Гемагглютинация антигенам

Если в материале содержится специфический антиген, он соединяется с сывороткой, адсорбированной на поверхности лунок, и, в свою очередь, связывает иммуноглобулины на поверхности эритроцитов. В результате происходит агрегация эритроцитов (гемагглютинация). В описанной модификации реакция применяется для выявления антигенов ротавирусов и других вирусов в фекалиях больных. [c.279]

Особый случай агглютинации представляет собой гемагглютинация. Метод гемагглютинации благодаря своей точности сослужил серологии отличную службу. При этом сначала экстрагируют токсин (антиген), а затем сажают его на поверхность эритроцитов. Если теперь добавить соответствующую антисыворотку, то будут склеиваться (агглютинировать) [c.324]

Антиген, связанный + Антитело (антисыворотка) —> Гемагглютинация [c.323]

Рнс. 53. Реакция пассивной гемагглютинации (схема). Эр — эритроциты Аг — антиген Ат — антитело. [c.112]

Количественный контроль реакций гемагглютинации и проверка активности агглютинирующих сывороток контроль реакций антиген — антитело [599—62)]. [c.11]

Антигенные варианты, селекционированные с моноклональными антителами, очевидно, утратили антигенный сайт на НА, так как в каждом случае моноклональное антитело (которое связывается очень эффективно с НА дикого типа) совершенно неспособно связываться с антигенным вариантом. Были проведены эксперименты для ответа на вопрос, появляется ли новый антигенный сайт на молекуле НА вариантов при потере первоначального сайта. Гипериммунные антисыворотки к молекулам вариантов абсорбировали с очищенным концентрированным вирусом дикого типа до тех пор, цока титры антисывороток для вируса дикого типа в реакции ингибиции гемагглютинации не обнаруживались. Абсорбированные сыворотки затем испытывали с вариантами вирусов. Когда сыворотки против вариантов, отобранных с моноклональными антителами Н14/А2 и Н14/А21, для которых изменения последовательности заключались в замене аспарагина 53 на лизин и серина 205 на тирозин соответственно [62], абсорбировали с вирусом Меш/71 дикого типа, не оставалось активности ингибиции [c.138]

Все описанные выше рекомбинантные векторы экспрессируют гликопротеид НА, который не различается во всех изученных отношениях от НА, синтезированного во время естественной гриппозной инфекции. Для установления этого положения, т. е. того факта, что синтезированное образование — подлинный по своей структуре, антигенности и биологическим активностям гликопротеид НА, были проведены серии экспериментов в клетках, инфицированных различными рекомбинантами, включаюш,ие иммунопреципитацию, иммунофлюоресценцию, гемагглютинацию и тесты слияния клеток (рис. 30). Эти эксперименты были детально описаны ранее [5, И, 24, 28] и очень коротко будут обсуждены здесь. [c.172]

Помимо реакции преципитации может быть использована любая другая реакция антиген-антитело пассивная гемагглютинация, связывание комплемента и др. (см. гл. 12). [c.23]

В разд. 5 мы рекомендовали выбирать метод скрининга, адекватный использованию МКА. Следует иметь в виду, что в неадекватных системах МКА иногда не обнаруживают антигена. Например, моноклональные антитела к растворимым белкам, отобранные методом пассивной гемагглютинации с помощью эритроцитов, нагруженных антигеном, могут распознавать только одну антигенную детерминанту. Такие антитела не обладают преципитирующими свойствами. В таком случае преципитация антигена достигается при использовании комбинации моноклональных антител различной специфичности, которые распознают две различные детерминанты на молекуле белка. [c.149]

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА] с использованием нагруженных антигеном эритроцитов [c.255]

Реакция пассивной гемагглютинации с эритроцитами, нагруженными белковым антигеном [c.259]

Однако описанный способ сенсибилизации эритроцитов пригоден только для тех случаев, когда антиген относится к группе полисахаридов. Антигены белковой природы адсорбируются эритроцитами очень слабо и поэтому при добавлении соответствующей иммунной сыворотки реакция гемагглютинации не наступает. [c.125]

Поскольку в большинстве гликопротеинов углеводная часть является определяющей для проявления специфической биологической активности, очень важное место в установлении концевой последовательности олигосахаридных цепей играют иммунохимические методы, которые одновременно позволяют непосредственно определить и структуру антигенных детерминантов. Так, испытывая ингибирующее действие различных моно-и олигосахаридов и их производных на нммунохимпческую реакцию исследуемого гликопротенна с соответствующей антисывороткой, можно сделать заключение о природе антигенных детерминантов . Этот путь играет особенно большую роль в исследовании гликопротеинов и оказался весьма плодотворным при изучении групповых веществ крози. Испытывалось ингибирующее действие на реакции гемагглютинации групповых веществ крови с соответствующими им антисыворотками различных веществ как продуктов частичной деградации этих биополимеров, так и модельных соединений. На основании этих данных были сделаны заключения о природе концевых моносахаридов в групповых веществах, являющихся антигенными детерминантами (обзор см. ). [c.575]

Серологическое исследование. Реакции агглютинации, преципитации, связывания комплемента, непрямой гемагглютинации, ИФА, иммуноблотинг или иммунофлюоресценции проводят с антигенами из грибов по обычным методикам, используемым для диагностики других инфекций. [c.318]

Для диагностики сифилиса выпускают кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации. Этот антиген включает 3 очищенных липида 0,03% 1,3-дифосфатглицерина (кардиолипин), 0,27% фосфатидилхолина (лецитин) и 0,9% холестерина в абсолютном этаноле. Препарат выпускают в ампулах по 2 мл. Срок хранения — 4 год. Инактивированные вирусные диагностикумы используют в реакциях связывания комплемента, нейтрализации и торможения гемагглютинации. [c.487]

Реакция пассивной гемагглютинации по Бойдену позволяет выявлять агглютинины к растворимым аллергенам и гаптенам вследствие введения в реагирующую систему эритроцитов, соединенных с антигеном. Процесс соединения антигена с эритроцитами называют сенсибилизацией, а полученный таким образом искусственный корпускулярный антиген — сенсибилизированными эритроцитами. В РПГА используют эритроциты барана или человеческие О группы крови. В первом случае исследуемую сыворотку предварительно освобождают от гетерофильных антител к форсмановскому антигену поверхности бараньих эритроцитов. Эта реакция уже более 20 лет широко используется в исследовательских и прикладных целях благодаря своей чувствительности, позволяющей определять 0,003 — 0,006 мкг N антител в [c.215]

Относятся к семейству Pi ornaviridae, роду энтеровирусов. Строение вириона такое же, как у вируса полиомиелита. E HO вирусы вьвделены в особую группу кишечных вирусов вследствие полного отсутствия патогенного действия на лабораторных животных. Выделяют 34 серовара разделение основано на свойствах специфического антигена вирусного капсида, нейтрализуемого типоспецифическими антигенами. 12 серотипов способны к гемагглютинации, некоторые серотипы спонтанно элюируют. [c.133]

ГТХ не только угнетает реакцию гемагглютинации под влиянием миксо-Бирусов, но сам способен вызывать гемагглютинацию. Барнет [50] показал, что эта способность ГТХ ноБЫшается после воздействия на него вируса и уменьшается при обработке мочевиной. Результатом разрушающего действия мочевины на ГТХ [14] является уменьшение его вязкости, потеря гемагглютинирующих свойств и способности угнетать реакцию гемагглютинации и, наконец, исчезнование антигенных свойств. ГТХ обладает относительно невысокой антигенной активностью. [c.163]

Основой метода послужило наблюдение Ландштейнера [113 , показавшего, что вещества простого строения, сходные или идентичные детерминантной иммунологической группе антигена, могут образовывать комплекс с антителом и тем самым конкурентно тормозить реакцию между антигеном и антителом. Предполах ают, что чем ниже концентрация вещества, способная вызывать торможение реакции преципитации, тем ближе сродство между ним и детерминантной группой антигена. При изучении групповых веществ крови можно применять как метод, основанный на торможении реакции гемагглютинации под действием специфической антисыворотки, так и метод, основанный на торможении преципитации растворимых в воде групповых веществ специфической преципитирующей антисывороткой. Если о степени торможения преципитации судить по количеству азота антител [114, 115]. то можно достичь более высокой точности, чем при использовании реакции торможения гемагглютинации с применением серии разведений ингибитора. Оба метода дают ценную информацию о структуре групповых веществ, однако метод торможения гемагглютинации требует меньшего количества групповых веществ, чем метод с использованием реакции торможения преципитации. Эти два метода определения структуры детерминантных групп групповых веществ крови обсуждаются Кабатом [116[ и Уоткинс и Морганом [117]. [c.179]

Аденовирусы, насчитывающие по меньшей мере 31 антигенный тип, составляют отдельную группу микроорганизмов, вызывающих у человека инфекцию преим[уществеино дыхательных путей н глаз. Вирусы, входящие в группу, обладают общим группоспецифическим антигеном, обнаруживаемым реакцией связывания комплемента, и типоспецифическими антигенами, которые выявляются в реакциях нейтрализации и торможения гемагглютинации. К важным свойствам аденовирусов относятся устойчивость к эфиру, относительная устойчивость в широких границах pH и способность к размножению, сопровождающаяся цитопатиче-скими изменениями в различных культурах клеток человека и обезьян. [c.42]

Анализ вариантов А/Меш/1/71 (H3N2) с использованием тестов ингибиции гемагглютинации показал наличие по крайней мере трех ненерекрывающихся антигенных участков [111]. [c.133]

Основные альтернативные тесты — это ELISA, РИА или реакция гемагглютинации. Б первых двух случаях в лунках пластиковой панели для микротитрования адсорбируют антиген (1 ч) и затем отмывают остаток несвязавшегося антигена. Далее в каждую лунку вносят по одной капле исследуемого [c.136]

В реакции пассивной гемагглютинации эритроциты нагружают антигеном с помощью хлорного хрома. Такие эритроциты хранят в стерильных условиях до употребления [15]. Реакция подробно описанная в гл. 7, заключается в следующем. Добав-ляют одну каплю супернатанта к одной капле 0,5%-ной суспензии нагруженных антигеном эритроцитов барана. Оставляют в течение 1—2 ч при комнатной температуре, а затем оценивают результаты. [c.137]

Реакция пассивной гемагглютинации, когда с поверхностью эритроцитов связан чужеродный антиген, отличается высокой чувствительностью и может. быть использована для определения свободного антигена. .В этом случае применяю т лредвар ительно оттитрованную агглютинирующую сыворотку в минимальном разведении. Антиген, находящийся в растворе даже в очень незначительной концентрации, легко ингибирует агглютинацию эритроцитов сывороточными антителами. Ис пользуя стандартные ингибирующие разведения, реакцию молено учитывать количественно. [c.241]

Прямая реакция гемагглютинации — это простой, чувствительный метод титрования антител к поверхностным антигенам эритроцитов. Он. предусматривает приготовление последовательных разведений антител (объем проб 50или 100мкл) Б лунках панели. для микротитрования с U-образны м дном с [c.241]

В контрольны х лунках, не содержащих сыворотки, не должно наблюдаться спонтанной агглютинации клето к. Такая проблема редко вюз нижает при использовании свежих клеток, обладающих высоким отрицательным поверхностным зарядом. Если же используют эритроциты, нагруженные растворимым антигеном ( для постановки реакции пассив ной гемагглютинации), поверхностный заряд зачастую уменьшается, и вследствие этого 1П0является воз1можность спонтанной агглютинации. Эту. проблему можно решить, применяя для приготовления разведений раствор, содержащий белок. При по-станов ке пря мых реакций в этом, как правило, нет необходимости. [c.245]

Пассивная гемагглютинация осуществляется таким же образом, как и титрование антител к собственным антигенам эритроцитов. При этом используют оерию последовательных разведений антител в рядах панели для микротитрования, добавляя нагруженные антигеном эритроциты и определяя титр антител путем оценки картины осаждения эритроцитов через несколыко часов после их добавления. Вторую стадию, когда добавляют антиглобулин, можно проводить согласно методике, описанной в разд. 4,1. [c.259]

После промывания эритроцитов приступают к сенсибилизации их антигеном. Отмытые эритроциты в объеме от 0,1 до 1 мл смешивают с антигеном, количество которого определяется его качеством и способностью адсорбироваться на эритроцитах. Смесь антигена с эритроцитами помещают в термостат на 1—2 ч, а иногда, по условиям опыта, на более лродолжительное время. После инкубации взвесь сенсибилизированных эритроцитов центрифугируют, отмывают 2—3 раза изотоническим раствором хлорида натрия и из промытого осадка готовят 0,5—1% взвесь эритроцитов для постановки реакции гемагглютинации. Приготовленная взвесь может храниться в холодильнике при температуре 3—4°С до появления признаков гемолиза. [c.125]

В крови больных брюшным тифом и паратифами с 8— 10-го дня болезни появляются антитела к 0-и Н-антигенам соответствующего возбудителя. Образующиеся антитела легко обнаружить с помощью реакции агглютинации Видаля или реакции пассивной У1-гемагглютинации. [c.225]

Более чувствительным методом диагностики туляремии служит реакция пассивной гемагглютинации, дающая положительный результат с конца 1-й недели заболевания. Реакцию ставят объемным способом в полистероловых пластинах с лунками. Перед постановкой реакции исследуемые сыворотки инактивируют прогреванием при 56 °С в течение 30 мин и истощают бараньими эритроцитами (см. с. 103). Из инактивированной сыворотки готовят ряд последовательных двукратных разведений (от 1 10 до 1 2560) на изотоническом растворе хлорида натрия с 1% нормальной кроличьей сыворотки. Приготовленные таким образом разведения разливают в лунки пластин по 0,5 мл. В качестве антигена используют туляремийный зритроцитарный диагностикум, представляющий собой взвесь консервированных формалином бараньих эритроцитов, сенсибилизированных ту-ляремийным антигеном. К каждому разведению сыворотки прибавляют по 1 капле 2,5% взвеси диагностикума. [c.266]

В последнее время к обычным методам анализа липидных антигенов, таким как пассивная гемагглютинация или торможение гемагглютинации, добавились методики, основанные на опосредованном комплементом лизисе липосом, содержащих антиген (Zemmour et al., 1984), и процедуры определения антител, связанных с иммобилизованным на твердой фазе липидным антигеном (Bro khaus et al., 1981 Kannagi et al., 1983). В этой главе мы рассмотрим только процедуры последнего типа. [c.159]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология