Липиды, идентификация жирных кислот

Целью хроматографии липидов являются разделение липидов различных классов и последующее получение индивидуальных соединений с целью их идентификации и количественного анализа. В ходе изучения липидов с помощью хроматографических методов выяснилось, что многие организмы, ткани, клетки и субклеточные компоненты имеют характерный состав липидов, который можно определить, не прибегая к полному разделению и получению индивидуальных соединений. Количественный анализ липидов, полученных в результате частичного разделения первичного экстракта, часто является достаточным для установления источника, из которого были выделены эти липиды, и выяснения, с каким метаболическим состоянием (нормальным или аномальным) связан данный состав этих соединений. Практически все хроматографические методы могут быть применимы для выполнения этой задачи, однако более предпочтительны те, которые сочетают быстрое разделение с эффективной количественной оценкой. Такой подход имеет широкое применение — от определения полного состава липидов плазмы до характеристики индивидуальных липидов бактерий, основанной на анализе метиловых эфиров жирных кислот этих липидов или продуктов пиролиза последних. [c.204]

Изучение липидов устойчивой L-формы Proteus Р18. Идентификации жирных кислот из ацетонорастворимой фракции. [c.184]

Как правило, гидроксикислоты входят в состав липидов бактериальных клеток. Их представителями являются 2-гидроксипаль-митиновая, 2-гидроксистеариновая и 2-гид-роксилигноцериновая (цереброновая) кислоты. Следует отметить, что состав бактериальных липидов отличается большим разнообразием и спектр жирных кислот разных видов приобрел значение таксономического критерия для идентификации организмов. [c.288]

Разделение продуктов присоединения ацетата ртути к липидам методом ХТС использовали прежде всего для смесей метиловых эфиров [83]. Этот метод идеально дополняет газовую хроматографию сложные смеси эфиров высших жирных кислот, не разделяемые газохроматографически, можно предварительно разделить методом ХТС продукты присоединения ацетата ртути. Степень чистоты групп эфиров насыщенных кислот, а также кислот с двумя и тремя двойными связями превышает 98%. Каждая группа в отдельности была разделена методом газовой хроматографии в соответствии с длиной цепи. Газовая хроматография таких групп эфиров облегчает идентификацию отдельных компонентов и позволяет также обнаружить следы эфиров, которые не были обнаружены при хроматографировании общей пробы. Рис. 93 схематически иллюстрирует принцип описанного здесь метода. [c.178]

Анализ, основанный на изучении и сравнении метиловых эфиров жирных кислот (МЭЖК), входящих в состав липидов, получил широкое распространение вследствие его простоты и доступности. Полный,процесс идентификации включает эстерификацию липидов, метилирование входящих в их состав жирных кислот, их разделение на хроматографических колонках и количественное определение с помощью газовой хроматографии или высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Специальным образом обработанные колонки дают хорошее разрешение МЭЖК, что позволяет сравнивать их время удерживания с ранее идентифицированными липидными профилями (стандарты). Количество каждой жирной кислоты может быть рассчитано по площади хроматографического пика, а абсолютные концентрации определяют, вводя внутренний стандарт. [c.255]

Уанг с сотр. [23] предприняли широкое исследование липидов почвы. Пробу обрабатывали в течение 48 ч смесью 1,25%-ных растворов фтористоводородной и хлористоводородной кислоты (1 1) и экстрагировали смесью хлороформа и метанола (2 1), а затем раствором NaOH в метаноле с рН=11. Выделенную таким образом фракцию липидов подразделяли на классы с помощью тех. Высшие жирные кислоты подвергали метилированию и вновь разделяли на слое силикагеля, содержащего 10% НагСОз. Дальнейшее разделение и идентификацию проводили методами ГЖХ. [c.358]

Глицериды и соли жирных кислот составляют основную часть относительно нерастворимых органических веществ в сточных водах. Основными компонентами жирнокислотной фракции являются насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты с длинной цепью — лауриновая, миристиновая, пальмитиновая, стеариновая, олеиновая и линолевая [88, 89]. Значительную часть нерастворимых органических загрязнений составляют липидоподобные вещества, в том числе стерины и углеводороды. Липиды и липидоподобные вещества нерастворимы в воде и труднее разлагаются при обработке сточных вод, чем углеводы и белки. Поэтому значительные количества липидов минуют водоочистные сооружения и вносят заметный вклад в состав органических загрязнений поверхностных вод. Имеются весьма скудные сведения о превращениях относительно малорастворимых органических веществ (таких как липиды и липидоподобные вещества или жиры ), которые попадают в поверхностные воды частично из городских и промышленных стоков. Для лучшего понимания процессов разложения липидов и путей их удаления в установках для обработки сточных вод и природной воды нужно иметь аналитические методы для разделения липидов на классы и идентификации отдельных соединений в загрязненной воде. Такой подход отличается от обычного взгляда на липиды как на один широкий класс, включающий жиры, воска, масла и любые другие нелетучие вещества, экстрагируемые гексаном из подкисленной пробы канализационных или промышленных сточных вод [74]. [c.410]

В качестве хемотаксономического маркера иногда используют также липидный и жирнокислотный состав клеток бактерий. Ин тенсивное изучение жирных кислот стало возможным с развитием метода газо-хроматографического анализа. Различия в Составе липидов используют для идентификации бактерий на уровне рода и даже вида. Однако этот метод имеет определенные ограничения, поскольку содержание жирных кислот в клетках может зависеть от условий культивирования и возраста культуры. [c.195]

Старые методы разделения и идентификации липидов, основанные на классических операциях кристаллизации, перегонки и экстракции, в настоящее время в существённой степени дополнены хроматографическими методами. Особенно полезно применение тонкослойной хроматографии для разделения различных классов липидов и газо-жндкостной хроматографии (рис. 15.32) для разделения индивидуальных жирных кислот. Предварительной стадией при использовании этих методов является экстракция липидов системой растворителей—чаще всего смесью хлороформа и метанола (2 1). [c.162]