Разделение моносахаридов

На основе распределительной хроматографии на колонках с анионообменной смолой в сульфатной форме и элюэнтом этанол— вода разработан метод разделения моносахаридов и определения их микрометодом [52]. [c.76]

При гидролизе с соляной кислотой обычно применяют 2%-ные ее растворы и нагревание (при слабом кипении раствора) в течение 3 ч. Соляную кислоту из гидролизатов удаляют выпариванием раствора при низкой температуре, обработкой его слабоосновными анионитами (например, АВ-17) или нейтрализацией карбонатом серебра с последующим удалением ионов серебра действием сероводорода. При использовании гидролизата для анализа хроматографией на бумаге можно ограничиться концентрированием рас-торов. Остающаяся при этом кислота не мешает хроматографиче- скому разделению моносахаридов и их определению. [c.62]

Рис. 6. график разделения моносахаридов на колонке с ионообменной смолой [c.76]

В опытах по разделению моносахаридов в гидролизатах были использованы колонки из нержавеющей стали диаметром 1,55 мм, наполненные смесью 1,5% сукцината этиленгликоля и 1,5% силиконового масла ХР-1150) на твердом носителе газ-хром Р (100— 120 меш). В качестве газа-носителя был применен азот, скорость потока 30 мл/мин. Начальная температура в колонке была равна 180° С, программирование начиналось немедленно после введения образца в колонку. Площади пиков, записанных на хроматограмме, вырезали и взвешивали. Относительное количество моносахаридов вычисляли по соотношению площадей пиков. [c.85]

Как указывалось ранее, в гидролизатах, помимо нейтральных моносахаридов, часто присутствуют О-глюкуроновая и О-галакту-роновая кислоты. Хроматографией на бумаге с растворителями, применяемыми для разделения моносахаридов (как, например, этилацетат—пиридин—вода), уроновые кислоты не разделяются. В кислых растворителях (этилацетат—уксусная кислота—вода) значения Rf этих уроновых кислот очень близки. По этой причине не достигается на хроматограммах достаточно отчетливое разделение. [c.87]

Разделение смесей моносахаридов на компоненты представляет весьма сложную задачу вследствие близости многих свойств этих соединений, в первую очередь растворимости. Отдельные успехи были ранее достигнуты главным образом при выделении ряда моносахаридов в виде характерных производных, получение которых одновременно использовалось и для полуколичественного определения (см., например, ). В настоящее время проблема разделения моносахаридов в значительной степени решена благодаря широкому внедрению хроматографических методов, позволяющих быстро и эффективно анализировать сложные смеси сахаров, располагая микроколичествами вещества, и при необходимости проводить препаративное разделение смесей в крупном масштабе. [c.410]

Результаты, сходные с хроматографией на бумаге, при разделении моносахаридов дает метод электрофореза на бумаге . Хотя проведение электрофореза по сравнению с хроматографией требует более сложного -оборудования, разделение веществ с помощью электрофореза происходит быстрее. Известно много случаев успешного применения электрофореза для исследования смесей, которые с трудом поддаются разделению путем хроматографии на бумаге. Поэтому электрофорез является ценным методом анализа моносахаридов, дополняющим метод хроматографии на бумаге . [c.411]

Разделение моносахаридов ионным обменом [2389]. [c.325]

Для разделения и определения моносахаридов по этому методу анионообменную смолу (Т.5.В) в сульфатной форме фракционируют для получения частичек размером 10—15 мк (размер частичек имеет большое значение для количественного разделения моносахаридов). Применяют колонки размером 2x 650жл [c.76]

Более четкое разделение углеводов достигается при использовании модифицированных слоев адсорбента [74]. В случае применения слоя кизельгур-гипса, пропитанного 0,02 М раствором уксуснокислого натрия, растворителем служит этилацетат— 65%-ный изопропанол (65 35). Разделение ведут в камере, насыщенной парами растворителя. Углеводы на пластинку наносят в растворе пиридина, проявляют опрыскиванием свежеприготовленным раствором конц. серной кислоты и анисового альдегида (0,5 мл H2SO4 и 0,5 мл аиисового альдегида ъ 9 мл 95%-ного этанола). При использовании слоя кизельгур-гипса, пропитанного борной кислотой (на 4 г силикагеля 6 мл О,i н. раствора борной кислоты) растворителем служат бензол — метанол — уксусная кислота (1 3 1) и метилэтилкетон— метанол — уксусная кислота (3 1 1). Разделенные моносахариды на пластинках проявляют смесью, состоящей из 20%-ного раствора серной кислоты и 0,2%-ного раствора нафторезорцина в этаноле. Пластинки высушивают при 105° С. [c.78]

Рис. 7. Хроматограмма разделения моносахаридов в виде триметилсилиловых производных

Рис. 8. Хроматограмма разделения моносахаридов в виде ацетатов альдитолов (температура 180—220° С)

После разделения моносахаридов ленты снимают, просушивают и проявляют анилинфталатом. Количественно моносахариды могут быть определены по площадям пиков, полученным при записи проявленных электрофорегра15(1м на денситометре. Ниже приведены значения подвижности некоторых моносахаридов при электрофорезе в боратном буфере с pH 9,2 [95] [c.86]

Установление природы моносахаридов. Для установления природы моносахаридов, входящих в дисахарид, последний подвергается кислотному или ферментатив1НОму гидролизу. В полученной таким образом смеси моносахаридов последние идентифицируются одним из описанных выше методов. Чаще всего первоначальная оценка проводится с помощью бумажной хроматографии, которая очень подробно разработана для моносйхаридов. После этого смесь моносахаридов подвергают разделению методом препаративной распределительной хроматографии на носителе, в качестве которого чаще всего применяются целлюлоза, силикагель, уголь или их комбинации. Разделенные моносахариды идентифицируют в виде одного из кристаллических производных. [c.138]

В химии углеводов наиболее широкое применение получили ацетаты, бензоаты и циклические эфиры угольной кислоты (карбонаты). Эти сложные эфиры используются главным образом как промежуточные соединения для временной защиты гидроксильных групп, а также при выделении и разделении моносахаридов и для идентификации отдельных сахаров. Сложноэфирная связь в эфирах карбоновых кислот в условиях гидролиза или алкоголиза легко расщепляется, что приводит к регенерации исходного моносахарида. Именно это свойство вместе с простотой получения обусловливает использование указанных сложных эфиpoвi карбоновых кислот для временной защиты гидроксила. Сложные эфирьв других карбоновых кислот не получили широкого применения. [c.133]

Антрон-сернокислотный реагент используют также для автоматического контроля разделения моносахаридов методом распределительной хроматографии на сшитых декстранах, содержащих четвертичные ионы аммония в сульфатной форме (этанол— вода) [28, 63, 64]. Точность метода составляет 5%. Элюат смешивают с реагентом (2 г антрона на 1 л серной кислоты) в соотношении 1 2. Поршень, применяемый для подачи реагента в анализируемую систему, а также трубопроводы обычно покрывают политетрафторэтиленом для предотвращения коррозии. Далее, элюат и реагент смешиваются, и при прохождении раствора через трубопровод (внутренний диаметр 1,2 мм), покрытый политетрафторэтиленом и погруженный в нагревательную баню с температурой 100°С, проявляется окрашивание. Время реакции составляет около 1 мин Поглощение измеряют при 625 нм в 2-мм ячейке проточного типа и регистрируют автоматически. Для разделений на колонке, заполненной целлюлозой, этот метод был модифицирован [24], так как -бутанол, содержащийся в подвижной фазе (градиентные смеси вода—н-бутанол—этанол), мешает реакции между сахаридом и антроном. [c.73]

Возможность разделения моносахаридов и особенно полиспиртов на полиамидах раскрывает перспективы более широкого использования этого метода в структурном анализе гликозидов, олигосахаров и полисахаридов. [c.86]