Выделение чистых культур микроорганизмов

ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР МИКРООРГАНИЗМОВ [c.71]

Основным методом выделения чистых культур микроорганизмов является метод, предложенный Р. Кохом. Принцип его заключается в получении чистой культуры из отдельной колонии. Однако этот метод неприменим для выделения микроорганизмов, которые не растут или плохо растут на плотных средах. К числу таких микроорганизмов относятся некоторые бактерии, многие водоросли и простейшие. [c.73]

Бактериологическое исследование. Выделение чистой культуры и ее идентификация необходимы для подтверждения диагноза листериоза. Листерии растут на простых питательных средах, но более интенсивный рост отмечается на кровяном агаре или средах, обогащенных глюкозой, глицерином, дрожжевым экстрактом, сывороткой, печеночной тканью. Материал засевают на плотные среды. Для подавления роста сопутствующих микроорганизмов используют специально разработанные селективные среды с антибиотиками и/или красителями, хлоридом лития, фенилэтано-лом (агары Оксфордский, PAL САМ яла др.). Те же добавки используют в составе бульонных сред для обогащения исследуемого материала (накопление листерий ведут при 30 °С в течение 24 — 48 ч). Иногда используется также метод холодового обогащения (материал выдерживают при 4 °С в течение 10 — 50 сут). Посевы на плотных средах инкубируют при 37 С до 7 сут. [c.179]

Физиологию, биохимические свойства, циклы развития микроорганизмов исследуют, как правило, при работе с чистыми культурами. Чистой, или аксенической, культурой называют такую культуру, которая содержит микроорганизмы одного вида. Умение выделить микроорганизмы одного вида из смешанной популяции, существующей в природе, и поддерживать чистоту культуры — необходимое условие работы с микроорганизмами. Выделение чистой культуры обычно включает три этапа получение накопительной культуры выделение чистой культуры определение чистоты выделенной культуры. [c.71]

При выделении чистых культур аэробных микроорганизмов высев из накопительной культуры проводят на поверхность Плотной среды. Нанесенную каплю накопительной культуры (или из соответствующего разведения ее) осторожно распределяют стерильным стеклянным шпателем по поверхности плотной среды, после чего этим же шпателем протирают поверхность среды последующих 3—4 чашек. [c.78]

Накопительные и чистые культуры микроорганизмов. Из-за малых размеров микроорганизмов работа в лаборатории проводится не с одной особью, а с популяцией организмов, или культурой. Культура микроорганизмов, состоящая из клеток одного вида, носит название чистой культуры. Если число видов два или больше, то говорят о смешанной культуре. При выделении чистой культуры из природных местообитаний, где микроорганизмы в большинстве случаев растут в виде смешанных популяций, на первом этапе обычно пользуются предложенным С. Н. Виноградским методом получения накопительных культур, в которых преобладают организмы определенной группы. Накопление желаемых микроорганизмов происходит за счет создания элективных условий культивирования, благоприятных для данной группы. Другие организмы, также присутствующие в пробе, в этих условиях либо не размножаются, либо характеризуются незначительным ростом. [c.76]

Известно, что возбудители инфекционных болезней в организме человека, животных и во внешней среде находятся преимущественно в смеси с другими микроорганизмами (в том числе условно-патогенными и сапрофитами). Выделение чистой культуры позволяет выявить ее морфологические, культуральные, биохимические и другие признаки, по совокупности которых определяют видовую принадлежность возбудителя, т. е. осуществляют его идентификацию. [c.25]

Выделение чистой культуры анаэробных микроорганизмов по методу Коха требует создания условий, ограничивающих доступ кислорода к культуре. [c.78]

Экспериментальное 31фажение животных. Инфекционный процесс может быть искусственно воспроизведен путем заражения лабораторных животных кроликов, морских свинок, белых мышей, белых крыс и др. Экспериментальное заражение животных производится для 1) изучения патогенности и вирулентности микроорганизмов 2) выделения чистой культуры возбудителя из различных материалов (метод биопробы) 3) воспроизведения экспериментальной инфекции, испытания лечебного действия химиотерапевтических препаратов и других целей. [c.97]

УЧЕТ ЧИСЛЕННОСТИ И ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ МИКРООРГАНИЗМОВ [c.48]

Второе направление — полиморфизм — допускало более широкие границы для видовой изменчивости и не считало виды бактерий столь резко разграниченными. Сторонники этой теории полагали, что в зависимости от условий выращивания бактерии могут резко изменять свои морфологические и физиологические особенности. Спорный вопрос был разрешен выделением чистой культуры немецким ученым Кохом. Работы Коха доказали, что у бактерий существуют строго разграниченные виды. Но также установлено, что бактерии легко изменяют свои свойства в зависимости от состава среды и под влиянием различных физических, химических и биологических факторов. Условия жизни накладывают определенный отпечаток на особенности и свойства микроорганизмов и вызывают адаптацию их, что может привести к образованию новой разновидности, или штамма. [c.246]

Бактериологическое исследование основано на культивировании бактерий на питательных средах, выделении чистой культуры возбудителя и ее идентификации. Чистой культурой называют популяцию микроорганизмов одного вида, как правило выращенную из изолированной колонии на плотной питательной среде. Разрешающая способность метода составляет в среднем 1000 клеток в 1 мл. [c.25]

Выбор метода культивирования, состава питательной среды зависит главным образом от типа питания и дыхания (биологического окисления) микроорганизмов. На рис. 6 (цв. вклейка) показан наиболее распространенный способ посева исследуемого материала с целью выделения чистой культуры механическое [c.25]

Животных заражают для выделения чистой культуры возбудителя в тех случаях, когда нельзя получить ее другими способами (например, при загрязнении исследуемых объектов посторонней микрофлорой, подавляющей рост возбудителя, при незначительном содержании микроорганизмов или переходе их в фильтрующиеся формы). Так, при исследовании разложившихся трупов грызунов на присутствие возбудителей чумы заражают (суспензией органов, кровью) морских свинок, которые погибают через 3 — [c.47]

Плотные среды используют для выделения чистых культур, в диагностических целях для описания колоний, для определения количества микроорганизмов, их антибиотической активности, для хранения культур в коллекциях и в ряде других случаев. С целью уплотнения сред применяют агар или желатину. Плотной основой [c.51]

Выделение чистой культуры аэробных и анаэробных микроорганизмов и их идентификацию проводят по общепринятым правилам (см. подразд. 1.2.3 и 1.2.4). [c.55]

Плесневые грибы выращивают в чистых культурах, потому что только таким образом можно правильно изучить их развитие и длительно хранить. Для выделения чистой культуры из смеси микроорганизмов, полученной простым изолированием их из природных условий, следует придерживаться определенных методов. Чтобы выделить чистые культуры используют два метода рассева и одноклеточных культур. [c.31]

Второе направление — полиморфизм — допускало более широкие границы для видовой изменчивости и не считало виды бактерий столь резко разграниченными. Сторонники этой теории полагали, что в зависимости от условий выращивания бактерии могут резко изменять свои морфологические и физиологические особенности. Спорный вопрос был разрешен выделением чистой культуры немецким ученым Кохом. Работы Коха доказали, что у бактерий существуют строго разграниченные виды. Но также установлено, что бактерии легко изменяют свои свойства в зависимости от состава среды и под влиянием различных физических, химических и биологических факторов. Условия жизни накладывают определенный отпечаток на особенности и свойства микроорганизмов и вызывают адаптацию их, что может привести к образованию новой разновидности, или штамма. Например, длительное воздействие климатических условий приводит к образованию географических рас бактерий, обладающих определенным комплексом признаков, устойчиво передающихся по наследству. [c.253]

ШТАММ. Чистая культура микроорганизмов, вирусов, выделенная из одного источника (почвы, воды, растительного или животного организма). Термин Ш. применяется к тем культурам микроорганизмов и вирусов, которые относятся к одному и тому же виду. Выделенные Ш. отличаются своей вирулентностью. Так, при производстве ветеринарных бактериологических препаратов используют уже известные Ш. в целях получения сывороток и вакцин соответствующей активности. Понятие Ш. имеет важное значение при производстве бактериальных удобрений. [c.360]

Выделение чистых культур и микроорганизмов [c.18]

Число специфических клеток микроорганизмов в природных образцах может быть установлено с помощью применения техники флуоресцирующих антител. Но для этого необходима предварительная подготовка, включающая выделение чистых культур ис- [c.257]

Штамм — чистая культура микроорганизмов, выделенная из определенного источника или выведенная в результате мутаций разные штаммы одного и того же микроорганизма по некоторым свойствам могут заметно отличаться. [c.194]

Выделение чистой культуры данного микроорганизма будет успешным, если он присутствует в смешанной популяции в достаточно высокой пропорции. Микроорганизм легко выделить, если он количественно преобладает в смешанной популяции. Разработанные методы накопления имеют целью добиться увеличения относительного количества данного организма благодаря созданию лучших условий для его роста и выживания по сравнению с другими или путем пространственного отделения его от других членов популяции. К физическим методам, которые могут быть использованы в данном случае, следует отнести регуляцию роста температурой, тепловую обработку, ультразвуковую обработку и ультрафиолетовое облучение, приводящие к гибели или подавлению роста других организмов, присутствующих в популяции. Можно также использовать преимущества в некоторых физических свойствах изучаемого микроорганизма, таких, как его размеры и подвижность это [c.277]

Под термином штамм понимают чистую культуру микроорганизма, выделенную из определенного места обитания (воды, почвы, организма животного и т. д.). Разные штаммы одного вида микроорганизмов могут различаться по некоторым признакам, например, чувствительности к антибиотикам, способности синтезировать некоторые продукты метаболизма и т. д., но эти различия меньше чем видовые . Виды микроорганизмов объединяют в так- [c.189]

Выделение чистой культуры микробов является обяза- тельным этапом всякого бактериологического исследования. Чистая культура необходима для изучения морфологических, культуральных, биохимических и антигенных свойств, по совокупности которых определяется видовая принадлежность исследуемого микроорганизма. [c.52]

Для выделения чистых культур микробов из материалов, содержащих обильную смешанную микрофлору, предложено много различных методов. Наибольшее распространение получил метод механического разъединения микроорганизмов, находящихся в исследуемом материале, с целью получения изолированных колоний на поверхности или в глубине питательной среды. [c.52]

Для выделения чистых культур аэробных бактерий делают высев на чашки Петри из накопительной культуры. Ее каплю (лучше из соответствующего разведения) наносят и осторожно размазывают стерильным стеклянным шпателем по поверхности плотной среды, после чего этим же шпателем протирают поверхность последующих трех-четырех чашек. Чашки выдерживают от двух до семи суток, так как скорость роста различных микроорганизмов неодинакова. Выросшие изолированные колонии отсевают петлей в пробирки на поверхность скошенной плотной среды или в жидкую среду. [c.52]

Животных заражают для выделения чистой культуры возбудителя в тех случаях, когда нельзя получить ее другими способами (например, при загрязнении исследуемых объектов посторонней микрофлорой, подавляющей рост возбудителя, при незначительном содержании микроорганизмов или переходе их в фильтрующиеся формы). Так, при исследовании разложившихся трупов грызунов на присутствие возбудителей чумы заражают (суспензией органов, кровью) морских свинок, которые погибают через 3 — 7 дней при явлениях септицемии (размножение микроорганизмов в крови). Из крови и внутренних органов морской свинки легко выделяют чистую культуру возбудителя. [c.47]

На третьем этапе из выросшей на скошенном агаре культуры делают мазки, окрашивают их по Граму. О чистоте ьсультуры судят по однородности роста, формы, размера и окраски микроорганизмов. Для идентификации выделенной чистой культуры, кроме изучения морфологических, тинкториальных и культуральных особенностей микроорганизмов, необходимо определить их ферментативные и антигенные свойства, фаго- и бактериоцино-чувствительность, токсигенность и другие признаки, характеризующие их видовую специфичность. [c.32]

Метод ПЦР позволяет идентифицировать неизвестные микроорганизмы, находящиеся в природной пробе, без выделения чистых культур. Разработаны универсальные праймеры на бактерии, археи и эукариоты, которые дают возможность специфически амплифицировать последовательности этих трех групп микроорганизмов, разделить их с помощью ТССЕ/ООСЕ-методов и затем, после вторичной амплификации отдельных полос, получить почти полный профиль микробного сообщества с идентификацией отдельных филогенетических линий и классификацией микроорганизмов на основе последовательностей 168 рРНК. [c.256]

Ниже приведены некоторые предварительные замечания, относящиеся вообще ко всем методам, используемым для характеристики бактерий. Наиболее важное из них состоит в том, что всегда следует использовать только чистые культуры. Это может показаться самоочевидным, однако сюрпризы , встречающиеся при выделении чистой культуры, не всегда можно предугадать заранее. Однократный отбор колонии с чашки и перенос ее на другую среду не всегда гарантирует чистоту. Например, колонии слизеобразующих бактерий могут содержать в виде примеси другие микроорганизмы, захваченные со слизью культуры актиномицетов или различных видов Ba illus могут быть заражены контаминантами, случайно попавшими в полости между цепочками клеток. Трудности возникают также и при выделении культур на селективной среде. В этом случае контаминанты могут существовать в латентном состоянии и вызывать заражение при отборе и пересеве колоний. Наилучшая очистка достигается на неселективной среде. Но даже в этом случае колонии не следует отбирать слишком рано, так как возможно присутствие медленно растущих контаминантов. Методы получения чистых культур описаны в гл. 8. [c.8]

Повторное выделение чистых культур из природных источников в ряде случаев представляет серьезные трудности. Многие микроорганизмы при неправильном хранении могут в значительной мере или даже полностью утратить способность трансформировать стероиды. В связи с этим важное ваучное и практическое значение приобретает проблема сохранения культур микроорганизмов. Все известные методы хранения сводятся к переводу культур в анабиотическое состояние. С этой целью микроорганизмы [c.39]

Исходя из экологических принципов, для экспериментов в камерах искусственный Марс используются образцы почв и чистые культуры микроорганизмов, выделенные из пустынь, высокогорных почв, антарктических и арктических районов. Спороносные бактерии, выделенные из песка пустыни Каракумы, размножаются в измельченном лимоните (с добавлением 2% плодородной почвы), имеющем максимальную гигроскопическую влажность, Замораживание и оттаивание (от —60 до + 25°), пониженное давление (10 мм рт. ст.) и анаэробная атмосфера (50% СОг, 40% Ыг и 10% Аг) не влияют на размножение изучавшихся ксерофитных бактерий. Влажность почвы является основным фактором, лимитирующим развитие микроорганизмов в условиях искусственного Марса (Imshenetsky et al., 1967), [c.120]

При работе с чистыми культурами микроорганизмов выделение СОг установлено только при использовании в качестве питательной среды триазинов, меченных в боковой цепи [93, 96, 97]. О небольшом, но заметном выделении 02 сообщалось в опытах, в которых неидентифицированные микроорганизмы инкубировали в присутствии меченных в кольце хлортриазинов в растворах или почвах различных типов. Способность этих систем выделять СОа и количество выделившегося СОг в основном зависят от условий опыта, т. е. типа почвы, температуры, влажности, дополнительных источников энергии для роста микроорганизмов и т. д. Поэтому разброс экспериментальных данных для одного и того же триазина [84, 126, 170, 171] можно объяснить действием этих факторов. Кроме того, при попытке оценить способность той или иной почвы разлагать триазины, по-видимому, важна длительность периода наблюдений. Результаты длительных наблюдений за разложением симазина в почвах различных типов показывают, что за первоначальным периодом заметного выделения (приблизительно 2,5% от общего количества внесенной в почву метки в течение 5 недель) следует скрытый период длительностью до 15 недель. После этого начинается второй период выделения СОг, который кончается через 30 недель. В зависимости от типа почвы общее количество СОг составляет от 6 до 17% метки [172]. Опубликованные данные показывают, что выделение СОг как следствие полного разрушения триазинового кольца не главный путь разложения триазинов в почве, так как нельзя установить связь между выделением СОг и исчезновением гербицида. [c.79]

Среды в твердом состоянии в форме плотных гелей используются в бактериологии с времен Роберта Коха. Наиболее важным преимуществом использования твердых сред является то, что на них можно выращивать микроорганизмы в виде колоний, образующихся из отдельных клеток популяции. Поэтому посев щтрихом представляет собой простой и эффективный метод выделения чистых культур бактерий (разд. 8.4.1). Методы посева нанесением жидкой культуры на поверхность твердой среды, глубинного посева и послойного посева также пригодны для подсчета жизнеспособных бактерий (разд. 11.2). Другими методами, основанными на использовании твердых сред, являются посев с помощью бархатных репликаторов (разд. 13.6.2 и 20.2.5), а также ауксанографический метод (разд. 20.2.6). [c.356]

Для выделения микроорганизмов — продуцентов антибиотиков из естественных мест их обитания применяют разнообразные методы. Здесь же следует остановиться лищь на самой общей характеристике этих методов. В основу больщинства приемов положен принцип выделения чистой культуры микроба и непосредственного испытания его по отнощению к используемым тест-организмам. Однако, как отмечалось выще, существенное значение при образовании антибиотических веществ имеют и смещанные культуры. Об этом обстоятельстве также необходимо помнить при поиске продуцентов антибиотических веществ. [c.127]

Выделение отдельных видов бактерий из исследуемого материала, содержащего, как правило, смесь различных микроорганизмов, является одним из этапов любого бактериологического исследования, проводимого с различными целями диагностики заболеваний, определения микробной обсембнен-ности окружающей среды и т.д. Для выделения чистой культуры применяют методы, основанные на 1) механическом разобщении бактериальньпс клеток 2) предварительной обработке исследуемого материала с помощью физических или химических факторов, оказьшающих избирательное антибактериальное действие 3) избирательном подавлении размножения сопутствующей микрофлоры физическими или химическими факторами во время инкубации посевов 4) способности некоторых бактерий быстро размножаться в организме чувствительных к ним лабораторных животных (биопробы)., [c.50]

Выращивание в толще плотной среды. Этим приемом пользуются для получения изолированных колоний при выделении чистых культур или определении численности анаэробных микроорганизмов. Посевной материал вносят в расплавленную и остуженную до 48—50° агаризованную, желательно осветленную среду, тщательно перемешивают и оставляют в пробирках или переливают стерильной пипеткой в заранее простерилизованные трубки Бурри или чашки Петри. Поверхность среды в пробирках заливают парафином. Трубки Бурри — это стеклянные трубки длиной 20—25 см, диаметром 1,0—1,5 см. Трубки стерилизуют, закрыв оба конца ватными пробками. Перед посевом ватную пробку у одного конца заменяют стерильной резиновой, через другой конец трубки вносят среду с посевным материалом и закрывают также резиновой пробкой (рис. 38). [c.60]

При выделении чистой культуры аэробных микроорганизмов накопительную культуру высевают на поверхность плотной среды. Порядок работы следующий. Расплавленную на кипящей водяной бане стерильную питательную среду, содержащую агар или желатину, разливают в стерильные чашки Петри. После того как среда застынет, на ее поверхность из пипетки наносят каплю накопительной культуры или ее разведения в стерильной воде и стерильным стеклянным шпателем Дригальского распределяют каплю сначала по одной половине поверхности среды в чашке Петри,. [c.73]

Вьщеление микроорганизмов, важньк для гидрометаллургии, проводят путем высева соответствующих проб руды или растворов на питательные среды. Таким путем получают накопительные культуры. Даже при использовании элективньк сред накопительные культуры помимо выделяемых микроорганизмов содержат и другие виды. Поэтому выделение чистых культур зачастую представляет значительные затруднения. Ниже приводятся методы получения как накопительных, так и чистых культур те-рий, наиболее перспективных для использования в гидрометаллургии. [c.51]

Выделение чистых культур. Для получения чистых культур марганец-выщелачивающих микроорганизмов используют плотную среду Бромфильда (N 20). Посев проводят на 5-6 сутки культивирования накопительной культуры из разведений 10" и 10" по 0,1—0,2 мл на чашку. Засеянные чашки инкубируют при 28-30°С в зависимости от условий получения накош1тельных культур в аэробных или анаэробных условиях. [c.63]

Питательные среды могут иметь различное назначение. Имеются питательные среды для культивирования чистых культур микроорганизмов, питательные среды, которые применяют для количественного учета или выделения определенных видов микроорганизмов из образна, обсемгненного большим количеством посторонней микрофлоры. [c.294]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология