Загрязнение ферментов бактериальное

На рис. 6.10 приведены принципиальные схемы биофильтра и аэротенка. В процессе очистки сточных вод микроорганизмы активного ила и биопленки, контактируя с органическими веществами, разрушают их при помощи большого количества ферментов, состав которых еще недостаточно изучен. Для создания протоплазмы клетке нужны биогенные элементы — углерод, водород, кислород, азот, фосфор, калий, железо, сера, магний и различные микроэлементы. Многие из этих элементов бактериальная клетка может почерпнуть из загрязнений сточных вод. Недостающие элементы — чаще всего азот, фосфор, калий — приходится добавлять в очищаемую жидкость. [c.349]

Проблемы последующей обработки конечного продукта при синтезе полисахаридов связаны прежде всего с удалением микроорганизмов, что крайне важно, если этот продукт применяется в пищевой промышленности. Для разрушения бактерий используют литические и протеолитические ферменты, что в свою очередь приводит к дальнейшему загрязнению среды,, поскольку при этом добавляется потенциальный субстрат для роста микробов. При удалении бактериальных остатков фильтрованием применяют обработку полимера протеолитическими ферментами при щелочном pH с последующим добавлением кремниевого адсорбента. Во избежание деградации полимера при щелочном pH можно при необходимости подкислять среду. Для осветления растворов полисахаридов их пропускают через иммобилизованные эндоглюканазы, что приводит к незначительному уменьшению вязкости вследствие гидролиза г ико-зидных связей. [c.221]

Аэротенки — огромные резервуары из железобетона, в которых очистка происходит с помощью активного ила из бактерий и микроскопических животных, которые бурно развиваются в этих сооружениях, чему способствуют органические вещества сточных вод и избыток кислорода, поступающего с потоком подаваемого воздуха. Бактерии, склеивающиеся в хлопья, вьщеляют в среду ферменты, разрушающие органические загрязнения. Ил с хлопьями оседает, отделяясь от очищенной воды. Инфузории, жгутиковые, амебы, коловратки и другие мельчайшие животные, пожирая бактерии, не слипшиеся в хлопья, тем самым омолаживают бактериальную массу ила. Сточные воды сначала подвергают механической, а после химической очистке для удаления болезнетворных бактерий путем хлорирования жидким хлором или хлорной известью. Для дезинфекции используют также ультразвук, озонирование, электролиз и другие методы. [c.30]

Нарушение гарантированного "чистого" культивирования биообъекта согласно регламентным условиям сопровождается, как правило, его загрязнением контаминирующей микрофлорой При этом выявление микробов-загрязнителей может быть трудным из-за присутствия единичных клеток, например, бактерий — контаминантов в бактериальных вакцинах, или грибов-контаминантов при культивировании грибов-продуцентов ферментов В равной мере можно ожидать загрязнения на промежуточных стадиях или в конечном продукте бактериальных или грибных токсинов К тому же, обнаружение микробов-контаминантов или их токсинов, как правило, возможно после завершения какой-то стадии биотехнологического процесса, либо в готовом продукте Следует еще подчеркнуть и тот факт, что методы выявления посторонней микрофлоры, к сожалению, в большинстве случаев низко чувствительны [c.276]

Молекулярные веса, полученные таким путем, составляют для яичного альбумина 38 ООО, сывороточного альбумина 74 ООО, гемоцианина улитки 6 340 ООО [57], вируса табачной мозаики 40 ООО ООО [58]. Метод рассеяния света имеет особое значение для белковой химии, так как он позволяет определять молекулярный вес достаточно быстро, чтобы устранить опасность изменений от бактериального загрязнения и от следов протеолитических ферментов. [c.62]

Еще одно важное достоинство кристаллизации это то, что она позволяет сохранять в течение длительного времени очищенные белки. Многие фирмы выпускают ферментные препараты в виде суспензии кристаллов не просто из желания продемонстрировать высокую степень их чистоты, а потому что такие суспензии — это самый надежный метод хранения ферментов (кроме, может быть, глубокого замораживания). Это объясняется рядом причин. Во-первых, молекулы в кристаллах плотно упакованы и потому оказываются иммобилизованными, так что вероятность тепловой денатурации снижается. Далее, трудно себе представить, что протеолитические ферменты, присутствующие в препарате, могут кристаллизоваться вместе с очищенным ферментом или белком (хотя протеазы могут вполне адсорбироваться на поверхности кристаллов). Поэтому в суспензии кристаллов большинство белковых молекул предохранено от протеолитической деградации. И наконец, кристаллизация обычно проводится в условиях высоких концентраций сульфата аммония, что предотвращает бактериальное загрязнение и стабилизирует белковые молекулы. [c.334]

Так, при инкубации бактериальной протеазы при повышенной температуре в присутствии ионов Са + наблюдается сдвиг оптимума pH [1]. Аналогичн >1е сдвиги обнаружены для бычьего трипсина, химотрипсина, амилазы, а также щелочной протеазы из Aspergillus flavus [2]. Эти трансформации, которые служат причиной полиморфизма некоторых ферментов, происходят в незначительной степени и при обычной температуре. Кроме того, всегда имеется опасность автолиза, протеолиза или загрязнения препаратов микроорганизмами. Поэтому, как правило, всю обработку ферментных препаратов следует проводить при температуре около 4°С и по возможности быстрее. [c.7]

Бактерия способна отличить свою собственную ДНК от любой вторгающейся чужеродной именно по типу ее модификации. Различие в модификации делает чужеродную ДНК чувствительной к действию рестрици-рующих ферментов, которые узнают отсутствие метильных групп в соответствующих сайтах. Системы рестрикции и модификации широко распространены у бактерий их сушествование играет важную роль в защите резидентной ДНК от загрязнения последовательностями чужеродного происхождения. Следует отметить, однако, что присутствие системы модификации и рестрикции не обязательно некоторые бактериальные штаммы утратили ее. [c.431]

Тщательный анализ исходных данных, условий эксплуатации сооружений, а также параметров процесса коррозии во всех перечисленных случаях, позволил ученым сделать определенные выводы. Было установлено, что БК зависит от времени года, температурных условий эксплуатации, степени загрязненности и влажности воздуха, а также от содержания в нем озона и живых организмов. Когда отдельные ученые впервые предположили, что к разрушению стальных конструкций причастны бактерии определенного вида, их подняли насмех, обвинив в фантазерстве и некомпетентности. Скептики умолкли лишь после того, как по инициативе ООН была создана международная экспертная комиссия, которая доказала, что металлическая чума, как тогда называли бактериальную коррозию, вызывается мутантами железотворных бактерий. Международная комиссия изучила процесс и механизм этого вида коррозии. Удалось также найти ферменты, вырабатываемые бактериями и вызывающие сам процесс разрушения. Таким образом была создана основа для эффективной борьбы с Б К. [c.190]

Содержащиеся в подземных водах бактерии выполняют большую геохимическую работу, видоизменяя химический и газовый состав вод. Например, аэробные сапрофиты (учитываемые при росте на питательной среде) разлагают легко усвояемые органические соединения белкового и углеводного характера гнилостные бактерии, используя белковые вещества, образуют НгЗ и Нг денитрифищ1рующие бактерии восстанавливают нитраты до газообразного азота, а нитрификаторы окисляют аммиак до нитратов и нитритов тионовокислые бактерии окисляют тиосуль-фаты или H2S до серной кислоты и т. д. Продуктами метаболизма бактерий могут быть также токсины, ферменты, антибиотики и др. Следует подчеркнуть, что многие развивающиеся в подземных водах бактерии являются безвредными для здоровья человека и даже участвуют в бактериальной очистке вод от загрязнения. [c.16]

Снижение эффективной активности воды, как правило, бывает полезным для ферментов, если оно осуществляется способами, не оказывающими дестабилизирующего действия на белок. Высокие концентрации сернокислого аммония, при которых фермент осаждается, проявляют сильное стабилизирующее влияние, и фактически большинство ферментов, имеющихся в продаже, представляют собой суспензии в 2—3 М сернокислом аммонии. Кроме того, для сох ранеиия активности ферментов, а также для предотвращения бактериального загрязнения используется 50%-ный глицерин или лиофилизация. Во время очистки ферментов обычно необходимо оставлять фракции на ночь или даже на более длительное время, и в данном случае следует уделять особое внимание оптимизации условий хранения. При фракционировании сернокислым аммонием фермент нужно оставлять в системе, содержащей как можно более высокую концентрацию сернокислого аммония, например в виде осадка, а не раствора, полученного после его повторного растворения. Если нельзя избежать хранения ферментного раствора в отсутствие защитных агентов, то следует оценить относительные преимущества кратковременного замораживания этого раствора или хранения его при температуре около 0°С в присутствии протеолитических ингибитаров. Замораживание может инактивировать ферменты. Чувствительность различных ферментов к замораживанию очень сильно варьирует. Потери всегда будут меньше, если начальная концентрация белка высока. Не рекомендуется замораживать раствор с концентрацией белка ниже чем около 2 мг-мл . Следует помнить, что во время замораживания сначала заме рзает чистая вода, что сопровождается повышением концентрации белка и других растворимых веществ. Затем выпадают в осадок наименее растворимые ве- [c.259]

Если кристаллизацию используют как способ очистки, то все чописанные выше процедуры проделывают гораздо быстрее некоторое избыточное количество сульфата аммония может быть сразу добавлено после центрифугирования, и как только появятся кристаллы (их идентифицируют по появлению муарового блеска при встряхивании), можно еще добавить сульфат аммония. Важно выделить как можно больше фермента, оставив в растворе только минимальное его количество, хотя всегда имеется опасность, что при дальнейшем добавлении сульфата аммония начнет выпадать какая-нибудь примесь. Вторая кристаллизация позволяет избавиться о г следовых количеств примесей. Вследствие того что концентрация примесей с каждым циклом снижается, для их осаждения нужен все более высокий уровень содержания сульфата аммония, тогда как для кристаллизации очищаемого белка этого не требуется. Из-за стабилизирующего влияния сульфата аммония время, необходимое для проведения кристаллизации, не является критическим, лимитирующим, фактором (ср. разд. 7.1). Однако если кристаллизация проводится при низкой ионной силе, длительность процесса должна быть минимальной, чтобы избежать опасности протеолиза или бактериального загрязнения. [c.336]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология