Холат натрия

Получение препарата лецитиновых липосом. а. Метод быстрого удаления детергента. Препарат яичного лецитина освобождают на роторном испарителе от органического растворителя и растворяют в холате натрия, приготовленном на 50 мМ трис-НС1 буфере, pH 7,8, в молярном соотношении фосфолипид—детергент, равном 2 1 (м. м. лецитина — 800 Да, м. м. холата — 450 Да). Для удаления детергента раствор лецитина пропускают дважды через колонку с анионитом Dowex 1X4 (20—50 меш), уравновешенную 50 мМ трис-НС1 буфером, pH 7,8. Размеры колонки в случае использования 50 мг лецитина составляют 1x7 см. Выход липосом с колонки регистрируют по мутности вытекающего раствора, содержащего везикулы. [c.375]

Отдельно показана формула ионного детергента дезоксихолата натрия с молекулярной массой 414 холат натрия отличается от дезоксихолата наличием еще одного гидроксила в связи с полициклической частью молекулы. Отметим также, что детергент Берол 172 [c.183]

Холат натрия — 20%-ный раствор (pH 7,8). [c.423]

Характер концентрационной зависимости молярной солюбилизации может быть различным для разных конкретных систем. Например, при солюбилизации этилбензола в растворах калиевых мыл жирных кислот (рис. 22, а) величина линейно возрастает в широкой области концентраций. В случае же олеата натрия молярная солюбилизация остается постоянной в некоторой концентрационной области выше ККМ, после чего начинает резко возрастать при дальнейшем увеличении концентрации (рис. 22,6). Иногда обнаруживается ступенчатое повышение солюбилизирующей способности с концентрацией ПАВ (например, в случае биологически активного полуколлоида—холата натрия [26]). Но во всех случаях общей является тенденция к возрастанию солюбилизирующей способности при увеличении концентрации солюбилизатора, что связано с полидисперсным характером и лабильностью мицеллярных структур. [c.81]

Авторы дайной работы обратили внимание на то, что n продажной октилсефарозе L-4B фирмы Pharma ia имеются какие-то особо гидрофобные примеси. Часть исследуемого ими фермента сорбировалась на колонке так прочно, что ЭГ ее не снимал. Для элюции этой доли фермента нужно было использовать 1 %-ный раствор холата натрия. Столь прочное задержание части фермента было связано именно с особенностями матрицы, поскольку при внесении на новую порцию сефарозы препарата, ранее снятого с колонки эти-ленгликолем, часть его снова так же прочно сорбировалась на матрице. Можно предположить, что при модификации сефарозы в октиловом спирте присутствовали более высокомолекулярные примеси. [c.188]

Получение препарата S R. Препарат Кейлина—Хартри (получение см. на с. 407) суспендируют в 0,1 М фосфатном буфере (натриевые соли), содержащем 0,2 мМ ЭДТА, pH 7,4. Содержание белка в суспензии доводят до 30 мг/мл. Стакан с суспензией помещают на лед и при хорощем перемешивании (магнитная мешалка) медленно добавляют холат натрия (pH 7,4) из 10—20%-ного раствора до конечной концентрации 1%. К суспензии, содержащей детергент, небольшими порциями шпателем добавляют мелко растертый сульфат аммония из расчета 144 г/л. После добавления каждой трети требуемого количества сульфата аммония pH суспензии проверяют и при необходимости доводят до 7,4 концентрированным раствором аммиака. Смесь оставляют при хорошем перемешивании на холоде на 1 ч и после этого добавляют сульфат аммония из расчета 61 г/л. pH суспензии проверяют и при необходимости доводят до 7,4. Спустя 20 мин смесь центрифугируют при 40 000gf в течение 1 ч. Прозрачный краснооранжевый супернатант сливают в охлажденный мерный цилиндр через 4 слоя марли, избегая вспенивания и загрязнения супернатанта рыхлым слоем осадка. [c.427]

Фосфат натрия — 0,1 М раствор, (pH 7,4), содержащий 1,5%-ный холат натрия. [c.432]

Смесь центрифугируют 30 мин (во всех случаях здесь и далее центрифугирование проводят при 22 000 ), осадок отбрасывают. К прозрачному, зеленовато-коричневому супернатанту добавляют твердый сульфат аммония до насыщения 40% (0,086 г/мл). Через 10 мин смесь центрифугируют в течение 15 мин. Светло-оранжевый супернатант отбрасывают, зеленовато-коричневый осадок растворяют в 20 мл 0,1 М фосфатного буфера (pH 7,4), содержащем 1,5% холата натрия. К прозрачному раствору добавляют насыщенный раствор сульфата аммония до тех пор, пока не появляется легкая, но заметная муть. Обычно это количество составляет около 7,5 мл (насыщение сульфата аммония — 24—26%). Смесь оставляют на 30 мин, затем центрифугируют 20 мин. Небольшой осадок отбрасывают. К прозрачному супернатанту добавляют насыщенный сульфат аммония до насыщения 37%. Для расчета необходимого количества сульфата аммония пользуются формулой, приведенной на с. 200. [c.433]

После добавления сульфата аммония иногда выпадает темный вязкий осадок, который сильно прилипает к стенкам стеклянного стакана. Рекомендуется осаждение сульфатом аммония проводить прямо в центрифужном стакане раствор сульфата аммония добавляют по каплям из делительной воронки, а содержимое стакана при этом постоянно встряхивают. Смесь центрифугируют 20 мин после 10 мин инкубации. Осадок растворяют в 16 мл 0,1 М фосфатного буфера (pH 7,4), содержащего 1,5%-ный холат натрия. Снова добавляют насыщенный сульфат аммония до появления легкой мути. Через 30 мин смесь центрифугируют 20 мин, осадок отбрасывают, а супернатант насыщают сульфатом аммония до 36%. Через 10 мин смесь центрифугируют 20 мин. Осадок растворяют в 12 мл 0,1 М фосфатного буфера (pH 7,4), содержащего 1%-ный твин-80. К раствору добавляют насыщенный сульфат аммония до появления легкой мути, осадок отделяют центрифугированием 20 мин, а к супернатанту добавляют насыщенный суль- [c.433]

Определение содержания гема а в препарате цитохромоксидазы. В кювету спектрофотометра помещают 2 мл 0,1 М. фосфатного буфера (pH 7,4), содержащего 1,5%-ный холат натрия, и 0,1 мл полученного препарата. Измеряют оптическую плотность раствора при 605 нм. Затем фермент восстанавливают, добавляя несколько кристаллов дитионита. Через 10 мин регистрируют значение оптической плотности раствора при 605 нм. Концентрацию гема а рассчитывают, исходя из разности коэффициентов молярной экстинкции окисленной и восстановленной форм гема, которая при 605 нм составляет 12-10 см . Высокоочищенные препараты цитохромоксидазы, выделенные предложенным методом, содержат около 11 нмоль гема а на 1 мг белка фермента. [c.434]

Для вьщеления Ц. из митохондрий или субмитоховдриаль-ных частиц используют ПАВ, чаще всего холат или дезокси-холат натрия. Обычно чистоту Ц. выражают через отношение содержания гема а к кол-w белка. Для препаратов фермента, выделенных разл. способ1ами, этот показатель составляет 8-14 нмоль/мг. Определить точное значение этой величины пока невозможно из-за отсутствия надежных данных о числе субъединиц, действительно необходимых для функционирования фермента. [c.390]

Связь между солюбилизирующей способностью растворов и структурными изменениями в их объеме в той или иной форме отмечалась также для других коллоидных ПАВ (в растворах мыл нафтеновых кислот, биологически активного полуколлоида—холата натрия и др.). [c.160]

Эквалл исследовал растворы холата натрия [22, 261 ] и с помощью различных методов показал, что ККМ раствора равна примерно 0,040—0,044 М. Некоторые данные для абиетата приведены в табл. 12. [c.76]

Исследования солюбилизации октана, додекана, тетрадекана, бензола и циклогексана в сочетании с реологическими исследованиями этих растворов позволяют сделать заключение о наличии в водных растворах холата натрия (до 40%) мицелл симметричной формы (с разной степенью ассоциации в различных областях концентраций), становящихся более компактными после гидрофобного связывания углеводородов. [c.393]

С целью выяснения эмульгирующей способности холата натрия проведено исследование устойчивости эмульсий чистого п-ксилола и п-ксилола, насыщенного эмульгатором Т-1 (смесь моно- и диглицеридов стеариновой кислоты), в водных растворах холата натрия различной концентрации при различных соотношениях фаз. Показано, что для всех исследованных эмульсий имеется максимум устойчивости при определенных, но всегда относительно небольших концентрациях холата натрия. Сочетание двух эмульгаторов, холата натрия и Т-1 дает значительное увеличение устойчивости эмульсий (вследствие более низкого результативного межфазного натяжения), когда концентрация холата натрия не превышает 0,059 М. [c.393]

Результаты проведенных измерений предельного напряжения сдвига растворов холата натрия на границе [c.393]

В литературе неоднократно отмечалось, что различные органические вещества солюбилизируются в растворах ПАВ с разной скоростью. Так, 3. Н. Маркиной с сотрудниками показано [81 ], что по способности к солюбилизации в водных растворах холата натрия исследованные в работе углеводороды можно расположить в ряд бензол > циклогексан > > додекан > тетрадекан. Робинс и Томас [82] отметили различную способность к солюбилизации у разных углеводородов. Ими установлено, что механизм солюбилизации ароматических и алифатических соединений может существенно отличаться. К аналогичному выводу пришли и авторь работы [83]. [c.21]

Додецилсульфат натрия и холат натрия солюбилизируют гидрофобные части мембран, действуя как мыла или детергенты (рис. 12-2). [c.359]

Особенно детальному изучению был подвергнут олеат натрия [ПО], для растворов которого вблизи ККМ на кривых электропроводность—концентрация наблюдаются отчетливо выраженные перегибы и на кривых вязкость— концентрация—соответствующие максимумы. В присутствии избытка NaOH или свободной олеиновой кислоты форма кривых изменяется. Влияние на мицеллообразование двух карбоксильных групп в молекуле было обнаружено при исследовании алкилмалонатов калия [111]. Была изучена также вязкость растворов додецилсульфата натрия и на основании полученных данных сделан вывод о наличии в них мицелл сферической формы [112]. Эквалл [113], применяя измерения электропроводности и солюбилизации, определил ККМ и изучил свойства мицелл холата натрия. Диоктилсульфосукцинат натрия [c.314]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология