Колхицин обработка клеток

А что произойдет, если деполимеризовать все микротрубочки кортикальной системьл, обработав растительную ткань колхицином (разд. 10.3.1) Влияние такой обработки на последующее отложение целлюлозы не столь однозначно, как можно было бы ожидать. Колхицин не подавляет образование новых целлюлозных мшсрофибрилл, и в некоторых случаях клетки могут продолжать откладывать микрофибриллы, ориентированные в прежнем направлении. Однако любые изменения в расположении микрофибрилл, связанные с индивидуальным развитием клетки, полностью блокируются. Например клетка ксилем1л, у которой в норме на определенной стадии развития должны возникать регулярно расположенные утолщения клеточной стенки, в присутствии колхицина образует лишь неупорядоченные отложения внеклеточного материала. Таким образом, ранее существовавшая ориентация микрофибрилл может сохраняться и без микротрубочек, но любая стадия клеточного развития, связанная с отложением микрофибрилл, ориентированных по-иному, требует наличия интактных микротрубочек, определяющих эту новую ориентацию (риа 19-45). [c.193]

Положительной стороной метода воздействия на семена является почти полное отсутствие химерных тканей у обработанных растений, так как колхицин, проникая во все клетки семени, действует на первые митозы. Недостаток этого метода заключается в резко сниженной выживаемости, в основном вследствие задержки развития корневой системы, что крайне нежелательно при работе с ограниченным количеством семян. Этот недостаток до некоторой степени можно устранить изоляцией корешков прорастающих семян и воздействием на верхушечные точки в период прохождения первых митозов. Это позволяет значительно повысить выживаемость и обеспечивает получение почти полностью тетраплоидных, нехимерных растений (см. главу П1). Схема обработки проростков представлена на рисунке 1. Семена помещают в чашки Петри на фильтровальную бумагу (/) и в момент их наклевывания чашки переворачивают дном вверх с тем, чтобы отрастающие корешки в силу геотропизма росли вниз (2). При длине корешков около 0,5 см (что соответствует появлению первых митозов) чашки возвращают в исходное положение, а семена заливают тонким слоем раствора колхицина так, чтобы торчащие вверх корешки не соприкасались с раствором (3). Для предохранения корешков от высыхания их прикрывают влажной фильтровальной бумагой. Этим путем при использовании 0,05—0,1%-ного раствора колхицина с экспозицией 2 часа получены тетраплоиды моркови, салата, петрушки и других мелкосемянных растений. Более крупные семена при переворачивании чашки придерживают металлической сеткой. [c.64]

Как уже упоминалось, микротрубочки определяют положение аппарата Гольджи и эндоплазматического ретикулума в каждой клетке (разд. 11.4.10), а также влияют на распределение промежуточных филаментов, которые спадаются в околоядерную шапку при обработке клетки колхицином (разд 11.5.3) кроме гого, от них может зависеть и распределение актиновых нитей. Сократимое кольцо, которое постро- [c.327]

Обработка молодых растений раствором колхицина увеличивает количество наследственных структурных элементов ядра клетки — хромосом, вызывая так называемую полиплоидию, в результате чего получаются новые, более урожайные формы растений. [c.5]

Если окрасить культивируемые клетки антителами к одному из цитоплазматических белков ПФ (например, виментину), то обычно будет видна ажурная сеть нитей, окружающая ядро и охватывающая всю, цитоплазму (см. рис. 11-73). По структуре эта сеть отлична от других компонентов цитоскелета, хотя местами ее нити, по-видимому, идут параллельно микротрубочкам цитоплазмы. Вероятно, организация цитоплазматических ПФ зависит от взаимодействия с микротрубочками, так как деполимеризация микротрубочек при обработке веществами типа колхицина ведет к осаждению всей сети ПФ в виде околоядерной шапки . Можно думать, что многие ПФ цитоплазмы связаны с ядерной оболочкой и в норме оттягиваются от нее к периферии клетки микротрубочками. с которыми они соединены [c.316]

Поскольку действие колхицина связано с инактивацией веретена делящихся клеток, он влияет только на клетки, находящиеся в процессе деления. Вследствие этого эффективность обработки зависит от количества митозов в момент воздействия. Исходя из этого для полиплоид из ации используют меристема-тические ткани с максимальным количеством делящихся клеток, применяя воздействие к прорастающим семенам, молодым проросткам, точкам роста растений, пробуждающимся почкам, клубням, бутонам и т. д. [c.58]

Описанную выше методику используют для любых тканей, клетки которых перед этим культивировали в течение одного или нескольких дней. Тот же метод может быть использован и для прямого приготовления хромосомных препаратов из селезенки или костного мозга. Прямое приготовление означает, что обработке подлежат клетки, полученные из соответствующих органов в момент забоя животных. Промытые клетки инкубируют в среде 3—4 ч при 37 °С в присутствии колхицина и подвергают дальнейшей обработке. [c.418]

Доза и время обработки ядом влияют на картину К-митоза. Исход деления неодинаков в разных случаях. После действия небольших доз колхицина митоз может восстановиться, при этом не исключено образование, полиплоидных клеток. При больших дозах ядов клетки гибнут. [c.147]

Это соединение, содержащее в своем составе трополоновое кольцо, специфически и прочно связывается с тубулином. Поразительным следствием такого связывания в живой клетке является разрушение лабильных микротрубочек, в том числе участвующих в образовании митотического веретена. При обработке делящихся клеток колхицином процесс деления задерживается на стадии мётафазы (гл. 15, разд. Г.9), и образующиеся дочерние клетки обладают высокой степенью плоидности. Все это позволило широко использовать колхицин в качестве агента для получения тетраплоидных сортов цветущих растений. Аналогичное влияние на микро- [c.278]

При обработке колхицином не все клетки претерпевают удвоение числа хромосом, и часть их остаются диплоидными. В течение обработки могут иметь место повторные блокады митоза, приводящие к возникновению клеток с высокими степенями плоидности. В результате очень редко удается сразу получить так называемые чистые полиплоиды. Обычно возникают растения, состоящие из клеток различной степени плоидности. Такие растения называются химерами. Химеры могут быть переклинального, секториального илй миксоплоидного типа. У химер периклинального типа ткани одного уровня плоидности окружены одним или несколькими слоями клеток другого уровня плоидности. у химер секториального типа ткани разных уровней плоидности находятся бок о бок и как те, так и другие видны с поверхности. У растений миксоплоидного типа или мик-соплоидов ткани разных уровней плоидности беспорядочно перемешаны. [c.59]

Эффективность колхицинового метода с экспериментальной точки зрения впервые была показана Блексли и Эйвери в 1937 г. Впоследствии эти исследования были продолжены многими цитологами, генетиками, селекционерами и физиологами. Колхицин действует на все делящиеся клетки, причем способы обработки растений этим веществом могут быть различны. Им обрабатывают точки роста, семена, проростки, листья, растущие побеги, почки, клубни, корни и т. д. (рис. 88). Некоторые авторы применяли инъекции раствора колхицина в ткани растения. [c.145]

Обработка методом вакуум-инфильтрации. Для быстрого введения химических мутагенов, а также колхицина или других веществ в проростки целиком или только в клетки стеблевой меристемы отработан метод вакуум-инфильтрации. Метод заключается в том, что проростки вместе с растворами фианоло-гически активных веществ помещаются в эксикатор. Затем через шланг выкачивают воздух и доводят давление в нем до 50— 100 мм ртутного столба. Имеющиеся в растворе и тканях газы быстро (в течение нескольких минут) удаляются. После этого давление в эксикаторе доводят до нормального, раствор быстро (в течение нескольких секунд) проникает в ткани. [c.113]

Микротрубочки митотического веретена пребывают в состоянии необычайно быстрой сборки и разборки, что объясняет крайнюю чувствительность веретена к различным препаратам, способным связываться с тубулином (разд. 13.5.2). Один из алкалоидов безвременника осеннего, колхицин, использовался в лечебных целях еще древними египтянами. Молекулы колхицина (рис. 11-61) прочно связываются с молекулами тубулина (образуя эквимолярный комплекс) и препятствуют тем самым их полимеризации поэтому обработка делящихся клеток колхицином вызывает через несколько минут исчезновение митотического веретена и блокирует клетки в митозе. Вещества, обладающие подобным действием, называются антимитотическими агентами (табл. 11-3) Во многих случаях их действие обратимо, и удаление препарата дает возможность веретен образоваться вновь, а митозу завершиться. Так как разрушение микротрубочек веретена избирательно убивает многие быстро делящиеся клетки, ряд антимитотических препаратов, в частности вин-бластин и винкристин, широко используются в терапии рака. [c.303]

А что произойдет, если денолимеризовать все микротрубочки кортикальной системы, обработав растительную ткань колхицином Влияние такой обработки на последующее отложение целлюлозы не столь однозначно, как можно было бы ожидать. Колхицин не подавляет образование новых целлюлозных микрофибрилл, и в некоторых случаях клетки могут продолжать откладывать микро фибриллы, ориентированные в прежнем направлении Однако любые изменения в расположении микрофибрилл в ходе индивидуального развития, которые обычно происходят при откладывании следующих друг за другом ламелл, становятся невозможными. Кроме того, клетка, которая в норме для [c.421]

До недавнего времени функции промежуточных филаментов было очень трудно исследовать из-за отсутствия химических агентов, способных избирательно разрушать их в живой клетке, подобно тому как колхицин и цитохалазины разрушают микротрубочки и актиновые нити. Сейчас появилась, однако, возможность вводить в культивируемые клетки моноклональные антитела, специфически реагирующие с промежуточными филаментами. Инъекция таких антител в фибробласт вызывает агглютинацию виментинсодержащих филаментов в плотный комок поблизости от ядра. Как это ни удивительно, такая обработка не влияет на рост и деление клетки, а также на ее форму и подвижность. Это позволяет предполагать, что функции промежуточных филаментов слишком деликатны, чтобы их можно было выявить, рассматривая культивируемую клетку в микроскоп. [c.125]

Всем эукариотическим клеткам свойственна определенная геометрия, которая проявляется в расположении их органелл и форме поверхности. В то время как все другие компоненты цитоскелета лишь отражают эту геометрию, микротрубочки, по-видимому, часто играют уникальную роль в ее создании. Хорошо известно, например, что микротрубочки располагаются вдоль продольной оси клетки и что во многих случаях их присутствие необходимо для поддержания асимметричной формы клетки в целом. Обработка колхицином останавливает развитие длинных отростков у растущих нейронов и препятствует удлинению некоторых зародышевых эпителиальных клеток-по-види-мому, в результате подавления полимеризации их микротрубочек. В то же [c.129]

Обработка клеток цитохалазином Вив меньшей степени колхицином приводит к значительному торможению фагоцитоза и макропиноцитоза. Такого рода эксперименты выявили еще одну интересную особенность. Миграция эндосом от периферии к центру клетки зависит от функционирования цитоскелета, в частности, микротрубочек. [c.24]

У культивируемых клеток локальные процессы, связанные с функцией актина,-формирование ламеллоподий и микрошипов, фагоцитоз и т.п.-часто происходят в тех участках клеточной поверхности, около которых оканчиваются микротрубочки. Пространственная организация этих процессов заметно изменяется после обработки клеток колхицином исчезает их согласованность, ламеллоподии образуются не только на верхней стороне клетки, но и по всей ее периферии, и сама клетка, вместо того чтобы двигаться по прямой, блуждает подобно кораблю, потерявшему управление. [c.130]

В видимой картине сложных событий, происходящих при делении ядра, центральное место занимает образование и работа митотического веретена, появляющегося в цитоплазме на стадии профазы (рис. 11-40). Однако не для всех этих событий требуется присутствие веретена. Как и можно было ожидать, колхицин (вещество, разрушающее все микротрубочки в клетке) подавляет зависимое от микротрубочек выстраивание хромосом и расхождение их к противоположным полюсам. И все же в некоторых клетках, например в клетках морского ежа, поведение хроматина и ядерной оболочки после обработки колхицином не изменяется конденсация и последующая деконденсация хроматина, внезапное разделение двух хроматид в области центромеры, растворение старой ядерной оболочки и образование новой-все эти события и в отсутствие веретена проходят нормально. (Напротив, в клетках млекопитающих в присутствии колхицина могут происходить лишь ранние события митоза, и каждая хромосома остается в виде пары конденсированных сестринских хроматид.) [c.179]

Показано, что в макрофагах кинетика слияния фагосом с лизосомами не зависит от числа этих органелл в клетке и не изменяется при обработке клеток колхицином или цитохалазином В. Введение в состав мембран экзогенных жирных кислот (19 0 и 18 1) значительно снижает скорость эндоцитоза в макрофагах, но мало влияет на процесс слияния мембран. Слияние мембран эндосом и лизосом усиливает форболмиристатацетат, а также активация макрофагов иммунолигандами, тормозят — полианионы, снижение температуры, обработка веществами, устраняющими ДрН в кислых компартментах, моненсином. Процесс слияния протекает очень быстро, наступает спустя 5 мин после начала эндоцитоза. Для большинства клеток стадия переваривания веществ в лизосомах протекает спустя 30—60 мин после инициации эндоцитоза. [c.19]

Наиболее часто нарушение митоза вызывают действием водного раствора колхицина в концентрации 0,1—0,2%. Обработка колхицином прорастающих семян и конусов нарастания растений вызывает полиплоидизацию в клетках, что используют в селекции для получения исхо Дного материала с ценными признаками и свойствами. Вызвать образование полиплоидов можно и другими способами [c.183]

Следует заметить, что при обработке колхицином проросших семян далеко не все клетки оказываются полиплоидными, часть из них остается диплоидными. Такое явление называется мшсоплоидией, а организмы, в которых имеются ткани различной плоидности, — миксо плоидами. Термин ввел Немец в 1910 г, Миксоплоидия приводит к образованию химер — растений, у которых одни ткани диплоидные, а другие полиплоидные. Так, у кукурузы в год обработки колхицином в пределах одного растения и даже початка могут образоваться зерновки различной степени плоидности, что вызывает необходимость проверки числа хромосом в корнях проросших зерновок. [c.187]

Что регулирует ориентацию микрофибрплл в клетках того или иного типа, неизвестно, ио обнаружено, что обычно они располагаются параллельно некоторым микротрубочкам, которые, как предполагает их название, представляют собой вытянутые цилиндрические структуры диаметром 23—27 им, располагающиеся в пограничных слоях цитоплазмы. Кроме того, обработка колхицином, разрушающим микротрубочки, такл<е Нарушает упорядоченное располол<ение микрофибрилл, но пс мешает их образованию. По-видимому, микротрубочки каким- [c.22]

A. Нормальный апекс с диплоидными клетками. Б. Апекс после обработки колхицином во внешнем слое туирши видны полиплоидные ядра. В. Апекс после обработки колхицином. Полиплоидные ядра располагаются во внутреппем слое [c.44]

Непосредственно через вирусные фабрики проходят микротрубочки [59, 257], покрытые вирусными белками [19]. Вирионы реовирусов связываются с микротрубочками in vitro, возможно с помощью белка al [19]. Несмотря на это, трубочки не являются необходимыми для продуктивной инфекции (по крайней мере in vitro) обработка зараженных клеток колхицином не снижает выхода вируса 289]. При этом в клетках не образуются [c.292]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология