Инкубация проб

Содержимое пробирок тщательно перемешивают и ставят в термостат при 25° С на 60 мин. После инкубации пробы охлаждают,, устанавливают ноль спектрофотометра по контролю и измеряют оптическую плотность пробы. Количество молочной кислоты в пробе рассчитывают учитывая все разведения. [c.28]

По окончании инкубации пробы вынимают из термостата, помещают в лед и приливают равный объем охлажденного 5%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Осадок белка удаляют центрифугированием, в безбелковом растворе определяют неорганический фосфат. [c.59]

Еще одним элементом разбавляющей воды является ингибитор процесса нитрификации. Расход кислорода на нитрификацию (т. е. на окисление азота аммиака) в величину БПК не включается. Однако при анализе слабозагрязненных сточных вод, когда концентрация С-со-держащих веществ мала, к концу 5-суточного периода инкубации пробы эти вещества оказываются полностью израсходованными, и в склянке усиленно развиваются процессы К-окисления, осуществляемые автотрофной микрофлорой. Расход кислорода на К-окисление достаточно велик и при малом расходе кислорода на С-окисление вследствие малой концентрации С-содержащих веществ ошибка за счет нитрификации Может оказаться существенной. [c.58]

Пробирки помещают в термостат на 1,5 ч. Периодически помешивая их содержимое стеклянными палочками. По окончании инкубации пробы вынимают из термостата. В опытную пробу добавляют 0,3 мл раствора уксусной кислоты и кипятят ее на водяной бане 2— Змин. Отфильтровывают содержимое каждой пробы через маленький фильтр в чистую пробирку, отмечая ее соответствующим номером. [c.168]

Определение БПК производится в натуральной или в соответственно разбавленной пробе воды по разнице между содержанием растворенного кислорода в -склянке в момент постановки опыта и после определенного периода инкубации. Пробы воды для определения БПК не консервируют, а анализируют сразу после отбора. [c.80]

После щелочной инкубации пробы тщательно охлаждают до 0° и центрифугируют. Осадок (белки, углеводы и другие примеси) промывают при 0° охлажденным 0,5 и. КОН, затем отбрасывают, а щелочные гидролизаты (экстракт нуклеиновых кислот) объединяют. [c.35]

Опыты по определению БПК показали, что за время инкубации проб, содержащих меламин и циануровую кислоту, потребления кислорода практически не было. [c.147]

БПК — биохимическая потребность в кислороде, или количество кислорода, использованного при биохимических процессах окисления органических веществ (не включая процессы нитрификации) за определенное время инкубации пробы (2, 5, 8, 10, 20 суток), мг Ог/мг вещества [c.6]

В пробы, содержащие 1 мл субстратной смеси (1 мкмоль пиридоксаля, 1 мкмоль АТФ и 0,02 мкмоля Zn +), вносят 0,2—1,0 мл гомогената или экстракта ткани и необходимое количество буфера до общего объема 2 мл. При использовании в качестве среды для гомогенизирования изотонического раствора сахарозы в пробы вносят 0,25 мл гомогената или экстракта ткани. Ферментативную реакцию начинают инкубацией проб при 37 °С в течение 15—60 мин и останавливают путем прогревания проб на кипящей водяной бане в течение 3 мин. Контрольные пробы фиксируют аналогичным образом немедленно после внесения в субстратную смесь гомогената или экстракта ткани. Фиксированные пробы охлаж- дают и сохраняют при О—4°С до последующего определения пиридоксальфосфата. Содержание пиридоксальфосфата в фиксированных пробах в течение 3—4 ч не снижается. Следует подчеркнуть, что процедуры, связанные с инкубацией, фиксацией, хранением проб и последующим определением пиридоксальфосфата, необходимо проводить в темноте или при красном свете для защиты пиридоксальфосфата от разрушения. [c.77]

В 10 пробирок разливают по 0,7 мл смеси компонентов и по 0,2 мл раствора pH 5-фракции. В каждую пробирку доливают по 0,1 мл суспензии микросом. При указанных выше соотношениях навески ткани и буфера гомогенизации (буфер А), а также конечных объемах раствора pH 5-фракции и суспензии микросом каждая проба содержит 1—2 мг микросом (по белку) и 2—4 мг pH 5-фракции (по белку). После тщательного перемешивания 8 проб инкубируют в термостатированной бане при 37 С в течение 40 мин. 2 пробы (контроль на адсорбцию радиоактивности) оставляют на 40 мин в ледяной бане. После инкубации пробы охлаждают в ледяной бане. [c.356]

Смесь I —для инкубации проб с меченой аминокислотой— не содержит аминокислоты, аналогичной меченой (лизина), имеет в своем составе буфер и соли. В табл. 32 дано приготовление смес на 100 проб, объемом по 0,1 мл. [c.362]

Для определения ИБС отбор пробы осуществляли специальными стеклянными трубками непосредственно у стенки трубы сразу после шурфования на глубине нижней образующей трубопровода, ввинчивая их в грунт, стараясь не нарушить естественной плотности грунта, что сказалось бы на результатах определения. Трубки представляли собой стеклянные цилиндры длиной 50 мм с внутренним диаметром 13 мм, торцы которых подогнаны под резиновую пробку пенициллинового флакона. Сразу после отбора вводили радионуклидный индикатор N32 804 на отрезке стальной проволоки из мягкой стали, предварительно погруженном в раствор Ка2 804 удельной активности 1 МКи и высушенном [25]. Подобную технику введения метки применялись при изучении сульфатредукции в торфах и иловых отложениях с использованием в качестве носителей стеклянных палочек и капилляров или же в более поздних работах отрезков серебряной проволоки. Это позволило не только существенно упростить и ускорить внесение индикатора в плотный монолит грунта по сравнению с техникой инъекций или почвенной болтушкой, но и обеспечить его равномерное распределение по объему почвы в цилиндре. Инкубацию пробы осуществляли, закрыв цилиндр после введения индикатора резиновыми пробками от пенициллиновых флаконов и зафиксировав их в специальных штативах для сохранения герметичности (рис. 10). [c.38]

Рис. 10. Керн для пробы и штатив для инкубации проб

Поскольку определение интенсивности биогенной сульфатредукции в грунтах траншей трубопроводов было предпринято впервые, если не считать единичного опыта в содово-засоленных почвах, были уточнены некоторые методические особенности отбора проб и определения этой величины в данной экологической нише. В частности, определили сроки отбора проб и место их отбора в шурфах, температуру и оптимальные сроки инкубации пробы с радионуклидным индикатором (табл. 7-9). [c.42]

Тип грунта ИБС, мг. ат. 8 кг в сут при цду инкубации пробы (сут [тельности [c.43]

М сахарозу, 100 мкМ ЭГТА и 50 мМ имидазол (pH 8,0). В пробу объемом 5 мл вносят ФИТЦ до конечной концентрации 50 мкМ и белок СР до концентрации 2—3 мг/мл, после чего инкубируют 15 мин при комнатной температуре при постоянном перемешивании на магнитной мешалке. После инкубации пробу разводят раствором того же состава до объема 40 мл и центрифугируют 60 мин при 45 ООО д. Полученный осадок суспендируют в среде, содержащей 100 мМ КС1, 100 мкМ ЭГТА и 50 мМ имидазол (pH 7,5), до концентрации белка [c.366]

Адаптационные свойства микроорганизмов все же не беспредельны, а потому целый ряд органических веществ (отходов производства) не усваивается микроорганизмами. В технике очистки сточных вод к категории биологически неокисляемых отнесено большое число веществ, но это не всегда означает принципиальную невозможность микробиологического окисления. Много чаще биологическое окисление оказывается в принципе возможным, но проходит с такими ничтожно малыми скоростями и требует столь длительной адаптации, что практически в условиях работы очистных сооружений окисление не наблюдается. Самым простым критерием оценки биоокисляемости органического вещества служит экспериментальное определение БПК. Если величина БПК определена (т.е. происходило потребление кислорода), вещество относят к категории окисляемых, если же БПК оказывается равной нулю (за длительный период инкубации пробы — более 5 сут)—к категории биологически неокисляемых. [c.165]

Экспериментально БПК опн определяют по появлению следов нитритов ШИ нитратов. Дпя получения БПКпшш требуется длительный период инкубации, продолжительность которого зависит от характера исследуемых примесей, концентрации бактерий, степени их адаптации. Обычно он больше 5 сут и может доходить до 30 — 40 сут. Дпя городских сточных вод он достигает примерно 8 — 15 сут. Поскольку вести оперативный контроль за работой сооружений, получая результаты анализов только через 8 — 15 дней, крайне неудобно, то выполняют определение БПК5, которая принята в качестве стандартной характеристики почти во всем мире. Следует помнить, что БПКпош, — объективная величина, характеризующая степень загрязнения воды. В то же время БПК — лишь неопределенная часть БПК ош зависящая от характера окисляемых веществ и условий инкубации пробы. [c.59]

Гидразинолиз пептидов. К высушенному пептиду добавляют несколько капель безводного гидразина, запаивают в толстостенной ампуле и инкубируют 6—16 ч при 115°С. По окончании инкубации пробу быстро упаривают в вакуумном эксикаторе над концентрированной H2SO4. Остаток растворяют в нескольких каплях дистиллированной воды и смешивают с равным объемом бензаль-дегида. Образуется густая эмульсия, которую можно разделить на фракции лишь центрифугированием. Бензальдегидную фазу удаляют с помощью тонкого капилляра, а водную фазу упаривают. Остаток растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды и хроматографируют в бутанольной системе. [c.290]

Определение БПКз Для производственных сточных вод не всегда надежно, так как ход потребления кислорода для каждого их вида имеет специфические особенности. Поэтому для промышленных вод необходимо определение полной БПК до начала нитрификации. Период инкубации проб для различных производственных вод различен. [c.16]

Определение БПКполн сточных вод. В присутствии большого количества промышленных стоков, которые могут замедлять процессы биологического окисления городских сточных вод, рекомендуется кроме БПКз определять БПКполн, заканчивая инкубацию пробы при образовании нитритов в количестве 0,1 мг/л. [c.64]

Особые случаи. Когда анализируется вода, прошедшая полную очистку с интенсивным процессом нитрификации, нитрифицирующие бактерии продолжают метаболизировать во время инкубации пробы. При этом потребляется дополнительное количество кислорода и значение БПК очищенной воды получается завышенным. В этом случае ход определения следует модифицировать следующим образом пробу подкисляют до получения рн от 2 до 3 и выдерживают ее в течение 15 мин. Затем нейтрализуют до установления pH от 7 до 7,4. Для заражения разбавляющей воды в нее добавляют 5 мл/л свежеотстоенной очищенной воды. Полученное таким образом значение БПКб должно быть откорректировано с учетом небольшого количества органических веществ, внесенных при инокуляции. [c.347]

Экспериментально БПКполн определяют по появлению следов нитритов или нитратов. Для получения БПКполн требуется длительный период инкубации, продолжительность которого зависит от характера исследуемых примесей, концентрации бактерий, степени их адаптации. Обычно он больше 5 сут, и может доходить до 30—40 сут. Для городских сточных вод он достигает примерно 8—15 сут. Поскольку вести оперативный контроль за работой сооруженйй, получая результаты анализов только через 8—15 дней, крайне неудобно, то выполняют определение БПКв, которая принята в качестве стандартной характеристики почти во всем мире (в Финляндии— БПК ). Следует помнить, что БПКполн — объективная величина, характеризующая степень загрязнения воды. Продолжительность периода инкубации, обеспечивающего получение БПКполн, зависит от условий инкубации, но величина БПКполн от этих условий не зависит. В тоже время БПКз — лишь неопределенная часть БПКполн. зависящая от характера окисляемых веществ и условий инкубации пробы. [c.94]

В пробы вносят по 100—400 мкг белка митохондрий, например печени крысы (обычно в 0,1—0,4 мл буферного раствора), субстрат (тирамин, серотонин или другие моноамины) по 1 мкмолю (обычно в 0,2 мл буферного раствора) и 0,1 М К—Ка-фосфатный буфер (pH 7,4) до конечного объема 1,8 мл. Инкубацию проб проводят в атмосфере кислорода при 37 °С в течение 60 мин в водяной бане. По окончании инкубации пробы фиксируют добавлением 0,2 мл 50% раствора ТХУ (конечная концентрация 5%). Образующийся осадок отделяют цен-триф ированием (центрифуга ЦУМ-1, 600 g, 3 мин). В надосадочной жидкости определяют содержание аммиака методом изотермической отгонки по Конвею с последующим проведением дихлоризоциануратной реакции. Для этого в наружное отделение чашки Конвея, края которой предварительно покрывают смазкой, помещают 0,7 мл надосадочной жидкости, а в центральное отделение чашки — 1 мл 0,5 н. раствора серной кислоты. После добавления к испытуемому раствору 1,5 мл насыщенного водного раствора карбоната калия чашку быстро закрывают и оставляют при комнатной температуре на 17—20 ч. Аммиак, вытесненный карбонатом калия в наружном отделении чашки Конвея, поглощается в центральном отделении серной, кислотой. После окончания отгонки в центральное отделение чашки Конвея прибавляют по 0,5 мл раствора салицилата натрия, а затем цр 0,5 мл дихлоризоцианурата калия. Через 30 мин содер-жймое центрального отделения чашки Конвея количественно переносят в мерную пробирку, в которую затем добавляют бидистиллированную воду до общего объема [c.18]

Так, например, если прирост оптической плотности после инкубации пробы с реакФивом Эллмана составил 0,087, то [c.227]

Так же как и в случае многих других эмпирических методов фракционирования, весьма маловероятно, чтобы исследователь, применяющий тепловую денатурацию белков, имел хоть какое-то представление о поведении многих, если не всех, белков, присутствующих в смеси, не говоря уж о таких подробных сведениях, которые даны на рис. 3.15. Однако о поведении определенного интересующего иследователя фермента можно судить, нагревая небольшие пробы при различных температурах с интервалами в 5°С. Время инкубации важно только для получения воспроизводимых результатов инкубация проб в течение 1 или 60 мин даст кривые одинаковой формы, но сдвинутые по оси температур. Тем не менее следует учитывать, что если инкубация в течение 1 мин очень удобна при работе с объемом 1 мл, то почти невозможно за такое короткое время нагреть и быстро охладить большой объем жидкости. Во время нагревания раствора до нужной температуры и последующего ее снижения происходит дальнейшая денатурация. [c.86]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология