Ацильная миграция в белках

Механизм О-> N ацильной миграции представляет интерес для биохимиков в связи с химическими реакциями пептидов 0-ацилсерина и треонина, а также с точки зрения внутримолекулярных ацильных смещений в белках при обработке сильными кислотами и основаниями. Бергман [250] первым исследовал миграции ацильной группы в аминоспиртах. [c.156]

Ацильная миграция была положена в основу разработки химического метода специфического расщепления пептидной цепи по амидным связям, образованным остатками серина или треонина. Методика, нашедшая применение в случае фиброина шелка, состоит в обработке белка концентрированной серной кислотой. Образующиеся в результате такой обработки аминогруппы алкилируют 2,4-динитрофторбензолом и аминокислоты определяют в виде динитрофенильных производных ([660] ср. [540а]). Этот метод применяли и для изучения других белков [1787, 2573]. Действием концентрированной серной кислоты можно почти полностью превратить поли-оь-серин в соответствующий полиэфир [708]. Однако были отмечены низкие выходы, неспеци- [c.279]

Первые данные об ацильной миграции показали, что пептидные связи, образуемые аминогруппами серина и треонина, при кислотном гидролизе лабильнее других пептидных связей [52]. Более определенная информация об ацильной миграции в белках была опубликована Эллиотом [53] обрабатывая фиброин шелка концентрированной серной кислотой в течение 72 час при 21°, он получил белок, в котором произошло около 60% из числа возможных миграций при остатках серина. Количественная оценка перегруппировок в фиброине шелка основывалась на [c.128]

ЧТО, в то время как М,0-ацильная миграция часто протекает медленно и редко доходит до конца, обратная реакция протекает быстро и практически полностью. Некоторые наблюдения Танфорда [62] ставят под сомнение возможность частичной ацильной миграции в водных растворах белков при низких значениях pH. При титровании до pH 2 рибонуклеазы, лизоцима, р-лактоглобулина, яичного альбумина и сывороточного альбумина человека не было отмечено сколько-нибудь существенных признаков ацильной миграции. [c.130]

В ходе инкубации в течение 24 час при 25° может произойти частичный алкоголиз амидных групп в случае инсулина за счет алкоголиза освобождалось примерно 6,6 о всего амидного азота. Далее остатки серина и треонина в ходе этерификации могут подвергаться N.0-ацильной миграции. Ацильной миграции, по-видимому, не происходит в тех случаях, когда сложные эфиры белка получают при помощи диазометана. Пептиды с высоким молекулярным весом следует обрабатывать подобно белкам. Метиловые эфиры простых пептидов удобно получать путем растворения свободных пептидов в метаноле, насыщенном хлористым водородом, с последующим концентрированием раствора в вакууме при комнатной [c.200]

Новые возможности для синтеза разнообразных пептидных систем открывает использование внутримолекулярных перегруппировок кроме того, изучение этих реакций позволяет лучше понять различные биохимические превращения пептидов и белков. В этой области большой интерес представляют работы М. М. Ботвиник по изучению N-> 0-ацильных миграций в пептидах, содержащих остатки оксиаминокислот, и созданию на этой основе методов направленного синтеза соответствующих пептидов. В последнее время был открыт новый метод синтеза линейных и циклических пептидов и депсинептидов на основе реакций амино- и оксиацильного включения в пептидные системы (М. М. Шемякин, В. К. Антонов, А. М. Шкроб). Этот тип превращений представляет интерес и в биохимическом аспекте. [c.516]

На модельных пептидах показано, что расщепление по метионину идет с высоким выходом под действием фтороводорода [112, 133]. Реакция сопровождается Ы->-0-ацильной миграцией по остаткам серина и треонина (разд. 2.3.2). Из-за этой побочной реакции метод расщепления с помощью HF не находит применения в химии белка. [c.101]

При действии концентрированной серной кислоты на белки, содержащие спиртовые группы, образуются- соответствующие моноэфиры серной кислоты. При повышении температуры реакционной смеси от —35 до 20° происходит частичное сульфирование циклических групп [253]. Инсулин при обработке серной кислотой не теряет биологической активности [123]. При длительном воздействии увеличивалось содержание амин-ного азота и образовывалось большее количество диализуе-мого вещества при ]эазбавлении реакционной смеси водой со льдом. Этих результатов и следовало ожидать, если в указанных условиях происходили миграция ацильной группы от N к О и последующий гидролиз возникших в пептидах эфирных связей водным раствором кислоты. [c.218]

О возможности миграции ацильной группы в разбавленных водных растворах кислот высказывались различные предположения. Тенфорд [308] изучал кривые титрования нескольких подробно охарактеризованных белков (инсулин, рибонуклеаза, лизоцим, р-лактоглобулин, овальбумин и альбумин сыворотки крови человека). Он установил, что по крайней мере для указанных белков отсутствуют данные, свидетельствующие об увеличении количества аминогрупп при pH 2 — самом низком значении, достигнутом в ходе титрования. Приведенные выше данные показывают, что перегруппировка легче происходит в концентрированных водных растворах кислот. [c.222]

Другим примером миграции ацильной группы от N к О под влиянием безводного к-ислотного реагента Является обратимое инактивирование лизоцима безводной муравьиной кислотой прн комнатной температуре [167]. В этом случае ход перегруппировки контролировался путем определения содержания аминного азота и измерения активности фермента. Полное инактивирование наступало через 16 час. Помимо увеличения содержания аминного азота изменение белка выразилось также в появлении повышенного суммарного положительного заряда, что сказалось на подвижности молекулы белка при ионофорезе. В водной среде при pH 8,5 происходили Обратные изменения при pH 7,5 обращение было нет полным, если судить по ионофорезу и поглощению щелочи, [c.223]

Подобный метод мог бы оказаться особенно пригодным для расщепления пептидов, не содержащих остатков серина или треонина (помимо N-концевых остатков), например пептидов, которые образуются при расщеплении белков методом, связанным с миграцией ацильной группы (см. стр. 216—224). [c.248]