Протеазы нейтральные

Некоторые соединения этого тнпа ингибируют нейтральную протеазу, найденную в ревматической синовиальной жидкости, и поэтому могут иметь в перспективе возможность применения в качестве противоревматического средства [521]. [c.378]

Выходные патрубки насосов 5 и 7 могут быть расположены в соответствующих резервуарах таким образом, чтобы обеспечить наиболее полное удаление материалов, находящихся на полимерной основе пленки. Экспериментально было установлено, что при использовании в промывном резервуаре 2 энзимов из семейства протеазы они обеспечивают удовлетворительное протекание процесса при поддержании величины pH = 5-ь9, предпочтительно в интервале 6,5—7,5. Чем ближе реакция раствора к нейтральной, тем выше эффективность процесса. В связи с этим особенно предпочтительным интервалом для величины pH является 6,8—7,2. Помимо протеазы для проведения процесса с удовлетворительными результатами Могут быть использованы энзимы семейства амилазы и липазы. Энзимы этих трех семейств могут применяться как по отдельности, так и в любых комбинациях друг с другом. [c.321]

Рис. 10.2. Влияние pH на адсорбцию нейтральной протеазы на сефарозе

Проферменты аспартатных протеаз животных устойчивы в нейтральной и слабощелочной среде и претерпевают автокаталитическую активацию при понижении pH среды до 2-4 [22341. При этом в конечном счете отщепляется около 40 аминокислотных остатков с N-конца молекулы зимогена. [c.209]

Однако гидролиз пептидных связей в белках может происходить и при нормальных условиях — комнатной температуре, нейтральных значениях pH. Это является результатом работы протеаз — ферментов, созданных природой для деградации других белков в мягких условиях. Поскольку в любых (даже высоко-очищенных) препаратах белков могут находиться протеазы в качестве сопутствующих примесей, при изучении механизмов инактивации необходимо учитывать и возможность протеолиза. ф Другим примером протеолитической инактивации может служить бактериальное заражение реакторов, содержащих ферменты. Случайно попавшие в реактор клетки микроорганизмов [c.121]

При высоких pH переход ацильной группы 0->-М к имидазо-лид-аниону происходит по нуклеофильному механизму. Последующий гидролиз ацилимидазольного промежуточного производного происходит благодаря тому, что скорость гидролиза пре-выщает скорость термодинамически невыгодного перехода N- 0. Такая модель действительно имеет определенную аналогию с действием сериновых протеаз, хотя механизмы сходны лищь при нейтральных pH. Однако введение карбоксильной группы приводит к более точной аналогии системы с переносом зарядов [c.227]

Важную и существенную модификацию этого типа технологии непрерывного гидролиза растительных белков недавно предложили Аду-Аманква с соавторами [2]. Так, гидролиз соевых белков под действием протеазы, выделенной из Peni illum duponti и иммобилизованной на мембране коллагена в рециркуляционном реакторе, позволил получить гидролизат с высокой пенообразующей способностью и нейтральным вкусом, легко поддающийся взбиванию и разбавлению. Было предложено использовать этот продукт для производства напитков и пищевых продуктов, обогащенных белком. [c.609]

Как и любые живые клетки, микроорганизмы — бактерии, дрожжи и плесневые грибы, обладают ферментирующими свойствами но их активность и специфичность различны. Некоторые поступающие в торговлю кислые, нейтральные и щелочные протеазы получают из микроорганизмов (14, 29, 127]. Такие микроорганизмы были идентифицированы на растительных источниках, включая сою, пшеницу, рапс. Однако протеазы этих микроорганизмов до сего времени использовались очень мало. Лазарусу и Кобургеру [69] удалось, например, идентифицировать 41 штамм протеолитических дрожже(1, выделенных из проб мяса и [c.613]

Крупномасштабное производство приходится в основном на такие гидролазы, как протеазы и гликозидазы. Различают три категории про-теаз — сериновые, кислые и металлопротеазы. Первые термостабильны, оптимум pH для них выше 8,0. Поэтому сериновые протеазы широко используются в моющих средствах. Металлопротеазы с оптимумом pH в нейтральной зоне (6,5-7,5) применяются в пищевой промышленности. Основными продуцентами этих ферментов являются бациллы, в то время как основными продуцентами кислых протеаз являются различные виды низших грибов [24]. [c.125]

Рпс. 4.10. Разделение кислой и нейтральной протеаз на биосорбенте Биокарб-Т (ступенчатое элюирование фосфатным буферным раствором с pH 4.9—7.5). [c.166]

Согласованный механизм очень маловероятен, если в качестве катализатора выступают органические молекулы небольшого размера. Для его осуществления обычно необходимы достаточно больщие молекулы, располагающие полостями или дырками, струмтурно соответствующими эфирам или амидам. Этим требованиям полностью отвечают гидролитические ферменты, идеально работающие в нейтральных условиях (pH 7) со скоростями большими, чем при катализе сильными кислотами и основаниями. Белки быстро гидролизуются при pH 7 под действием гидролитических ферментов, называемых протеазами. Высокая эффективность действия этих ферментов объясняется тем, что гидролизуемая амидная связь подвергается одновременному действию близко расположенных кислотных и основных центров белка. В качестве примера действия фермента на рис. 48 показан гидролиз ацеталь-ной связи, катализируемый лизоцимом [ 5]. Специфический субстрат (тетрасахарид) комплементарен полости активного центра фермента и фиксируется в ней за счет нескольких пространственно ориентированных водородных связей. Вода, проникающая в активный центр этого [c.135]

Естественный гидрофобный участок молекулы NA достаточно вытянут для того, чтобы проткнуть липидный бислой вируса ИЛИ клетки. Он расположен возле N-конца и состоит из 29 остатков,. 18 из которых гидрофобные, а 11 — нейтральные и незаряженные. Только на основании информации о последовательности было сделано оригинальное предположение, что NA вставлена в мембрану своим N-концом [74] это подтверждено сейчас исследованиями последовательности белка в интактных и расш епленных протеазой молекулах- головках [30]. Таким образом, NA ориентировочно, похожа на два других гликопротеида — аминопептидазу краевой щеточки кишечника и изомальтазу [39, 165] — по наличию растянутой сигнальной последовательности [27, 78], которая не расщепляется и не только переносит белок через мембрану, но и остается в бислое, закрепляя белок. Данные по секвенированию белка указывают также на то, что N-терминальный метионин не удален [30]. Это обстоятельство представляет собой необычное явление. [c.51]

А известна для карбоксипептидазы А и термолизина. Более низкое разрешение достигнуто для карбоксипептидаз Б и Т и для нейтральной протеазы ВасШиз сегеиз. Как уже отмечалось выше, в первичной структуре карбоксипептидаз и термолизина наблюдается очень мало сходства. Пространственные структуры этих ферментов также сильно различаются [1292]. Термолизин по классификации вторичных структур относится к группе а+р, а карбоксипептидаза А - к группе а/р. Оба фермента заметно отличаются даже по размерам молекул, хотя у них близкие молекулярные массы. Карбоксипептидаза А имеет почти сферическую [c.82]

По-видимому, довольно специфически действуют ионы Ка и на активность нейтральной протеазы из гипофиза быка [805] и на активность щелочной протеазы из мышц карпа [197J, ингибируя эти ферменты. [c.222]

Интересно сравнение параметров активации для термоустойчивого термолизина и близкой ему, но существенно более лабильной нейтральной протеазы Ba illus зиытв. Последняя имеет значительно большую энтальпию активации (по и менее отрицательную энтропию, чем термолизин, что, по-види- [c.231]

Аналогичная система была постулирована [1231,1240,3063,3172] для многих других сериновых протеаз. В такой системе заряд с кapбoк ильнo групш может быть перенесен в нейтральной среде на сериновый гилроксил, и последний приобретает весьма высокую нуклеофильность. [c.307]

У аспартатных и металлзависимых протеаз соотношение скоростей гидролиза эфир-амид близко к единице. Это трактовалось [3342] как свидетельство превалирующей роли электрофильного катализа (т.е. протонирования карбонильного углерода и координации с металлом) у этих типов ферментов. Следует отметить, что и у цистеиновых протеаз соотношение Вклад электрофильного катализа в этом случае невелик. Возможно, что, по крайней мере в случаях аспартатных и цистеиновых протеаз, отсутствие заметных различий в скоростях гидролиза эфиров и амидов объясняется, если не полностью, то частично, меньшей разницей в свободных энергиях гидролиза этих субстратов при более кислых значениях pH (см. рис.28). Следует отметить, что существуют амидгидролазы, функционирующие в нейтральной среде и совсем не имеющие эстеразной активности. Различие в поведении эфирных и амидных субстратов карбоксипептидазы А может быть обусловлено различиями в характере определяющей скорость стадии многостадийного процесса гидролиза [31391. [c.345]

Высушивание ферментных препаратов прои пюдится в вакууме при распылении или из замороженного состояния. После высушивания препарат в случае нестойкости необходимо смешивать со стабилизатором или с наполнителем (крахмал, декстрины, неорганические нейтральные соединения, тальк и др.). В некоторых случаях удается стабилизировать фермент добавлением в культуральную жидкость хелатирующих агентов. Так удалось стабилизировать щелочную протеазу Вас. subtilis [c.371]

Одной из основных целей генно-инженерных работ на бациллах является создание векторов, способных экспрессировать чужеродные гены и секретировать в окружающую среду продукты этих генов. С этой целью чужеродный ген помещают за участком ДНК, кодирующим сигнальную последовательность хорошо экспрессируемого и секретируемого бациллярного белка. Наглядными примерами такого подхода служат работы по секреции человеческого интерферона а2 под контролем регуляторных элементов и сигнального пептида а-амилазы или человеческого -интерферона под контролем промотора и регуляторной области нейтральной протеазы Вас. amyloliquefa iens (см. гл. 4). Во всех случаях наблюдается секреция чужеродных белков в среду, причем отщепление сигнального пептида осуществляется точно перед чужеродным белком. Из этого следует, что фермент сигнальная пептидаза узнает последовательности сиг- [c.173]

Группой японских авторов описана бациллярная система экспрессии и секреции -интерферона. Клонирование проведено в Вас. subtilis на плазмиде, содержащей регуляторную область и сигнальный пептид гена нейтральной протеазы Вас. amyloliquefa iens. Уровень продукции достигал 10 ед/л, причем 80% активности секретировалось в среду. [c.200]

В стерильной чашке Петри удаляют почечную капсулу, а затем ткань измельчают скальпелем. Полученный гомогенат переносят в небольшие конические флаконы с 10 мл среды, содержащей 1,25 ед./мл диспазы (нейтральной протеазы). [c.261]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология