Получение накопительных культур

Накопительные и чистые культуры микроорганизмов. Из-за малых размеров микроорганизмов работа в лаборатории проводится не с одной особью, а с популяцией организмов, или культурой. Культура микроорганизмов, состоящая из клеток одного вида, носит название чистой культуры. Если число видов два или больше, то говорят о смешанной культуре. При выделении чистой культуры из природных местообитаний, где микроорганизмы в большинстве случаев растут в виде смешанных популяций, на первом этапе обычно пользуются предложенным С. Н. Виноградским методом получения накопительных культур, в которых преобладают организмы определенной группы. Накопление желаемых микроорганизмов происходит за счет создания элективных условий культивирования, благоприятных для данной группы. Другие организмы, также присутствующие в пробе, в этих условиях либо не размножаются, либо характеризуются незначительным ростом. [c.76]

Для получения накопительной культуры термофильных целлюлозоразлагающих бактерий можно пользоваться питательной средой следующего состава (в г на 1 л водопроводной воды) [c.103]

Из различий в спектрах поглощения зеленых водорослей, цианобактерий, пурпурных бактерий и зеленых бактерий можно заключить, что разные группы фототрофных организмов используют для фотосинтеза свет разных участков спектра. Это связано с условиями освещения в естественных местах обитания разных фототрофных организмов. Найденные различия используют дри получении накопительных культур некоторых фототрофных бактерий (см. рис. 12.13). [c.378]

Распространение микроорганизмов. Малые размеры имеют значение и для экологии. Многие растения и животные, ныне широко распространившиеся благодаря человеку, встречались раньше лишь на отдельных континентах. В отличие от этого бактерии (включая цианобактерий) вездесущи их можно найти в арктических областях, в воде и в высоких слоях атмосферы. Видовой состав их во всех местообитаниях в широких пределах сходен с их видовым составом в почве. Благодаря своему малому весу микроорганизмы легко распространяются с воздушными потоками. В естественных условиях ни одно местообитание, ни один субстрат не нуждается в специальном заражении каким-либо микробом. Этим обстоятельством пользуются для получения накопительных культур. Как правило, достаточно одного грамма садовой почвы, чтобы найти вид бактерий, способный расти за счет любого природного вещества. Микроорганизмы существуют повсюду среда определяет лишь то, какие формы будут в данном месте активно размножаться. Создавая в пробирке соответствующие селективные условия, можно из небольшого количества земли или ила, а в особых случаях и из других материалов получать накопительные культуры, а из них и чистые культуры большинства известных микроорганизмов. [c.21]

Для размножения любой бактерии (независимо от целей) необходимо обеспечить подходящее биофизическое окружение и биохимические питательные компоненты. В гл. 6 приведены методы контроля таких биофизических факторов, как pH, температура, подача и удаление кислорода, и другие. В гл. 7 рассмотрены потребности в питательных веществах, состав синтетических и комплексных сред и количественные определения роста бактерий. Умелое обращение с биофизическими, биохимическими и биологическими факторами приобретает особую важность в получении накопительных культур и последующего выделения бактерий в виде чистой культуры (гл. 8). [c.163]

Для получения накопительной культуры среды после хорошего встряхивания (взбалтывания) разливают по 30 мл в эрленмейеровские колбы емкостью 100 мл, заражают небольшим количеством почвы (четверть чайной ложки) и ставят в термостат при температуре 25—30°С. Спустя 7 дней (а иногда 14 или 21 день) в среде для первой фазы нитрификации появляется азотистая, а в среде для второй — азотная кислота. После исчезновения аммиака (для первой фазы) и азотистой кислоты (для второй фазы) опыт заканчивают. [c.118]

В посевном материале, используемом в эксперименте, могут присутствовать разные штаммы с одинаковым типом метаболизма, отличающиеся друг от друга лишь незначительно, например только по оптимуму pH и по скорости роста. Если для получения накопительной культуры использовать такой материал, то доминировать будет наиболее приспособленный к данным условиям или наиболее быстро растущий штамм все же остальные будут подавлены и выделить их не удастся. Поэтому в тех случаях, когда хотят выделить как можно больше штам- [c.186]

Получение накопительных культур и выделение. Для вьщеления сульфатредуцирующих бактерий необходимо использовать питательную среду, содержащую подходящий донор водорода, пригодный для ассимиляции углеродный субстрат, минеральные вещества и сульфат необходимо поддерживать анаэробные условия и достаточно низкий окислительно-восстановительный потенциал = - 200 мВ) (рис. 9.4). [c.313]

Способность сульфатредуцирующих бактерий использовать органические кислоты, спирты и даже молекулярный водород, образующийся при поляризации железа, в качестве доноров водорода лежит в основе способа получения накопительных культур этих бактерий (рис. 9.4). [c.314]

Как правило, накопительные культуры получают в закрытых системах, т. е. микроорганизмы выращивают в обычных периодических (стационарных) условиях в колбах или пробирках, где концентрация питательных веществ и продуктов метаболизма постоянно изменяется в процессе их роста. Для получения накопительных культур используются также открытые системы. Например, с помощью хемостата можно обеспечить постоянство окружающей среды для бактерий, непрерывно подавая питательные вещества в концентрации, лимитирующей рост, и удаляя продукты метаболизма. Изменяя скорость разбавления среды в хемостате, можно контролировать концентрацию питательных веществ, лимитирующих рост. В свою очередь это может избирательно влиять на скорость роста различных организмов в смешанной бактериальной культуре, в результате чего один или другой организм смешанной популяции начинает количественно преобладать. [c.278]

В этой главе мы приведем специфические примеры огромного многообразия и нередко изощренности методов накопления, используемых в бактериологии. Во многих случаях для получения накопительной культуры определенной бактерии используют несколько различных подходов. Основное внимание в этой главе будет уделено практическим аспектам получения накопительных культур и выделения бактерий, однако в конце главы приведены ссылки на общие обзоры [1—4], в которых можно найти подробную информацию об используемых при этом принципах. Получение накопительных культур и выделение мутантных штаммов рассматриваются в разд. 13.4—13.6. [c.279]

Для получения накопительных культур сначала готовят экстрагированное сено. Для этого сено измельчают и кипятят в больших объемах воды. В процессе экстракции воду трижды меняют. Вода в последней порции должна быть янтарного цвета. Сено подсушивают и помеш,ают на подносе в термостат (37 °С) для окончательного высушивания. [c.287]

Среду для получения накопительных культур, состоящую из 0,8%-ной суспензии высушенного экстрагированного сена в 70 мл водопроводной воды, вносят в 125-миллилитровые колбы Эрленмейера и закрывают ватными пробками. Затем ее стерилизуют автоклавированием, добавляю к ней 5 мл суспензии ила из пруда, озера или ручья, содержащей гниющий растительный материал, и инкубируют при 25 С в течение 10 дней. [c.287]

ИХ массовое развитие ( цветение ) дольно часто можно наблюдать невооруженным глазом, особенно в морской или солоноватой воде. Однако, если цветения не наблюдается, полезно для получения накопительных культур использовать колонку Виноградского. При этом обеспечиваются анаэробные условия и длительное снабжение Нг5, что приводит к обильному росту фото-трофных серобактерий, впрочем как и многих других микроорганизмов. [c.293]

Использование антисыворотки может обогатить минорную фракцию в популяции, состоящей из двух видов микроорганизмов. При исследовании смешанной культуры, в которой присутствуют два вида морской спириллы —крупные и мелкие, Линн и Криг [45] обнаружили, что мелких спирилл значительно больше. Это делало невозможным получение отдельных колоний крупных спирилл методом посева в чашки. Более того, для этих целей не подходил ни один из многочисленных методов селекции. Для получения накопительных культур крупной спириллы авторы выделили мелкую спириллу и использовали ее для иммунизации кролика. Когда полученную антисыворотку добавили к смешанной культуре, мелкие спириллы агглютинировали и осели на дно пробирки. Для получения отдельных колоний методом посева в чашки использовали надосадочную жидкость, содержащую теперь много крупных спирилл. [c.295]

Для получения накопительных культур спирилл используется также проточное (непрерывное) культивирование, при котором обеспечивается низкий уровень питательных веществ. Яннах [34] показал, что в условиях хемостата скорость роста морских спирилл выше скорости роста псевдомонад в смеси этих бактерий, если скорость разведения снижается до такой величины, [c.304]

Для получения накопительных культур бактерий, окисляющих толуол, используют основную неорганическую среду А или В (разд. 8.5.5) в закрытых ватными пробками колбах. Среду инокулируют небольшим количеством влажной почвы, предварительно обработанной в течение нескольких дней парами толуола, или свежей почвой. Колбы инкубируют 1—3 нед при 25—30 °С в закрытой камере, содержащей стакан с водой, насыщенной толуолом. Отдельные колонии получают, делая посев выросшей культуры штрихом на твердую среду и инкубируя чашки при 25—30 °С в атмосфере, содержащей толуол. [c.315]

В каждой бутылке на агар наносят 50 мл (100 мл в случае получения накопительной культуры с формалином) среды следующего состава [c.339]

Для получения накопительной культуры фотоавтотрофнык серобактерий среда Ван-Ниля, склянки с притертыми пробками, илы из разных водоемов. [c.132]

Для получения накопительной культуры суль-фатредуцирующих бактерий можно использовать жид ую среду Ван-Дель- [c.133]

Для получения накопительной культуры Leptothrix rassa по Виноградскому в высокий стеклянный цилиндр вносят небольшое количество сена, свежеосажденный гидрат окиси железа Ре(ОН)з и немного ила в качестве инокулята, затем цилиндр заполняют водопроводной водой или водой исследуемого водоема и оставляют при комнатной температуре. [c.138]

Для получения накопительных культур видов lostridium можно воспользоваться некоторыми их особенностями. Поскольку их споры терморезистентны, инокулят предварительно пастеризуют. Создавая строго анаэробные условия, заранее исключают рост всех аэробных бактерий. Так как некоторые бактерии, расщепляющие полисахариды, прикреплены к поверхности частиц, например к крахмальным зернам или к частицам целлюлозы в рубце жвачных или каких-то осадках, эти частицы можно сначала промыть, чтобы освободить их от других бактерий, а затем использовать как материал для инокуляции. Для поддержания способности к интенсивному брожению нужно и в последующей работе с выделенными штаммами всегда пользоваться пастеризованными инокулятами. [c.292]

Еще один способ получения накопительных культур заключается в добавлении проб, содержащих споры, к соответствующей среде, которую затем прогревают 10 мин при 80 °С и инкубируют около 1 сут. Выросшую культуру высевают на твердые среды. Для видов Ba illus наиболее подходящей средой является питательный бульон с 0,5% дрожжевого экстракта, а для lostridium— восстановленный крахмальный бульон (бульон PY+1% растворимого крахмала разд. 20.3.28). [c.282]

НЫХ энтеробактерий и энтерококков. Для селекции представителей сем. Enteroba teria eae желчь или ее соли добавляют к таким средам, как агар Мак-Конки (разд. 8.5.27), агар для салмонелл и шигелл (разд. 8.5.43), агар с желчью и фиолетовым красным (разд. 8.5.56) и многим другим. Для получения накопительных культур энтерококков [20] хорошей селективной средой оказался питательный агар с желчью (разд. 8.5.9). [c.301]

Добавление бацитрацина (2 ед./мл) и новобиоцина (2 мкг/мл) к среде с агаром для бруцелл (разд. 8.5.14) позволяет выделять С. fetus из испражнений и кишечного содержимого крупного рогатого скота, овец, свиней и птиц. Этот метод можно использовать вместе с методом фильтрации, описанным ранее для получения накопительных культур С. fetus (разд. 8.1.16). [c.301]

Для получения накопительных культур псевдомонад, способных использовать триптофан как единственный источник углерода и азота, в 250-миллилитровую колбу Эрленмейера, содержащую 40 мл триптофановой среды (разд. 8.5.54), вносят около 0,1 г почвы, Смесь инкуби- [c.306]

Для получения накопительных культур Desulfotoma ulum a eioxidans [81], которая использует не лактат, а ацетат, применяют среду Виддла и Пфеннига (разд. 8.5.57), содержащую ацетат С помощью фазово-контрастной микроскопии слет,ят за появлением подвижных прямых или слегка изогнутых палочек толщиной 1 —1,5 мкм и длиной 3,5—9 мкм, которые имеют споры, а также яркие преломляющие участки. Для получения отдельных колоний используют метод встряхивания пробирок. После 3 нед инкубации колонии отбирают и нагревают 10 мин при 70 °С такая тепловая обработка помогает выделению D a etoxidans, когорый является спорообразующим микроорганизмом. [c.313]

Основная среда для получения накопительных культур Rhodospirilla eae [76] [c.325]

Доводят pH до 7,0 с помощью NaOH. Среду, используемую для получения накопительных культур, не стерилизуют, Среду, используемую для выделения чистых культур, стерилизуют 15 мин при 121 °С перед добавлением метанола. Для приготовления твердой среды, используемой при выделении бакгерий, добавляют 15 г агара на 1 л и исключают из смеси KNO3. Перед добавлением метанола среду стерилизуют 15 мин при 121 °С, Для удаления кислорода из всех жидких сред перед использованием через них продувают азот, В анаэробных условиях KNO3 в этих средах служит акцептором электронов. [c.333]

Смотреть страницы где упоминается термин Получение накопительных культур: [c.58] [c.109] [c.120] [c.129] [c.131] [c.168] [c.186] [c.280] [c.383] [c.417] [c.93] [c.280] [c.285] [c.291] [c.296] [c.300] [c.309] [c.312] [c.318] [c.350] [c.351] [c.351]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология