Белки азосочетание

В состав белков входят различные функциональные группы, которые способны участвовать во многих органических процессах — реакциях окисления-восстановления, алкилирования, арилирования, ацилирования, этерификации, галогенирования, нитрования, диазотирования, азосочетания и др. Характерные цветные реакции, которые используют для обнаружения белков [c.547]

Реакцию азосочетания широко изучали с целью химической модификации белков. Азосочетание легко протекает в нейтральной или слабощелочной среде и при низких температурах. Возможность использования [c.357]

Применение. В качестве диазосоставляющей для выявления ЗН-групп в белках, кислой 1.1] и щелочной фосфатаз и неспецифических эстераз, [2, 3] методом одновременного азосочетания [8, 9].. [c.116]

В настоящем разделе рассматриваются два типа реакций азосочетание солей диазония с белками и сочетание диазотированных белков с такими низкомолекулярными соединениями, как фенолы или амины. Продукты, получающиеся при том или ином методе азосочетания, весьма сходны, хотя они образуются по разным реакциям. [c.354]

ПАУЛИ РЕАКЦИЯ, цветная р-Щ1Я на белки, содержащие остатки тирозина и(или) гистидина (а также на эти аминокислоты), к-рую осуществляют смешиванием р-ра белка со свежеприготовл. р-ром п-диазобензолсульфокислотой в присут. Naj Oj. Синтез окрашенного соед. происходит в результате р-ции азосочетания, напр. [c.451]

Применение в приведенной выше схеме взамен этилендиамина аммиака приводит к получению соответствующих производных ЭДТА. п-Аминофенилэтилендиаминтетрауксусная кислота получена по схеме (1.1.66) [85]. Диазотнрование полученного амина и азосочетание приводит к производным ЭДТА, способным взаимодействовать с молекулами белков. [c.47]

ЭРЛИХА РЕАКЦИЯ, взаимодействие свежеприготовленной диазобензолсульфокислоты OaS eH li N с фенолами, аром, аминами, имидазолом или др. соед., способными к азосочетанию, с образованием азокрасителя. Примен. для обнаружения гл. обр. производных фенола и имидазола, в т.. 4. белков, содержащих гистидин и тирозин (предел обнацжения 10 10 М). Р-ция открыта II. Эрлихом [c.714]

Применение, В качестве диазосоставляющей для выявления SH-rpynn в белках [Пирс, 727], кислой фосфатазы [1, 2], неспецифических эстераз [3], 1М-ацетил- 5-глюкозаминидазы [4] и лейцинаминопептидазы [5, 6] методом одновременного азосочетания. [c.115]

Реакция Паули — появление вишнево-красного окрашивания при действии на белок (в содовом растворе) диазобензолсульфо-кислоты. Реакция азосочетания свидетельствует о наличии в составе белка имидазольного кольца гетероциклической аминокислоты гистидина. [c.700]

Следует иметь в виду, что антигенной активностью обладает не молекула вводимого белка в целом, а определенные группировки, разные в разных случаях. Такими группировками могут быть и искусственно введенные в белок антигены. Например, диазотированная л-аминофе-ниларсоновая кислота вступает в реакцию азосочетания с тирозинным звеном белка, и модифицированный таким образом белок (сыворотка крови лошади), будучи введен кролику, вызывает образование специфического антитела. Но это же антитело действенно и по отношению к обработанной подобным образом сыворотке других животных. Таким образом, нельзя переоценивать возможности иммунологической идентификации белков. Мы не приводим гипотез механизма возникновения антител, поскольку здесь ничего окончательного не имеется. [c.669]

Рассмотрим первый тип реакций. Амин (обычно ароматический) диазотируют путем взаимодействия с азотистой кислотой и получают соль диазония, RN2X, которая затем вступает в азосочетание с белком по типу электрофильного замещения. Достоинствами этого метода являются мягкие условия, требующиеся для проведения быстро идущей реакции азосочетания (0—25°, pH 7—9), а также то, что можно получать большое число разнообразных диазосоединений и затем использовать их для сочетания с белком. Таким способом были получены сотни азопроизводных белков, причем наибольший интерес к этим продуктам проявляют иммунологи. Связанные с этими реакциями вопросы широко рассмотрены в литературе [120—122] и в настоящем обзоре обсуждаться не будут. [c.354]

Другой подход к изучению реакции азосочетания может быть иллюстрирован работой Говарда и Вилда [140], которые исследовали азосочетание диазотированной п-арсапиловой кислоты с разными белками. Полученные азобелки чрезвычайно тщательно анализировали на содержание общего азота и мышьяка. На основании известного аминокислотного состава исходного белка и количества связанного азобелком мышьяка могут быть получены данные о природе групп белка, участвующих в этой реакции. Затем полученные данные подтверждаются путем проведения модельных реакций с соответствующими соединениями, а также проводится анализ азобелка на содержание групп, наличие которых в нем предполагается на основании полученных ранее результатов. [c.356]

Изменение соотношения мышьяк/азот в азоказеине, полученном нри азосочетании диазотированной г-арсаниловой кислоты с белком при разных условиях реакции [c.356]

Ниже приведен пример синтеза конъюгированного антигена на основе реакции азосочетания диазобензолсуль-фоновой кислоты с остатками тирозина в молекуле белка, например, бычьего сывороточного альбумина [c.23]

В табл. У1-16 приведены данные, показывающие зависимость степени протекания азосочетания диазотированной и-арсаниловой кислоты с казеином от pH среды данные по взаимодействию диазотированной п-арсани-ловой кислоты с разными белками см. в табл. У1-17. [c.356]

Однородность по составу получающихся азопроизводных белка была подтвернздена методом электрофореза. Кроме того, было показано отсутствие азосочетания с затрагиванием пептидных связей или первичных амидных групп. [c.356]

Результаты как спектроскопических, так и чисто химических исследований показали, что диазосоединения являются чрезвычайно реакционноспособными веществами по отношению ко многим функциональным группам, входящим в молекулы белков. Необходил1ая степень селективности реакции азосочетания с белками может быть достигнута, однако, лишь при использовании строго ограниченных количеств диазосоединения. [c.356]

ЭТОЙ реакции для введения в молекулы белков как простых, так и достаточно слолшых в структурном отношении фрагментов обусловлена главным образом простотой самой реакции и легкостью ее проведения. В качестве радикалов (В) группы В — СеН4 — К в соединениях, которые вводили в реакцию азосочетания с белками, исследованы остатки алифатических или ароматических кислот, эфиров и спиртов, радикалов анионного характера, морфина или стрихнина, аминокислот, полипептидов, холестерина, аспирина, хинина, оптически активных сахаров, гистамина, андростандиола, адреналина и даже типоспецифических полисахаридов оболочек некоторых пневмококков [144]. [c.357]

В период становления техники иммуносорбции (конец 50-х годов) внимание специалистов привлек амино-полистирол — коммерческий препарат низкой стоимости, который без особых затрат и потери рабочего времени мог быть использован в качестве носителя для фиксации белковых антигенов. В самом деле, аминогруппы амино-полистирола можно диазотировать нитритом натрия в разбавленной соляной кислоте. Затем с помощью реакции азосочетания в слабощелочной среде к полихмеру можно ковалентно присоединить любые белки, содержащие тирозин. Однако полученные таким способом иммуносорбенты связывали неспецифически значительные количества сывороточных иммуноглобулинов, видимо, за счет гидрофобных взаимодействий. От этого полимера как носителя пришлось отказаться. [c.244]

Наиболее часто применяемые методы синтеза КА для гаптенов с карбоксильной группой (если ее нет в исходном ФАВ, то его подвергают обычно 0-, N- или С-сукцинилированию) — метод смешанных ангидридов, карбодиимидный, азидный, имино-эфирный и т. д. [213]. Для связывания гаптенов с белками через углеродный скелет используют азосочетание. Тот же метод пригоден для любых гаптенов, если в них ввести ароматическую аминогруппу через одну из функциональных групп. Среди других методов можно отметить периодатное окисление ви-цинальных гидроксильных групп, например в гликозидной части ФАВ, реакцию Манниха по основному скелету ФАВ или с участием аминогруппы, связанной с ФАВ, и т. д. [c.144]

Среди конъюгатов ферментов с декстраном, полученным иными, чем приведенные выше, методами, можно отметить конъюгаты нуклеаз, синтезированных алкилированием полисахарида л1-нитробензилоксиметилпиридинием с последующим восстановлением нитрогрупп, диазотированием и азосочетанием с белком [70]. Конъюгаты такого типа существенно стабильнее исходных ферментов как при хранении, так и при внутрибрю-шинном введении животным. [c.181]

Пример 14-Л. Конформация карбоксипептидазы Л. В актив ном центре фермента карбоксипептидазы А содержится тирозин, а в определенном положении вне активного центра — атом цинка. Путем диазотирования и последующего азосочетания можно присоединить арсаниловую кислоту к тирозину, находящемуся в активном центре. Спектр поглощения свободного арсанилазоти-розина значительно изменяется при связывании цинка. Спектр модифицированного белка в растворе такой же, как спектр модельного цинкового комплекса. Значит, белок упакован таким образом, что место расположения цинка и активный центр находятся недалеко друг от друга. Это особенно интересный пример, так как при изучении кристаллов с помощью рентгеноструктурного анализа показано, что цинк не располагается вблизи активного центра. Однако спектр репортерной группы в кристалле белка также свидетельствует об отсутствии связывания цинка. Следовательно, структура белка в растворе не такая, как в кристаллах, используемых для рентгеноструктурного анализа. [c.406]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология