Характеристика препаратов нуклеиновых кислот

Характеристика препаратов нуклеиновых кислот [c.71]

Среди лабораторных методов очистки, фракционирования и анализа структуры белков, нуклеиновых кислот и их компонентов совокупность различных хроматографических методов занимает центральное место. Ни один другой метод не может сравниться с хроматографией по широте количественного диапазона. Начиная от препаративных колонок объемом в несколько литров, на которых можно вести фракционирование граммовых количеств препарата на первых этапах выделения фермента, через разделение близких по своей природе компонентов очищенной смеси веществ, количество которых измеряется миллиграммами или долями миллиграмма, этот диапазон простирается до микроанализа аминокислотного состава белка, когда на колонку вносят сотые доли микрограмма исходного гидролизата. Вне конкуренции остается и разнообразие физико-химических параметров, по которым может осуществляться хроматографическое фракционирование молекулярные размеры, вторичная или третичная структура биополимеров, растворимость, адсорбционные характеристики молекул, степень их гидрофоб-ности, электрический заряд и, наконец, биологическое сродство к другим молекулам. [c.3]

В этом варианте препарат в виде тонкого слоя помещают в пробирку поверх среды, плотность которой обычно меньше плотности выделяемых частиц, и затем подвергают центрифугированию. Под действием приложенной центробежной силы частицы движутся в виде отдельной полосы через градиент, который служит лишь для того, чтобы предотвратить размывание зоны, или полосы в результате конвекции. Этот исключительно полезный метод, очень широко применяемый как для аналитических, так и для препаративных целей, используется для выделения и характеристики частиц всех размеров, начиная от таких крупных объектов, как вирусы, ядра и митохондрии, и кончая рибосомами, а также чистыми белками и нуклеиновыми кислотами. [c.250]

Многие современные методы исследования белков и нуклеиновых кислот базируются на использовании радиоактивных изотопов. Замена одного или даже многих атомов молекулы биополимера их радиоактивными изотопами в подавляющем большинстве случаев практически не изменяет физико-химических характеристик и физиологической активности этих молекул. Вместе с тем, колоссальная чувствительность методов обнаружения радиоактивности позволяет уменьшить количества используемых в эксперименте препаратов до тысячных долей микрограмма. В исследованиях индивидуальных, содержащихся в организме в очень малых количествах белков и нуклеиновых кислот это обстоятельство играет решающую роль. Однако из самого существа метода вытекают два серьезных затруднения в его использовании, могущие служить источниками ошибок при трактовке результатов эксперимента. [c.155]

Методы электрофоретического разделения в полиакриламидном и агарозополиакриламидном гелях широко используются в настоящее время для фракционирования нуклеиновых кислот. Преимуществом этих методов является их простота и возможность контролировать ве-нДичину пор геля. При наличии маркёров с известной молекулярной массой или коэффициентом седиментации очи могут быть использованы для характеристики относительной молекулярной массы выделенных препаратов нуклеиновых кислот. [c.173]

Тиурам, открытие в резиновых смесях 6696, 6783, 7550, 7551 Тифен. аналитическая характеристика препарата 8059 Ткани, определение дегидроаскорбиновой кислоты и Ре-аскорбин. кис.лоты 6978 нуклеиновых кислот 8382 общей серы 7367 Ткани водоупорной противогнилостной и комбинированной пропитки, озоление 6845 Ткани животных анализ 6433 извлечение жира 7712 определение гликогена 7531 кокарбоксилазы 7203 [c.392]

Настоящий справочник отличается от имеющихся тем, что в нем не только описана химическая структура и биологическая роль основных биохимических компонентов живой клетки, но и охарактеризованы пути метаболизма данных компонентов в живом организме. Он состоит из семи разделов, в каждом из которых в алфавитном порядке дана соответствующая тepминoлorиЯi В разделах Белки , Нуклеиновые кислоты , Углеводы , Липиды приведены структурные формулы и показана биологическая роль биохимических компонентов клетки, описаны и проиллюстрированы схемами основные пути распада и синтеза важнейших биологически активных молекул. В разделе Ферменты содержатся сведения о типах ферментативного катализа, скорости ферментативных реакций, единицах измерения ферментативных реакций, о принципах классификации ферментов, регуляции биосинтеза и активности ферментов. Раздел Витамины включает характеристику отдельных представителей водо- и жирорастворимых витаминов. Особое внимание уделено ферментным реакциям, в которых участвуют витамины, приведены данные о содержании витаминов в продуктах питания, о суточной потребности человека в витаминах, о применении витаминов и витаминных препаратов в медицинской практике, сельском хозяйстве и т. д. В разделе Гормоны -освещены достижения по биохимии пептидных, белковых и стероидных гормонов. Рассмотрены вопросы биосинтеза, механизм действия гормонов на молекулярном уровне, взаимодействие гормонов с [c.3]

Переход от этой в основном упорядоченной конформации к отдельным цепям беспорядочного клубка приводит к изменению молекулярных размеров, которые проявляются в изменении светорассеяния или свойств, основанных на внутреннем трении макромолекул. За изменениями кажущейся плотности и двукратным уменьшением кажущегося молекулярного веса ДНК за счет диссоциации двойной спирали можно проследить при помощи ультрацентрифугирования в градиенте плотности (гл. IV). Наиболее наглядным доказательством существования перехода спираль — клубок в ДНК является значительное изменение ультрафиолетового спектра поглощения (гл. V). Кроме этих физико-химических методов, однозначным критерием целостности нативной спиральной структуры служит биологическая активность некоторых препаратов ДНК. Авери и др. [3411 обнаружили, что контакт некоторых бактерий с растворами ДНК может привести к трансформации наследственных характеристик микроорганизмов. Эта трансформирующая активность , которая исчезает после денатурации нуклеиновой кислоты, может быть использована в качестве наиболее чувствительного средства определения доли молекул, присутствующих в нативной двойной спирали [342, 343]. [c.127]

На основании этих данных строят график хроматографического опыта. На горизонтальной оси откладывают номера фракций или объем элюируемой жидкости, а на вертикальной оси — вышеуказанные характеристики фракций На графике также строят кривую нарастания концентрации (градиент) соли. Для качественной и количеств вейной оценки этого этапа очистки необходимо иметь характеристики исходной вируссодержащей жидкости до нанесения на колонку. На основании этих данных рассчитывают эффективность концентрирования и очистки виру-са на обменнике нроцент выхода вируса и процент очист-ки его по белку и нуклеиновой кислоте (см. раздел Кри терии чистоты вирусных препаратов ). [c.115]