Фракционное осаждение полисахаридов

В качестве осадителя чаще всего пользуются этиловым спиртом. При концентрации спирта порядка 80% большинство полисахаридов выпадает в осадок, а низкомолекулярные примеси остаются в растворе. Постепенно прибавляя спирт и выделяя осадки, выпадающие при повышающихся концентрациях спирта, удается провести фракционное осаждение полисахаридов. Сравнение свойств и моносахаридного состава фракций является важным критерием для суждения о гомогенности полисахаридов. [c.53]

Одной из самых важных и трудных стадий в исследовании полисахаридов является их очистка и фракционирование с целью получения более или менее однородных индивидуальных веществ. До настоящего времени разделение проводилось главным образом фракционным осаждением производных полисахаридов в органических растворителях или избирательным осаждением из водных растворов различными электролитами [1, 2]. Из-за отсутствия подходящих адсорбентов хроматография полисахаридов не достигла больших успехов. Введение в практику Соберем и сотр. [3, 4] ионообменников на основе целлюлозы для колоночной хроматографии белков и нуклеиновых кислот привело к появлению новых адсорбентов, весьма удобных для разделения высокомолекулярных растворимых в воде веществ. [c.268]

ФРАКЦИОННОЕ ОСАЖДЕНИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ ЧЕТВЕРТИЧНЫМИ АММОНИЕВЫМИ ОСНОВАНИЯМИ [25] [c.42]

Смеси полисахаридов обычно разделяют на компоненты фракционным осаждением органическими растворителями из водных растворов (см. стр. 285). Во многих случаях можно добиться хорошего разделения, хотя обычно необходимо переосаждение фракций. Если же компоненты незначительно различаются по растворимости или если доступно лишь небольшое количество материала, фракционное осаждение редко дает желаемые результаты. Даже при значительном различии в растворимости выход чистых фракций часто мал. [c.264]

Для фракционирования полисахаридов в виде четвертичных аммонийных (Р1Ч+) солей используют два различных подхода а) фракционное осаждение при возрастающих концентрациях амина и б) фракционное осаждение в присутствии различных концентраций неорганических электролитов. [c.290]

Простое осаждение не приводит к разделению смесей полисахаридов. Чтобы отделить полисахариды друг от друга, проводят фракциони- [c.483]

Р-римые П. можно осадить из водных р-ров смеишваю-щимися с водой орг. р-рителями (напр., этанолом, метанолом, ацетоном). Р-римость конкретного П. определяет методику выделения его из прир. объекта. Так, целлюлозу и хитин получают, отмывая подходящими реагентами все сопутствующие в-ва, тогда как прочие полисахариды вначале переводят в р-р и вьщеляют затем фракционным осаждением р-рителями, с помощью образования нерастворимых ко.мплексов или солей, ионообменной хроматографией и т.д. [c.22]

В качестве осаднтелей полисахаридов ГМЦ из растворов используют смешивающиеся с водой органические растворители, соли четвертичных аммониевых оснований с длинноцепочечными радикалами, различные комилексообразователи [198]. Осаждение полисахарида сопровождается частичным удалением из него сопутствующих низкомолекулярных веществ и является одним из этапов его очистки. Наиболее распространенным приемом является осаждение полисахаридов ГМЦ этиловым спиртом. Постепенно увеличивая его концентрацию в растворе, можно осаждать ГМЦ фракционно. Обычно по достижении концентрации спирта 807о больщинство полисахаридов выпадают в осадок, а низкомолекулярные примеси остаются в растворе. [c.46]

В современных методиках выделения ДНК (обзоры — см. ) основной стадией является обычно экстракция биологического материала фенолом 9. При этом ДНК после разделения слоев переходит в водный слой или остается в виде осадка в интерфазе, а большая часть белка денатурирует и переходит в фенольный слой. Для удаления белка из препаратов ДНК используют также обработку детергентами смесью хлороформ — изоамиловый (или октиловый) спирт а также инкубацию с протеолитическими ферментами, например с проназой РНК отделяют от ДНК фракционным осаждением спиртом и обработкой препарата рибонуклеа-зами. Большая часть полисахаридов обычно удаляется при фракционном осаждении этанолом или изопропанолом в некоторых случаях приходится применять дополнительную очистку (экстракция метилцеллозольвом, фракционирование цетавлоновых солей, электрофорез). [c.29]

Аналогичные результаты были получены при изучении состава полиоз древесины различных лиственных пород и стеблей однолетних растений. Существование подобного смешанного полисахарида в различных растениях нельзя было до последнего времени считать бесспорно доказанным, так как обычно в качестве единственного довода приводилась ссылка на химический состав продуктов, экстрагируемых щелочью из древесины, и на невозможность разделения этой смеси путем фракционного осаждения или растворения. Эти аргументы явно недостаточны. Однако в более поздних работах получены новые данные, подтверждающие существование смешанного пол.чсахарида, построенного из остатков -ксилозы и -глюкуроновой кислоты. Так, например, при метанолизе ксилана, выделенного из груши, образуется метилированная альдобионовая кислота ( - -глюкуронозидо-й-кси-лоза). [c.525]

Колонки наполняют инертным пористым материалом, таким, как порошкообразная целлюлоза, насыщают раствором, полностью осаждающим все полисахариды смеси, и затем наносят на колонку раствор смеси веществ в подходящем растворителе. При движении вдоль колонки по. ти-сахариды осаждаются на пористом материале. Различные полисахариды вымываются затем из этого осадка за счет ступенчатого или плавного изменения состава элюирующего растворителя. Таким образом, фракционное осаждение заменяется фракционным элюированием. [c.264]

Гемицеллюлозы часто выделяют из растительного материала или делигнифицированного растительного материала экстракцией водными растворами щелочей. При подкислении полученного экстракта 50%-ной уксусной кислотой до pH 4,5 гемицеллюлоза А выпадает в осадок, а в растворе остается гемицеллюлоза Б — гетерогенная смесь полисахаридов, которую можно осадить, прибавив 3 объема спирта. Удобным методом выделения чистых полисахаридов из разбавленного водного раствора гемицеллюлозы Б служит фракционное осаждение нри постепенном прибавлении спирта. [c.285]

Фракционное осаждение, основанное на изменениях концентрации амина, до сих нор выполняется эмпирически. Раствор при достаточно эффективном перемешивании медленно прибавляют к раствору полисахарида. Если образуется осадок, который можно отфильтровать или отцент-рифугировать, его удаляют, а к маточному раствору прибавляют новые количества QN+. Осадки отделяют по мере их образования. Полисахариды, осаждающиеся в первую очередь, имеют наибольшую плотность заряда и более высокий молекулярный вес. Последующие осадки содержат полисахариды с меньптими плотностями заряда и (или) меньншм молекулярным весом. [c.291]

Получение хондроитин-4-сульфата в крупных масштабах основано на экстракции ткани раствором щелочи, удалении белков и фракционном осаждении смеси полисахаридов спиртом. Первоначально для экстракции полисахарида использовали холодный 2%-ный раствор едкого кали или едкого натра [4, 5]. В методике с более мягкими условиями исполь- <уются растворы нейтральных солей [4, 6], но при этом экстрагируется. [ИШЬ незначительная часть хондроитин-4-сульфата, если хрящ не был предварительно выдержан в течение 4—6 недель ири 0° [7]. Ниже приво- 1ится методика, предусматривающая экстракцию растворами нейтральной соли и слабой щелочи [7]. Удаление белка из раствора достигается осаждением фосфорновольфрамовой кислотой 18], денатурацией амиловым спиртом и хлороформом 151 (см. стр. 261) и адсорбцией на каолине с пред- арительной обработкой формальдегидом [9] или без нее [7]. Последний метод описан ниже. [c.347]

В ряде случаев, как, например, при обработке La toba illus arabinosus 17-5 [26], одновременно извлекаются и тейхоевая кислота И полисахарид. Тейхоевую кислоту очищают фракционным осаждением. При добавлении к экстракту двух объемов холодного спирта тейхоевая кислота осаждается в виде слизи, прилипающей к стенкам колбы. После декантации раствора добавляют спирт, что вызывает затвердевание осадка. Твердый продукт соскабливают со стенок колбы стеклянной палочкой. Тейхоевую кислоту можно также отделить от полисахарида, используя ионообменную хроматографию. При этом необходимость в осаждении спиртом отпадает. ТХУ удаляют экстракцией раствора эфиром, водный слой нейтрализуют и наносят на колонку (см. далее). [c.132]

Для осаждения, концентрирования и фракционной очистки ферментов могут быть использованы полиакриловые кислотьт, способтп,1е образовывать растворимые комплекст т с ферментным белком в области pH 3,0—5,8. Метод дает возможность эффективно разделять фермен-тт>т от полисахаридов и нуклеиновых кислот (511. [c.169]

Содержание полиоз в древесине можно определять различными методами выделением всех или части полиоз и косвенными методами без их выделения. В анализе древесины общепринятая методика выделения и определения полиоз заключается в последовательной обработке хлоритной холоцеллюлозы 5 %-ным и 24 %-ным КОН [2491. Щелочные растворы полиоз нейтрализуют уксусной кислотой и обрабатывают большим количеством этанола. Осаждающиеся фракции называют полиозами А (из 5 %-ного КОН) и полиозами В (из 24 %-ного КОН). После поправки на золу сумма этих двух фракций соответствует содержанию полиоз, но не равна точно количеству всех полиоз в образце древесины. Это обусловлено частично их потерей, главным образом пентоза-нов, при делигнификации (см. 3.2.6), неполным осаждением из спиртовых растворов кроме того, в альфа-целлюлозе остается существенная примесь полиоз (см. 3.2.7) [201 ]. Для определения содержания полиоз в древесине хвойных пород предложена модификация этого метода с использованием 5 %-ного и 17,5 %-ного NaOH [691. Описан комбинированный метод выделения из древесины полисахаридов по Уайзу [249] с дополнительным определением содержания пентозанов, уроновых кислот и ацетильных групп непосредственно в древесине после экстрагирования водой [202]. В принципе, для определения содержания полиоз можно использовать любую методику их фракционного выделения при условии, что сумма фракций характеризует общее количество полиоз или, по крайней мере, преобладающую часть. [c.37]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология