Буфер приготовление

Переваривание миозина и получение раствора тяжелого меромиозина. Тяжелый меромиозин получают перевариванием миозина трипсином при комнатной температуре. К раствору миозина добавляют имидазольный буфер, приготовленный на 0,5 М КС (pH 7,6), до конечной концентрации имидазола 10 мМ и белка 30—40 мг/мл (можно меньше). Раствор трипсина в 0,5 М K I добавляют к раствору миозина, соблюдая весовое соотношение трипсин — миозин 1 100. Через 30—40 мин протеолиз останавливают добавлением раствора ингибитора трипсина из соевых бобов в двукратном избытке по сравнению с весовым количеством трипсина 3. Трипсиновый гидролизат диализуют в течение ночи [c.394]

В ряде поздних работ в дополнение к обычным стеклянным электродам, заполненным водным раствором, использовались модифицированные стеклянные электроды с внутренними нево д-ными растворами. Было найдено, что потенциал стеклянного электрода, заполненного растворами в ДМФ, изменяется на 59 мВ при изменении pH на единицу как в хлорной кислоте, так и в буферах, приготовленных из салицилата натрия и салициловой кислоты или 2,6-дихлор-4-нитрофенола и его тетрабутилам-мониевой или натриевой соли. Диффузионный потенциал солевого моста (0,01 М раствор перхлората тетрабутиламмония в ДМФ), очевидно, зависит от природы и концентрации катиона в растворе. Для учета этого эффекта вводится специальная поправка [217]. [c.218]

Более удовлетворительные результаты при отделении железа, алюминия и хрома от обычных двухзарядных ионов получаются в случае осаждения гидратированных оксидов из несколько более кислых растворов. Для этой цели широко используют ацетатный метод, в котором значение pH поддерживается при помощи буфера, приготовленного из уксусной кислоты и ацетата аммония. [c.243]

Мы видим, что в этом примере слабое основание с pK = 9 не может так сместить равновесие диссоциации кислоты, чтобы можно было трактовать систему как буфер, приготовленный из кислоты и основания. Если бы мы здесь применили способ вычисления pH для буфера, то получили бы в результате pH = 5,0, т.е. на 0,3 больше такую ошибку нельзя допускать даже в приближенных аналитических расчетах. [c.139]

Выполнение реакции. 5—8 капель исследуемого раствора обработать равным объемом формиатного буфера, приготовленного нз 2 н. раствора муравьиной кислоты и 2 н. раствора формиата натрия, взятых в объемных отношениях 1 1, Через раствор пропустить сероводород. В присутствии Zn-+ выпадает белый осадок ZnS. [c.111]

Выполнение реакции. Обрабатывают 5—8 капель исследуемого раствора равным объемом формиатного буфера, приготовленного из 2 и. раствора муравьиной кислоты и 2 и. раствора формиата аммония, взятых в объемных отношениях 1 1, и через раствор пропускают ток сероводорода. В присутствии цинка выпадает осадок белого цвета ZnS. [c.146]

В колбу на 125 мл вливают 25 мл концентрированного раствора. К 90 мл воды в мерном цилиндре на 100 мл добавляют 3,5 мл 1 н. НС1 и доливают до 100 мл водой. Этот раствор вливают в колбу с концентрированным раствором, добавляют туда 1,25 мл 1 и. СаСЬ и перемешивают. (Замечание если клетки, которые должны промываться в этом буфере, до этого подвергались действию фосфатов или в культуральных средах, или в фосфатном буфере, необходимо иметь для начальных промывок рабочий буфер, приготовленный без СаСЬ, чтобы избежать выпадения осадка фосфата кальция. После такой предварительной промывки можно пользоваться полным буфером.) [c.129]

Хроматография на КМ-целлюлозе. К раствору белка добавляют раствор протаминсульфата (1 г/50 мл воды), доведенный трисом до pH 7,0. Полученный осадок удаляют центрифугированием. Затем к супернатанту добавляют 0,01 объема 1 М раствора триса и понижают pH до 6,0 с помощью 1 М какодиловой кислоты. Разводят рйствор до 800 мл добавлением 10 мМ триса, содержащего 1 мМ ЭДТА (pH 6,0, доведено какодиловой кислотой), и наносят его на колонку (4,5x30см) с КМ-целлюлозой, уравновешенную 10 мМ трисом, 1 мМ ЭДТА, доведенным до pH 6,0 какодиловой кислотой. После нанесения белка на колонку начинают элюцию линейным градиентом КС1. Для создания градиента используют два сосуда, один из которых содержит 1 л буфера, а другой — 1 л буфера, приготовленного на 0,2 М КС1. Скорость тока — 120 мл/ч. Фракции, содержащие более 300 единиц активности фермента в 1 мл, объединяют. [c.266]

Наиболее благоприятной для комплексообразования реакци ей среды является pH 8—10. Поэтому титрование солей метал ла трилоном Б проводят в присутствии аммиачного буфера приготовленного согласно требованиям ГФ X [c.27]

В случае определения содержания алюминия из сернокислого раствора полуторных окислов (колба емкостью 200 л л) берут 10 мл испытуемого раствора (в зависимости от процентного содержания алюминия может быть взято и другое количество) в колбу Эрленмейера, емкостью 500 мл, добавляют 80—100 мл дистиллированной воды, при этом обязательно проверяют pH раствора (0,5—1,0), приливают с избытком 0,1 N раствор трилона Б (10 мл) или 0,025 N раствор (40 мл), нагревают до кипения, охлаждают и добавляют I—2 капли 1%-ного раствора фенолфталеина и затем нейтрализуют раствором NH4OH (1 1) до слабо-розовой окраски раствора, которую устраняют осторожным прибавлением НС1 (1 1), и дают еще лишнюю каплю НС1. После этого вводят раствор ацетатного буфера (приготовление ацетатного буфера к 500 г СНзСООНа прибавляют 20 мл 80% СН3СООН, объем доводят дистиллированной водой [c.200]

Реактивы электродный буфер (трис-глициноБый), pH 8,4 амидовый черный 10Б, 1%-ный раствор в 7%-ном растворе уксусной кислоты уксусная кислота. 7%-ный раствор дистиллированная вода все реактивы для получения геля (см. в приложении к работе 19) электродный буфер, приготовленный на 8 моль/л растворе мочевины растворы для получения геля, приготовленные на 8 моль/л растворе мочевины-Оборудование см. работу 19. [c.39]

Для того чтобы иметь возможность приготовить буферные растворы с любым значением pH, необходимо иметь достаточно большой ассортимент веществ, которых изменяется постепенно. Например, буфер, приготовленный из хлоруксусной кислоты и хлорацетата натрия, имеет оптимальную емкость для pH = 2,7, так как величина рК хлоруксусной кислоты равна этому значению. В менее кислой области эффективен формиатный буфер, приготовленный из формиата натрия и муравьиной кислоты, у которой рК = 3,75. В области еще более высоких pH можно использовать ацетатный буфер, так как у уксусной кислоты рК = 4,8. В щелочных растворах часто используют аммиачный буферный растзор, содержащий смесь ионов аммония (рК = 9,2) и ам-миа1ка, а также боратный буферный раствор, состоящий из борной кислоты (рХ = 9,1) и ее натриевой соли. [c.105]

Полученные по обоим способам цифры обычно довольно точно отвечают количеству одноосновного фосфата, но, если моча содержит много органических кислот, часть их тоже оттитровывается. Титрование с фенолфталеином, однако, не совсем правильно, так как pH перехода фенолфталеина в окрашенное состояние лежит по сравнению с pH крови в более щелочной области, а для того, чтобы учесть экономию оснований (и выведение избыточных кислот), следовало бы титровать мочу от ее pH до pH крови. Это обстоятельство учтено в методе Ван-Слейка—Пальмера, где титрование ведется до pH 7,4 в присутствии имеющего эту реакцию фосфатного буфера (приготовление этого буфера см. определение pH крови по Кёллену — Хаукинсу). [c.318]

Алюминон. Растворяют 0,10 г ауринтрикарбоксилата аммония и 0,5 г желатина примерно в 50 мл воды, добавляют 10 мл раствора ацетатного буфера (приготовленного так, как описано на стр. 214) и 20 мл 2%-ного раствора бензойной кислоты в метаноле и разбавляют до 100 мл. [c.217]

Выполнение реакции. К 5—8 каплям исследуемого раствора прибавить равный объем фюрмиатного буфера, приготовленного из равных объемов [c.120]

Рис, I, Влияние карбонатного буфера на реакции химо-тршсина с фосфорорганическим ингибитором [(Н-С Н 0) ( СНз)Р(0)8( СН2)2 ( СН3) Нз О . Температура 25,0°С, pH = 9,04 i 0,02, /J= 0,05, конц. ацетонитрила 0,3-0,7 об, , [Е]д=4,2 Ю М, Ио 4,38 10 М, А - 0,05 М раствор КС1 вместо трис-буфера (приготовление буферной смеси см, текст). [c.844]

Для электронного микроскопирования биологические объекты обычно заключают в подходящий полимерный носитель и затем разрезают на тонкие слои с помощью стеклянного или алмазного ножа. При изучении макромолекул исследователь имеет дело с их раствором в подходящем буфере. Два фактора определяют выбор такого буфера во-первых, летучесть в процессе высушивания и, во-вторых, инертность к красителю . В практике чаще всего используют буфер, приготовленный на основе ацетата аммония. И хотя такой буфер летуч, не следует забывать, что в процессе высушивания образца он многократно концентрируется. Иногда такое концентрирование буфера приводит к изменению структуры или, например, агрегации молекул так, что их микроскопированне после окрашивания выявляет наличие искажений или разрушения исследуемого объекта. [c.551]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология