала при фракционировании гидролизатов белка обычно равен 55— %. [c.227]

В ТСХ используются также иониты на основе сефадексов — сшитых декстранов. Это диэтиламиноэтил-, сульфоэтил-, карбокси-метил- и фосфоэтил-сефадекс. Они одновременно сохраняют свойства молекулярных сит. Поэтому для разделения пептидов и белков с молекулярной массой до 30 000 применяют сефадексы марок 25 , обладающие в несколько раз меньшим удельным объемом, чем сефадексы марок 50 , применяющиеся для разделения белков с молекулярной массой до 200 ООО. [c.131]

В качестве сорбентов для получения незакрепленного слоя применяют тонкодисперсный силикагель, тонкогранулированную целлю- иозу с добавкой небольшого количества сефадекса или крахмала для усиления гидрофильных свойств, что важно для сохранения влажности и улучшения прилипания слоя к подложке. [c.364]

A. Ахунову и Д. H. Сахибову (1963, 1970) удалось получить гомогенную протекназу из яда гюрзы, причем, на последней стадии очистки (сефадекс Г-75 и ДЕАЕ-целлвдлоза) фермент обладал активностью, в 18 раз превышающий активность протеиназ цельного яда. Молекулярный вес энзима при гель-фильтрации через сефадекс Г-100 35000—37000. Полученный фермент по своим свойствам близок к трипсину, причем подавление его активности ДФФ (5.10 Щ) указывает на важную роль серина в механизме действия энзима. [c.87]

Сефакрилы. Структура, а также химические и адсорбционные свойства материала этих матриц (декстран, сшитый метиленбисакри-ламидом) были описаны выше. Главным его достоинством — по сравнению с сефадексом — является жесткость, благодаря чему гель-фильтрацию на сефакрплах, в том числе на крупнопористых, можно вести при относительно больших скоростях элюции. [c.117]

Этот выбор диктуется характером задачи, которая решается гель-фпльтрацией, и свойствами разделяемых молекул, в первую очередь их массами. Для обессоливаиия раствора макромолекул естественно использовать жесткие, достаточно мелконористые матрицы с крупными гранулами (последнее — для увеличения скорости течения), например сефадекс С-25 или биогель Р-б. Для обессоливания более мелких молекул можно воспользоваться сефадексами С-10 и С-15 или биогелями Р-2 и Р-4. Названные матрицы удобны и для смены буфера, в котором первоначально находится препарат, на тот, которым уравновешена колонка и производится элюция, или для освобождения биополимеров от радиоактивных низкомолекулярных предшественников. Близка к описанным н задача рассортировки смеси на две группы веществ — высокомолекулярных и низкомолекулярных (например, отделение белков от пептидов или нуклеиновых кислот от белков). Здесь, очевидно, следует вы- [c.133]

Наилучшими свойствами для эксклюзионной хроматографии биополимеров обладают TSK-гели типа SW. Поверхность этих материалов покрыта гидрофильными ОН-грутопами по особой технологии, обеспечивающей исключительную инертность сорбента, практически не уступающую сефадексу. Поэтому эксклюзионное разделение, как правило, не осложняется побочными сорбционными процессами. ТЗК-гели SW выпускают с тремя размерами пор и они перекрывают диапазон молекулярных масс от 5 10 до 4 10 (по декстрану) или до 10 (по глобулярным белкам). За счет большого объема пор колонки, с этими гелями характеризуются высокой разделительной способностью, а их гарантированная эффективность составляет 16 тыс.т.т./м. Калибровочные кривые для некоторых модифицированных жестких сорбентов приведены на рис. 4.11. [c.109]

Наиболее известные, образующие сетку формы декстрана поставляются в торговлю под названием сефадекс фирмой Pharma ia (Швеция). Это гели с разными размерами пор, обладающие очень выгодными свойствами для молекулярного процеживания благодаря очень малому содержанию в них карбоксильных групп. Гели сефадекса G 10, G 15, G 25, G 50, G 100 и G 200 можно применять только с водными растворителями. Кроме того, эти гели довольно чувствительны к развитию микроорганизмов. [c.74]

Эти ионообменники получают на основе носителей для гель-фильтрации - поперечно-сшитых декстранов (сефадекс) или агароз (сефароза СЬ, биогель А). Они обладают свойствами ионообменников и гель-фильтрующих материалов и гораздо меньшей обменной емкостью к молекулам, превышающим по своим размерам предел эксклюзии ионообменника в условиях эксперимента. Из-за наличия заряженных групп степень набухания таких смол и, следовательно, предел эксклюзии варьируют в зависимости от pH и ионной силы (нехарактерным для гель-фильтрующих материалов образом). [c.437]

Лецитины яйца были достаточно хорошо отделены от нейтральных липидов. Киселев [86] фракционировал липиды, содержащиеся в тканях мозга, на сефадексе LH-20. В смеси хлороформ—метанол (2 1) сефадекс вел себя как слабоосновный анионит, так что фосфолипиды разделялись в соответствии с их основными свойствами. Однако в смеси хлороформ—метанол— вода (65 35 8) сефадекс выступает в роли молекулярного сита, и поэтому вещества разделялись согласно их молекулярным массам. Использование метилированного сефадекса рассмотрено в обзоре [87] сефадекс G-25 был метилирован так, чтобы содержать 40% метоксигрупп липиды элюировали смесью хлороформ—метанол—вода (85 85 30). При этих условиях фосфолипиды элюировались в первой фракции наряду с липопептидами и глиголипидами. DEAE-целлюлоза оказалась полезна для фракционирования кислых липидов, содержащихся в Es heri hia соИ [88]. Фосфолипиды успешно были выведены также с помощью гель-хроматографии на сефадексе LH-20 [77, 89]. [c.208]

Фирма Pharma ia (Швеция) выпускает 18 типов сефадексов (без ионообменных свойств), которые отличаются друг от друга частотой поперечных сшивок. Важнейшие свойства сефадексов приведены в табл. 2. Символ, указывающий тип сефадекса (G-25, G-50 и т. д.), обозначает пористую структуру (G) и величину поглощения воды на грамм сухого веса сефадекса, т. е. указывает частоту поперечных сшивок декстрана. У сефадексов с высоким значением индекса цифра указывает нижний предел молекулярного веса веществ (в тысячах), не проникающих внутрь гранул геля. Например, вещества с молекулярным весом меньше Д00 ООО могут проникать внутрь гранул сефадекса G-100, тогда как вещества с более крупными молекулами выходят в свободном объеме раствора. [c.24]

Если колонку предполагается использовать в течение длительного времени, желательно суспендировать сефадекс в буферном растворе, содержащем мертиолат, фенол или толуол, для предотвращения бактериального роста. Сефадексы можно стерилизовать в автоклаве (при 110 С в течение 40 мин) без нарушения их свойств. [c.223]

В последние годы все большее распространение получает хроматографическое разделение веществ по их молекулярному весу, причем первое место среди таких вариантов хроматографии принадлежит гель-фильтрации на сефадексах . Сефадекс представляет собой полусинтетический -сорбент полисахаридной природы, гранулы которого обладают порами определенного размера, так что диффузия внутрь этих гранул возможна только для молекул, величина которых не превышает величину пор. Поэтому сефадекс работает как своего рода молекулярное сито , задерживающее проникающие внутрь гранул низкомолекулярные вещества и не задерживающее полимеры. Гель-фильтрация незаменима для быстрого отделения полимера от низкомолекулярных примесей (неорганических солей, мономеров и т. д.). Ее применяют и для разделения полимеров, причем одновременно можно приблизительно оценить их молек лярный вес, так как существует набор сефадексов, различающихся величиной пор. Есть все основания полагать, что в химии полисахаридов этот перспективный метод будет находить все большее применение. Особенно интересным является использование сефадексов для разделения высоко- и низкомолекулярных осколков, образующихся при расщеплении биополимеров различными реагентами , и для выделения полисахаридов из различных природных источников Хроматография на модифицированных сефадексах, обладаюш.их ионообменными свойствами, например на диэтиламиноэтилсефадексе, также может служить эффективным приемом фракционирования полисахаридов . [c.487]

Все применяемые в гель-хроматографии наполнители колонок традиционно делят на мягкие, полужесткие и жесткие гели [101]. Емкость геля может быть охарактеризована отношением У /У , которое лежит в диапазоне от 0,5 для жестких гелей до 2-3 для мягких гелей. Для мягких гелей характерна, с одной стороны, высокая эффективность и емкость при низких скоростях потока, с другой — высокая степень набухаемости в водных средах и увеличение объема пор при набухании. Соответственно повышение скорости подвижной фазы вызывает деформацию мяг-Ю1Х гелей. Они сжимаются, снижается их емкость. Из коммерческих мягких гелей для гель-фильтрации чаще всего применяют декстрановые гели, названные сефадек-сами. Сефадексы — гранулированные поперечно-сшитые декстраны (полисахариды), имеющие в набухшем состоянии гелевую структуру, обладают сильными гидрофильными свойствами. Неионообменные сефадексы содержат все же небольшое количество гидроксильных групп, определяющих адсорбционную емкость сефадексов порядка [c.209]

В качестве примера на рис. 2.1—2.3 приведены кривые гель-фильтрации некоторых полисахаридов ГМЦ, полученные ири ис-иользовании различных носителей [150, 189, 213]. Большой интерес представляют ДЭАЭ-сефадексы, сочетающие свойства молекулярных сит и анионитов [186]. [c.49]

Сефадекс состоит из молекул декстрана, образующих сетчатую структуру, в сухом состоянии он представляет собой тонкий порошок, сильно набухающий в воде и образующий при этом полупрозрачный гель, которым заполняют хроматографическую колонку, подобно тому, как это делают в случае окиси алюминия. Полярные свойства следует отнести почти исключительно на счет содержания гидроксильных групп. Увеличение степени сетчатости приводит к уменьшению пористости трехмерной решетки, в результате чего поглотительная способность зависит от размера молекул. Молекулы меньших размеров поглощаются в большей степени и поэтому при фильтрации через гель движутся медленнее больших молекул. [c.409]

Свойствами молекулярного сита обладают многие пористые материалы. Наиболее часто для этой цели применяют органические полимеры с трехмерной сетчатой структурой Например, гели полисахарида декстрана (коммерческое название — сефадексы). При изготовлении [c.28]

Избирательность различных материалов, используемых для гель-фильтрации, позволила использовать их в других методах разделения. Так, гели сефадексов применяются в адсорбционных методах, тонкослойной и распределительной хроматографии, а также в качестве носителя при зонном электрофорезе. Сефадексы с ионообменными свойствами (диэтил-, аминоэтил-, карбоксиметил-, сульфоэтнлпроизводные декстранового полимера) обладают одновременно преимуществами ионообменных смол и материалов на основе целлюлозы. [c.478]

Та же фирма выпускает ионообменники на основе сефадексов диэтпламиноэтил(ДЭАЭ)-, сульфоэтил-, карбокси-метил-, фосфоэтилсефадекс. Ионообменники на основе сефадексов сохраняют свойства молекулярных сит. Так, ДЭЛЭ-сефадекс А-25 применяют при молекулярном весе меньше 10 ООО, а тип А-50 — при значительно большем молекулярном весе [61]. [c.19]

Индолы с кислотными свойствами разделяли также в виде метиловых эфиров элюированием в градиенте [117]. Этот вид хроматографии в сочетании с ТСХ ( -гексан— -бутанол, 3 1) служит удобным методом получения очень чистых образцов индолов, которые можно непосредственно анализировать методом газожидкостной хроматографии. Хорошие результаты по разделению кислотных и нейтральных производных индоламина получены на сефадексе LH-20 в системе 1,2-дихлорэтан—метанол [118]. Для изучения метаболизма соединений этого ряда in vitro и in vivo и для выделения продуктов обмена применяют следующий метод. [c.139]

Как уже отмечалось, иониты на основе целлюлозы и декстрана не обладают необходимыми механическими и ионообменными свойствами и вследствие этого их редко используют для хроматографического разделения аминокислот. Карбоксиметилцеллюлозу применяли для отделения лизина от его олигомеров и полимеров [26]. Известны попытки модификации DEAE-и QAE-сефадексов путем введения дополнительных поперечных связей и применения их для разделения цистеина и глутатиона [27]. Использование дауэкса 1-Х8 и сефадекса G-10 означает переход от ионообменной хроматографии к гелевой [28]. [c.334]

Разделение цистеина и производных глутатиона на смешанном носителе (дауэкс-1-Ь сефадекс G-10) осуществлялось благодаря сочетанию молекулярно-ситового эффекта и ионного обмена [28]. За счет аналогичных свойств матрицы разделяли аминокислоты и их динитрофенилпроизводные на сшитых DEAE-сефадексах [27]. [c.349]

При фракционировании белков обычно применяют иониты, содержащие карбоксиметильную и диэтиламиноэтильную функциональные группировки, однако эти иониты не вполне подходят для разделения пептидов. Как правило, почти все кислотные пептиды адсорбируются на катионите при pH 3,0—3,5 в буфер ном растворе с низкой ионной силой, откуда могут быть элюи рованы при рн 6—9 и при более высокой ионной силе. Карбо ксилсодержащие иониты слабо диссоциированы при pH 3, и следовательно, обладают пониженной емкостью. Кроме того в разбавленных электролитах, т. е. в условиях проведения сорб ции, слишком велика буферная емкость ионита. Скачкообразное изменение pH элюента приводит на практике к одновременному элюированию группы пептидов. Аналогичные недостатки свойственны ионитам с ВЕАЕ-группой, особенно при работе с летучими буферными растворами. Изменение ионной силы и значения pH во время элюирования вызывает сжатие столбика сорбента, нарушение скорости потока и искажение профиля элюирования. В наибольшей степени этот эффект выражен у ионитов на основе слабосшитых гелей, однако в какой-то степени это свойство характерно и для модифицированных целлюлоз. И тем не менее некоторые типы ионитов на основе целлюлозы находят применение для разделения небольших пептидов. К ним относятся фосфоцеллюлоза, ЗЕ-целлюлоза, 8Р-целлюлоза и РАЕ-сефадекс. [c.411]

При предварительном фракционировании природных препаратов удобно разделять индолы на кислые, основные, нейтральные и амфотерные фракции. Эффективным методом фракционирования индолов является ионообменная хроматография [116]. Смесь индолов последовательно пропускают через смолу дауэкс 50 [( 2Hs)3N+], удерживающую соединения с основными и амфотерными свойствами, затем через сефадекс А-25 (в ацетатной форме), который адсорбирует соединения, обладающие кислыми свойствами, и в элюате получают нейтральную фракцию. Основные и амфотерные индолы элюируют триэтиламином и далее разделяют на смоле дауэкс 1 (НСОО ). Индолы с кислотными свойствами элюируют уксусной кислотой или ацетатом аммония. [c.139]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология