Альбумины модель молекулы БСА

Фиг. 3. Модели типичных молекул антител и для сравнения — молекулы сывороточного альбумина человека.

Определение истинной формы молекул весьма сложно, и при поиске простых моделей следует учитывать их приближенность. Например, из данных по седиментации следует, что эффективный радиус эквивалентной сферы увеличивается с 3,5 до 5,5 нм при изменении pH от 4,23 до 2,29. Одновременно суммарный заряд молекулы альбумина увеличивается с 12 до 74. Очевидно, что эффективный радиус заряженной макромолекулы при седиментации существенно превышает ее геометрический размер из-за взаимного отталкивания одноименно заряженных ча стиц. Отталкивание одноименно заряженных фрагментов в одной макромолекуле, безусловно, должно приводить к некоторому ее набуханию . Все это в различной степени относится и к размерам, установленным иными методами, так что под размерами белковой макромолекулы всегда подразумевается некое поле, эффективное для данного метода измерения. [c.550]

Из основного положения о неравновесной молекулярной упорядоченности субстрата нервного волокна вытекает, однако, что представление о взаимной связанности пептидов должно быть шире понятия химической связи, включая и очень слабые межмолекулярные взаимодействия (например, взаимные ориентации молекул). Поэтому опытам с нервами предшествовало изучение модели, близкой по лабильной упорядоченности молекул к неравновесному состоянию субстрата нервного волокна. Наиболее простой моделью такого рода является медленное (несколько метров в мин) протекание слабого раствора белка (работа проводилась на яичном альбумине) в узкой трубке, связанное с установлением известной ориентации молекул но направлению течения (рис. 22). [c.135]

Молекулу сывороточного альбумина удобнее всего аппроксимировать как эллипсоид вращения и для выражения формы и размеров использовать величины осей (далее а и Ь) и их соотношения а/Ь. Значения этих величин существенно различаются в зависимости от методов измерения и расчета и коррелируют для одинаковых условий измерения (температура, pH, концентрация и ионная сила раствора). Приняв эллипсоид враид,ения в качестве модели молекулы бычьего сывороточного альбумина, по данным, приведенным в [93, с. 71-73], было установлено, что в изоэлектрической точке при нулевой ионной силе молекула характеризуется отношением осей а/Ь, равным 3, а при ионной силе 0,05 молекула становится сферой. При любой ионной силе молекула удлиняется, если pH смещается от изоэлектрической точки. Например в 0,15 М КаС1 при значениях pH = 3,45 3,95 6,30 и 7,40 соотношение осей а/Ь составляет соответственно 5,8 3,3 2,6 и 3,3 (рис. 9.11). [c.549]

Для создания цеоаенаправленного действующего дауномицина этот антибиотик был присоединен разными методами к антителам против бычьего сывороточного альбумина (модель) или к опухоль-специфическим антителам [147, 169]. Карбодиимидный метод и метод с глутаровым диальдегидом оказались неудачными из-за сшивания молекул антител друг с другом. Конъюгаты были лишены как противоопухолевой, так и иммунологической активности. Периодатное окисление углеводной насти антибиотика и восстановительное алкилирование антител образовавшимся диальдегидом привели к получению стабильного конъюгата, который содержал 2—5 моль антибиотика на моль белка. Производные дауномицина в основном сохраняли как противоопухолевое, так и иммунологическое действие, причем чем меньше было связано антибиотика, тем выше была его активность. Селективность токсичности по отношению к клеткам, к которым были специфичны антитела, оказалась невелика, а содержание антибиотика недостаточно для исследований in vivo. Антитела как носители противоопухолевых ФАВ имеют низкую емкость, так как увеличение степени замещения белка приводит к потере антителами специфичности [170]. Поэтому обычно используют промежуточный носитель, который объединяет в единое целое обе части ФАП — противоопухолевое ФАВ и антитело или другой целенаправляющий вектор . [c.127]

Рассмотрим сначала наиболее простой случай развития межфазной прочности водных растворов глобулярных белков на границе с воздухом. Известно, что в водных растворах молекулы яичного альбумина, сывороточного альбумина и казеина находятся в виде глобул и большинство неполярных групп создают гидрофобные области внутри глобулы. При адсорбции белка на поверхности в результате избытка свободной энергии на границе раздела фаз происходят конформационные изменения адсорбированных молекул, так как нарушается равновесие сил, стабилизи-руюш их глобулу. Ранее на возможность развертывания глобул белков на границе раздела фаз указывалось в работах Александера [42, 43, 126], Пче.чипа [151], Деборина [152]. Развертывание макромолекул на границе раздела фаз сопровождается глубокими изменениями в третичной структуре, вследствие чего большинство гидрофобных групп ориентировано к воздуху. Агрегация денатурированных макромолекул и обусловливает нарастание прочности межфазного адсорбционного слоя. Возникаюш,ий при агрегации макромолекул тип структуры, образованный множеством межмолекулярных гидрофобных связей, напоминает -структуру параллельного типа. Фришем, Симхой и Эйрихом [153—155] для разбавленных растворов полимеров была разработана модель структуры адсорбционного слоя, по которой гидрофобные участки макромолекул обращены в газовую фазу, тогда как остальная часть адсорбированной макромолекулы образует как бы свободные петли и складки. Эта модель также не исключает возможности образования межмолекулярных связей, приводящих к возникновению межфазных прочных структур. [c.214]

Противопневмококковые анти хела у лошади, свиньи, быка, а возможно, и у других видов имеют молекулярный вес около 900 ООО. Некоторые антитела в крови человека, вероятно, имеют молекулярный вес, величина которого лежит где-то между этими величинами (см. [1]). Зная константу седиментации в ультрацентрифуге, константу диффузии и отношение Перрена [10] между коэффициентом асимметрии и отношением осей вытянутого сфероида, можно рассчитать форму белковых молекул. Модели типичных молекул антител и (для сравнения) молекулы сывороточного альбумина человека приведены на фиг. 3. [c.15]

Механизмы связывания. В настоящее время нельзя дать детальную картину процессов, происходящих в ходе адсорбции, хотя предложено несколько гипотез. В работах [11, 12] описаны некоторые этапы процесса адсорбции. Прежде всего при сближении с поверхностью носителя за счет переноса ионов или перекрывания электрических полей происходит перераспределение заряженных групп в молекуле реагента. Такая реорганизация позволяет преодолеть существующие силы отталкивания. На втором этапе за счет вандерваальсовых взаимодействий обеспечиваются дегидратация и связывание с поверхностью носителя. При сорбции каждой молекулы белка высвобождаются несколько молекул растворителя это приводит к значительному увеличению энтропии, которая и может быть движущей силой пассивной адсорбции [13]. На последнем этапе происходит структурная перестройка адсорбированной молекулы реагента, степень которой зависит от числа водородных связей и ионных пар. Эта модель построена на базе изучения адсорбции только двух глобулярных белков (бычьей рибо-нуклеазы и сывороточного альбумина человека), однако можно полагать, что она справедлива и для процесса сорбции любых других белков. [c.58]

Метод гетерогенного вольтамперометрического иммуноанализа больших молекул разработан Дойлом и др. [3]. В качестве модели авторы использовали сывороточный альбумин человека, модифицированный диэтилентриаминпентауксусной кислотой (ДТПУ) и меченный индием Применение индия как металла-метки может [c.61]