Типы культуральных систем

Флаконы и пробирки для культуры ткани, обеспечивающие поверхность роста 5—200 см , известны любому исследователю, работающему с культурами. Самыми большими стационарными флаконами, обычно используемыми в лаборатории, являются флаконы Ру или их пластиковые одноразовые аналоги. Эти сосуды обладают поверхностью для роста клеток 175—200 см (в зависимости от типа сосуда), требуют для роста клеток 100—150 мл среды объем газовой фазы составляет 750— ЮСО см В этих сосудах можно получать 2ХЮ диплоидных клеток и до 10 гетероплоидных клеток. При необходимости получения, например, 10 ° клеток придется использовать более 100 одинаковых культур, так что все манипуляции с клетками придется воспроизводить не менее 100 раз. Кроме того, для поддержания роста такого количества культур потребуется термостат С рабочим объемом 100 л. Ясно, что настало время, когда для увеличения масштабов получения клеток следует использовать более эффективные культуральные системы. Для получения большого количества клеток, зависимых от субстрата, следует использовать более совершенную технику культивирования это позволит более производительно использовать обслуживающий персонал, а также существенно повысить от- [c.74]

Рис. 16.4. Разные типы биореакторов (упрощенная схема). Л. Реактор с механическим перемешиванием. Б. Барботажная колонна. В. Эрлифтный реактор с внутренней рециркуляцией. Г. Эрлифтный реактор с внешней системой рециркуляции. Стрелки — направление потока культуральной среды.

Симпатическая нервная система содержит адренэргические или холинэргические клетки. Симпатические ганглии содержат оба типа клеток, а также не нейрональные клетки. Если ганглионарные клетки новорожденных крыс выращивают в отсутствие не нейрональных клеток, то они продуцируют только норадреналин и образуют характерные синаптические везикулы адренэргических нейронов. В случае если такие клетки присутствуют, то продуцируется медиатор ацетилхолин [1]. Затем было показано, что совсем не обязательно наличие не нейрональных клеток, сама культуральная среда, в которой они растут, обусловливает производство адренэргических или холинэргических клеток. Сигнал к развитию определенного типа клеток подает белок М 45 000), который выполняет роль своеобразного переключателя клеточной дифференциации. Стало возможным даже идентифицировать клетки в процессе переключения, поскольку они образуют одновременно холинэргические и адренэргические синапсы. [c.321]

В процессе полного смешения размножение культуры происходит в ферментаторе при интенсивном перемешивании и аэрации Во всем объеме культуральной жидкости условия должны быть одинаковыми При этом в ферментаторе могут быть созданы условия, соответствующие любой точке кривой размножения культуры, выращиваемой периодическим способом Процесс полного смешения может быть организован по типу системы "турбидостат" и "хемостат" [c.306]

Выделение, очистка и разделение веществ сорбционными методами может быть осуществлено в виде статического процесса, когда в системе устанавливается равновесие между растворенным веществом на взвешенном в растворе адсорбенте, и в виде динамического процесса или процесса, осуществляемого в сорбционных колонках. Оба метода широко применяются для аналитического и препаративного разделения и выделения антибиотиков, а также в производстве последних. Наиболее известным процессом первого типа является адсорбция стрептомицина из культуральной жидкости на активированном угле. Ко второму типу относится распространенный процесс сорбции того же антибиотика на карбоксильных смолах. В настоящее время процессы первого типа ( статические ) в подавляющем большинстве случаев уступают место колоночным процессам. Это объясняется рядом причин, из которых две Являются решающими, а именно увеличением емкости сорбции веществ при переходе от статического процесса к динамическому [1] и возможностью значительного усиления разделяющей способности сорбционного метода при переходе к динамическому процессу. Эффективность последнего равна эффективности серии сорбционных одноактных процессов, повторенных сотни, а иногда и многие тысячи раз, подобно тому как метод ректификации разделения жидких смесей значительно более эффективен по сравнению с простой перегонкой. [c.54]

Многообразие применяющихся в микробиологической промьппленности процессов и аппаратов для концентрирования обусловлено, с одной стороны, большим ассортиментом производимых целевых продуктов (клеточные препараты, биополимеры, аминокислоты, антибиотики, органические растворители и др.), а с другой — различными объемами перерабатываемых культуральных жидкостей и требуемой степенью чистоты получаемого продукта. Важно не только правильно выбирать подходящий тип аппарата, позволяющего с наименьшими потерями количества и качества провести концентрирование продукта, но и добиться высоких экономических и экологических показателей. В неустойчивых биологических системах, где возможна потеря активности продукта, пользуются щадящими методами концентрирования, исключающими повреждение целевого продукта. [c.26]

Двухфазная система в принципе состоит из толстого слоя затвердевшей питательной среды, покрытого тонким слоем питательного бульона (рис. 9.1). Чтобы приготовить такую систему, частично заполняют сосуд горячей средой, содержащей 2—3% агара. После затвердения агарового слоя на него наливают с соблюдением правил асептики небольшое количество питательной среды, засевают ее и инкубируют. Для выращивания аэробов культуральный сосуд помещают на качалку, что обеспечивает хорошее снабжение кислородом и перемешивание среды во время инкубации. Культура развивается в жидкой части среды, но постепенно клетки диффундируют в твердую питательную среду и значительно концентрируются. Таким способом можно получить популяции с плотностью более 10" клеток/мл, причем данный метод пригоден для выращивания бактерий любого типа. [c.364]

Для получения бактериальных клеток из культуральной среды существуют два типа фильтрации осадочная и мембранная. Для осадочной фильтрации используют высокопористые материалы. Обычно фильтрующая система состоит из подложки фильтра (фильтровальной бу- [c.426]

РИСТОМИЦИН — антибиотик, действующий на грамположительные микроорганизмы, устойчивые к применяемым в лечебной практике антибиотикам выделен из культуральной жидкости Proa tinomy es fru tiferi сорбцией па сульфокатионитах типа Дауэкс-50. Р. — амфотерное соединение, получено в виде кристаллич. моносульфата кристаллизацией из 50%-ного пропанола. Элементарный состав 52,51% С 5,48%Н 4,6%N 1,5%S 1,35% азота аминного [а]д=—120° (С 0,58%, вода). Р. содержит две аминные группы. Мол. вес, рассчитанный по сере и амин-пому азоту, близок к 2100. Р. имеет специфич. поглощение при 280 ммк, j° Vjn=45. При хроматографии на бумаге в системе к-бутанол—пиридин—и-пропанол — уксусная кислота — вода (20 10 5 3 32) Р. разделяется на два биологически активных компонента А и Б. При действии слабых р-ров щелочей (0,01н.), а также при сорбции па анионитах в ОН -формеиз компонента А образуется компонент I, а из Б — II, Уд. биологич. активность компонентов I и II ниже, чем активность исходных комионентов. [c.339]

Помимо цитсплазматической экспрессии дрожжевые системы позволяют секретировать гетерологичные белки в культуральную среду. Существует несколько причин, по которым секреция белкового продукта оказывается предпочтительной. Многие из человеческих белков, представляющих терапевтический интерес, секретируются клетками одних типов, тогда как действие их направлено на другие клетки. Эти белки часто бывают богаты цистеином, а множественные дисульфидные связи как раз служат основным препятствием для успешной ренатурации полипептидов, продуцируемых Е. oli. [c.209]

Исходный сульфидный минерал растирают до состояния пудры и в количестве 0,5—1 г засыпают в стеклянную ячейку. Затем в ячейку приливают 50 мл питательного раствора и вводят 4 мл культуральной жидкости с концентрацией бактериальных клеток 10 —10 кл/мл. Исходная величина pH раствора должна составлять 2,5 и ниже в зависимости от типа минералов. В рабочую ячейку помещают также минеральный электрод, подключенный к системе рН-метра. Ячейку устанавливают на качалку, которая круглосуточно находится в термостате при температуре около 28 С. Ежедневно производят измерения ЭП минерала, ОВП и pH раствора. С интервалом в сутки в растворе определяют количественное содержание элементов, входящих в состав минерала. Продолжительность эксперимента, как ггравило, состаВляет 7—12 суток. В конце эксперимента производят количественный подсчет бактериальных клеток. Для оценки интенсивности бактериального окислительного процесса параллельно ставят опыты без бактерий — холостые , в которых контролируют те же параметры, что и в опытах с микроорганизмами. [c.118]

Первая полимерная система позволила сконцентрировать вирус японского энцефалита из культуральной вирус-содеряшщей жидкости за один этап почти в 400 раз без снижения вирусной активности. Вторая и третья полимер ная системы концентрировали вирус в 15 и 32 раза соответственно. Шмидт [714] отделил с помощью полимерной системы декстрансульфат — полиэтиленгликоль гемагглю-ТИНИН аденовируса тип 26 от инфекционных частиц, изменяя соотношение и концентрацию полимеров и молярность [c.93]

Многие биологически активные белки высших эукариот синтезируются в форме предшественников, подвергающихся секреции из клеток. В ряде экспериментов бьшо обнаружено, что если белки такого типа (например, гормон роста быка, активатор тканевого плазминогена человека, у-интерферон человека, прохимозин быка) в процессе синтеза в бактериальной или дрожжевой клетке остаются в цитоплазме, то они переходят в нерастворимую и неактивную форму. Поэтому создание продуцентов, обеспечивающих секрецию и сопутствующую ей модификацию белка, является крайне важной задачей генетической инженерии и биотехнологии. Большое внимание уделяется дрожжам, у которых ряд белков эффективно выводится из клеток в окружающую среду. В отличие от бактерий в клетках дрожжей в процессе секреции может происходить гликозилирование и правильная укладка эукариотических белков. Особо следует отметить, что большинство штаммов S. erevisiae не вьщеляет в культуральную среду протеазы, что в еще большей степени повышает перспективность данной системы для создания высокопродуктивных штаммов, секретирующих в окружающую среду целевые белки. [c.318]

Биотехнологические процессы принципиально отличаются от процессов химического синтеза и могут быть двух типов периодическими и непрерывными. Специфика биотехнологических процессов состоит в том, что в них участвуют живые ьслетки, субклеточные структуры или выделенные из ьслеток ферменты и их комплексы. Это оказывает довольно существенное влияние на процессы массопередачи (обмена веществ между различными фазами - перенос ьсислорода из газообразной фазы в жидкую) и теплообмена (перераспределение тепловой энергии между взаимодействующими фазами). Поэтому одним из важнейших компонентов биореакторов является система перемешивания, обеспечивающая однородность условий в аппарате, оптимальность массопередачи между фазами реактора, между культуральной жидкостью и клетками и т. д. [c.29]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология