Гель-фильтрация непрерывная

Е. РАЗДЕЛЕНИЕ БЕЛКОВ НЕПРЕРЫВНО ПОВТОРЯЮЩЕЙСЯ ГЕЛЬ-ФИЛЬТРАЦИЕЙ [c.228]

Движение подвижной фазы в тонкослойной хроматографии может быть ступенчатым, прерывным или непрерывным. Тонкослойную хроматографию можно комбинировать с тонкослойным электрофорезом, тонкослойным изоэлектрическим фокусированием, тонкослойной гель-фильтрацией и т. д. [c.6]

При двумерном разделении белков и пептидов возможны различные комбинации методов электрофорез с градиентным гелем и изоэлектрической фокусировкой [212], гель-фильтрация с изоэлектрической фокусировкой [213], гель-фильтрация с электрофорезом [214], двумерный электрофорез с различными буферными системами [215—218], двумерная хроматография с различными растворителями [219—221] и хроматография в сочетании с электрофорезом или изоэлектрической фокусировкой. Райт и др. [222] оценивали результаты одно- и двумерного разделения сложных смесей белков, подсчитывая число разделенных полос, и установили, что двумерный электрофорез на геле акриламида дает большее число полос, чем периодический или непрерывный градиентный электрофорез на геле акриламида, изоэлектрическая фокусировка или изоэлектрическая фокусировка, сопровождаемая непрерывным градиентным электрофорезом на геле. [c.518]

Основная причина низкой скорости фильтрации смол, эмалей и лаков заключается в том, что согласно квантовой механике частицы не могут пребывать в покое, находясь в определенной точке пространства, а находятся в непрерывном движении. В дисперсной системе при движении частиц силы притяжения превалируют над силами отталкивания и вызывают образование гелей, слизистых пленок, приводят к взаимной коагуляции золей. [c.219]

Полное удаление всех побочных вещ,еств и нерастворившегося полимера (в форме геля) совершенно необходимо для равномерного непрерывного прядения и для получения плотной нити, имеющей небольшие отклонения по денье. Это достигается тщательной фильтрацией на фильтр-прессе соответствующего типа. Фильтр-прессы заряжаются ватой, материалами из шерсти, хлопка или даже синтетических волокон, не растворимых в применяемых растворителях фильтр-материалы служат до тех пор, пока работа под избыточным давлением не вызовет необходимости их замены. Обычно должна фильтроваться каждая партия раствора полимера перед поступлением на прядение. Часто применяется вторая фильтрация на фильтр-прессе, после которой прядильный раствор подается насосом прямо из хранилища к прядильным головкам. Иногда используются фильтр-пальцы и предохранительные фильтры, объединенные в фильерный блок. [c.366]

Важным преимуществом непрерывного способа ксантогенирования является возможность применения мощных растирающих (измельчающих) устройств, позволяющих исключить первую фильтрацию. Этот эффект достигается благодаря разрушению волокнистой структуры гель-частиц, которое происходит только при напряжении сдвига выше 10 МПа. Растиратель, в котором создаются такие напряжения, может работать только в непрерывном режиме (например, при использовании шнека). При периодическом способе из-за короткой продолжительности выгрузки (10-15 мин) чрезмерно воз- [c.184]

Реакцию цитраконилирования проводят так же, как и реакцию малеинирования, в 8 М растворе мочевины, содержащем 10 мг/мл белка, в автотитраторе. Величина pH поддерживается на постоянном уровне с помощью непрерывной подачи 10%-ного раствора NaOH. К раствору белка в три приема при тщательном перемешивании прибавляют 30 молярных эквивалентов цитраконового ангидрида (в расчете на количество аминогрупп). В конце реакции смесь обессоливают диализом или гель-фильтрацией. [c.112]

ТОГО, с ПОМОЩЬЮ ТСХ можно контролировать результаты разделения, проведенного другими способами, например перегонкой, колоночной хроматографией, рекристаллизацией и т. п. Можно также использовать ТСХ для предварительной оценки структуры хроматографируемого соединения. Область применения ТСХ, которая с самого начала ее развития была достаточно широкой [38, 76], еще более расширилась благодаря универсальности метода (непрерывное и двумерное элюирование, электрофорез и гель-фильтрация в тонком слое). Благодаря своим преимуществам метод ТСХ часто вытесняет, а во многих случаях уже вытеснил бумажную хроматографию, в которой также используется плоскостное расположение хроматографической системы. Одпако в последнее время количество опубликованных статей, посвященных ТСХ, несколько уменьшилось, несмотря на то что разработаны новые модификации метода, увеличивающие его разрешающую способность и чувствительность [22а, 54а]. [c.86]

Дитрич [96] разработал приспособление для непрерывного фракционирования белков и мукополисахаридов методом непрерывной гель-фильтрации и электрофореза. [c.143]

Затруднение в практическом использовании сефадексов возникает в связи с ограниченной химической устойчивостью декстранов, находящихся в набухшем состоянии. Постепенно окисляясь кислородом воздуха и гидролизуясь, полимерная сетка сефадекса непрерывно изменяет структуру, что отражается на режиме гель-фильтрации и воспроизводимости анализа Однако [c.120]

Концентрация солей или белка в образце не должна быть слишком высокой, если требуется оптимальное разделение. Осадок белка, полученный с помощью сульфата аммония, растворяют в минимальном объеме буфера, а перед обессоливанием на колонке этот раствор следует развести буфером по крайней мере в два раза концентрация белка в растворе должна быть не выше 30 мг/мл. Белок, выходящий из колонки, если он не крашен и не регистрируется непрерывно на УФ-мониторе, может быть определен с помощью теста с трихлоруксусной или надхлорной кислотой. Присутствие сульфата аммония можно выявить в пробе с хлоридом бария (если буфер колонки содержит фосфат, используйте хлорид бария в H l, чтобы не спутать осадок сульфата бария с осадком фосфата бария). Помните, что колонка для гель-фильтрации должна быть предварительно уравновешена буфером, который будет замещен белком. Объем буфера, которым уравновешивают колонку перед нанесени- [c.32]

Ферментный термистор успешно применяют в качестве инструмента специфического контроля в гель-фильтрации, ионообменной и аффинной хроматографии [11]. Поскольку ферментный термистор можно использовать для непрерывного определения активности ферментов непосредственно в неочищенных пробах, с его помощью можно идентифицировать и локализовать отдельные компоненты сложной хроматограммы, например на начальных стадиях процесса очистки фермента (рис. 29.4). Кроме того, в аффинной хроматографии при элюировании ферментам часто сопутствуют их коферменты, сильно поглощающие в УФ-области, что затрудняет непрерывный контроль за содержанием фермента по УФ-спектрам или спектрофотометрически регистрируемым изменениям концентрации NAD(P)H. Таким образом, в аффинной хроматографии калориметрическое определение активности элюированного фермента имеет определенные преимущества. [c.467]

Намывные фильтры работают в режиме шламовой и стандартной фильтрации, что позволяет вести процесс при высокой скорости— 150—200 л/(м2-ч). Для поддержания высокой скорости фильтрации в некоторых случаях непрерывно дозируют фильтрующий материал в вискозу. Важное значение в этом случае имеет тип фильтрующего материала. Применяемый на ряде производств порошок поливинилхлорида со средним размером частиц 250 мкм обладает рядом недостатков. При таком крупном размере частиц не удается получить слой с малыми размерами пор. Уменьшение же размера частиц приводит к их проскоку, так как они обладают малой степенью анизодиаметрии. Кроме того, поли-в винилхлорид обладает малой адгезией к гель-частицам, что не дает возможности для реализации наиболее эффективного режима стандартной (адсорбционной) фильтрации. В качестве фильтрующего материала предложено использовать [79] химически модифицированное коротко нарезанное целлюлозное волокно МНВ. Поскольку отношение длины волокна к диаметру составляет 200—350, исключается возможность проскока и загрязнения фильтрата. В то же время целлюлозное волокно МНВ обладает высокой адсорбционной способностью, что дает возможность получать вискозы с высокой степенью чистоты [69, 70]. [c.158]

Следует также учитывать, что во время созревания вискозы, особенно в результате дорастворения и переэтерификации ксантогената, количество гель-частиц размером более 15 мкм в вискозе уменьшается. Это особенно заметно при ее фильтрации без закупорки и вр время созревания при повышенной температуре. Поэтому можно ожидать, что при непрерывных методах получения, очистки и созревания вискозы ее качество должно улучшаться,. а содержание гель-частиц — уменьшаться удаление из вискозы тель-частиц <15 мкм возможно только при использовании метода ультратонкой фильтрации. [c.22]