Флавивирусы

Флавивирусы культивируют в куриных эмбрионах и культурах тканей. [c.143]

Семейство флавивирусов включает в себя различных представителей, вызывающих соответствующие заболевания [c.143]

Вирус гепатита С — РИК-содержащий вирус. Таксономическое положение его в настоящее время точно не определено он близок к семейству флавивирусов. [c.148]

Показано, что во многих случаях культуры клеток беспозвоночных более чувствительны к альфа- и флавивирусам, чем новорожденные мышата или культуры клеток позвоночных В особенности это относится к первичному выделению вирусов Если в лаборатории имеются условия для культуральной ра боты, клетки беспозвоночных можно легко нарастить и исполь зевать для постоянной работы с тогавирусами. Для некоторых линий клеток комаров характерна высокая чувствительность к переносимым комарами альфа- и флавивирусам [3, 4], причем многие из этих вирусов способны образовывать бляшки, хотя результаты, по-видимому, до некоторой степени зависят от конкретных условий эксперимента [5], Если какой-либо конкретный метод не дал хороших результатов, имеет смысл попытаться применить другой. Например, обычно клетки комаров для культивирования и выделения вирусов инкубируют при 27—28°С, но в случае вируса денге лучшие результаты получают при повышении температуры до 32 °С [6]. Имеется ряд стандартных клеточных линий, и если размножение вируса не удается в одной из них, имеет смысл испытать другую. Подробные сведения об используемых средах приведены в при ложе- [c.73]

С МОНОСЛОЯ, зараженного флавивирусом, при первых признаках ЦПД (обычно через 2—6 сут) удаляют среду и заменяют свежей, содержащей 0,5% ЭТС. [c.92]

Флавивирусы сравнительно мало изучены и открывают для исследователей особенно широкое поле деятельности, поскольку многие из них представляют опасность для человека и, кроме того, данный род состоит из огромного количества видов. Применяемые для флавивирусов методы очистки сходны с используемыми для других вирусов. Однако и здесь имеются большие возможности для создания новых, более эффективных методов, которые позволили бы идентифицировать неструктурные белки и детально изучить механизмы репродукции. [c.105]

Проникновению ряда других вирусов в клетки может способствовать их связывание с антителами и СЗЬ в жидкой фазе. В частности, в результате взаимодействия с антителами усиливается поглощение клетками флавивирусов (в том числе вируса денге) при участии макрофагальных F -рецепторов, а связывание СЗ с вирусными частицами способствует поглощению вируса Западного Нила (также флавивируса) при участии R3. [c.78]

Флавивирусы + 30-90 Вирус клещевого и японского энцефалитов, денге, желтой лихорадки, краснухи [c.39]

Геном образует однонитевая молекула +РНК. РНК сохраняет иифекционность после выделения ее из вириона. При репликации образуется однородная мРНК. Полный геном флавивирусов транслируется в единственный полипротеин, впоследствии нарезаемый протеолитическими ферментами. После созревания дочерние популяции отпочковываются от клеточной или внутриклеточных мембран, служащих местом сборки. [c.142]

У других вирусов белки оболочки несут иные сигналы сортировки. Например, вирус герпеса представляет собой ДНК-содержащий вирус, который реплицируется в клеточном ядре, там же происходит сборка его нуклеокапсида. Затем этот вирус приобретает оболочку, отпочковываясь от внутренней ядерной мембраны в полость ЭР. Таким образом, белки его оболочки должны быть доставлены из мембраны ЭР во внутреннюю ядерную мембрану. Напротив, флавивирус отпочковывается прямо в полость ЭР. а бунъявирус - внутрь аппарата Гольджи это значит, что белки их оболочки несут сигналы, удерживающие их в мембране ЭР и аппарата Гольджи соответственно. Частицы вируса герпеса, флавиви-руса и буньявируса растворяются в полости ЭР и аппарата Г ольджи, и движутся по направлению к клеточной поверхности в точности так, как если бы они были секретируемыми белками в транс-сети Гольджи они включаются в транспортные пузырьки и выводятся из клетки по пути конститутивной секреции. [c.81]

Тема 35. ВИРУСОЛОГИЧЕСКАЯ И СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА НЕЙРОИНФЕКЦИЙ, ВЫЗВАННЫХ ПИКОРНАВИРУСАМИ, ФЛАВИВИРУСАМИ, ВИРУСАМИ БЕШЕНСТВА И ЛИМФОЦИТАРНОГО ХОРИОМЕНИНГИТА [c.240]

В семействе Togaviridae выделяют два основных рода — аль-фавирусы и флавивирусы ранее называвшиеся соответственно вирусами групп А и В. Вирусы в пределах каждого из родов имеют антигенное родство, сходные циклы репродукции и морфологические особенности в то же время вирусы, принадлежа-ш,ие к разным родам, различаются по антигенным свойствам [c.66]

В настоящее время флавивирусы выделяют в отдельное семейств Flaviviridae. — Прим. перев. [c.66]

Большинство альфавирусов формируют бляшки через 2—3 дня, а флавивирусов — через более длительный срок. Пока вирус не охарактеризован, необходимо ежедневно осматривать планшеты. [c.86]

I ежедневно осматривая флаконы, начиная со второго дня после заражения для альфавирусов и с четвертого дня для флавивирусов. [c.87]

Планшеты инкубируют 3 ч при 37 °С в герметичном контейнере, затем в каждую лунку вносят по две капли покрытия, содержащего КМЦ, на основе среды L15. Планшеты инкубируют при 37°С. Для большинства альфавирусов ЦПД проявляется не позднее чем через 3 сут после заражения, а в случае флавивирусов — через 4—7 сут. [c.90]

В описанном ниже методе для получения гемагглютинина используют монослой клеток Vero, В нашей лаборатории метод дает хорошие результаты в случае альфа- и флавивирусов при использовании среды с очень низким содержанием сыворотки. Однако высокие выходы гемагглютинина могут быть получены и на других линиях клеток млекопитающих и комаров. Ранее использовали антиген из мозга мышат-сосунков, который перед постановкой реакции обрабатывали органическими растворителями. Эти методы очень четко описаны Кларком и, Казалсом [c.91]

Лучший метод, позволяющий определить степень чистоты препаратов тогавирусов, — это электрофорез структурных белков в полиакриламидном геле в присутствии ДДС-Na. Исследованные до сих пор альфа- и флавивирусы имеют небольшое число структурных белков характерного размера, образующих при электрофорезе в геле уникальный набор. Вирионы альфавирусов содержат нуклеокапсидный белок с мол. массой 30— 35 кД и 2 более крупных гликопротеина оболочки (в некоторых случаях они не разделяются при электрофорезе) с мол. массами 45—55 кД. Вирионы флавивирусов содержат белок оболочки, обычно гликозилированный, с мол. массой 50—55<кД и 2 более мелких внутренних структурных белка с мол. массами 15 и 7 кД. [c.104]

Удобно использовать систему диск-электрофореза Лэммли [15]. Гели в виде пластин обладают преимуществами по сравнению о трубчатыми гелями, поскольку в пластине можно параллельно анализировать несколько образцов, что дает возможность с высокой точностью сравнивать степени очистки на разных стадиях. Для анализа белков альфавирусов подходит 10%-ный разделяющий гель в то же время эффективное разделение вирионных белков флавивирусов (для которых характерен широкий диапазон мол. масс) достигается в 8—20%-ном градиентном геле. В исследуемом образце (он должен содержать 10—50 мкг белка в объеме 30 мкл или менее) вирионы разрушают, добавляя 1/5 объема раствора, содержащего 10% ДДС-Na, 5% 2-меркаптоэтанола, 50% глицерина и 0,05% бромфенолового синего. Смесь прогревают 2 мин в кипящей водяной бане, охлаждают и наносят на гель в качестве контроля используют стандартный набор белков с известными мол. массами. Когда бромфеноловый синий дойдет до конца геля, электрофорез прекращают и гель окрашивают, инкубируя его 2 ч при постоянном перемешивании в растворе, содержащем 1% кумасси синего, 25% изопропанола и ЮО/о уксусной кислоты [c.104]

Выделение и культивирование тогавирусов не представляет принципиальных трудностей благодаря значительному разнообразию возможных экспериментальных систем. Для молекулярно-биологических исследований, как правило, необходим вирус в очень высоком титре. В случае альфавирусов подобные титры можно получить на культуре клеток. С другой стороны, многие флавивирусы дают в культуре более низкие титры, и это может потребовать соответствующей модификации условий эксперимента. Например, относительно высокой множественности инфекции достигают, выращивая клетки в виде монослоя на поверхности небольших культуральных сосудов. [c.105]

Моноклональные антитела к поверхностному гликопротеину Е2 альфавируса Синдбис нейтрализуют инфекционность вируса [165]. Однако моноклональные антитела к гликопротеину EU также присутствующему на поверхности этого вируса, не способны к такой нейтрализации. Тем не менее как нейтрализующие, так и ненейтрализующие антитела предотвращают летальные энцефалиты у мышей [165]. Ненейтрализующие антитела к Е1 проявляют свой защитный эффект совместно с комплементом, лизируя зараженные клетки, имеющие на поверхности антиген Е1. Моноклональные антитела к единственному поверхностному гликопротеиновому антигену вируса желтой лихорадки (флавивируса) нейтрализуют инфекционность. Наконец, следует отметить, что иммунитет к вирусу гепатита В опосредуется его поверхностным гликопротеиновым антигеном [178]. [c.147]

Сем. Togaviridae включает две основные подгруппы, альфа-вирусы и флавивирусы. Если по составу генома и структуре [c.343]

Геном флавивируса (вируса Западного Нила) также содержит 7-метилгуанозиновый кэп на 5 -конце, но он не полиаденилирован [13, 97]. Образование субгеномных мРНК при репликации флавивируса не доказано [100] известно лишь, что вирус артериита лошадей образует более короткие РНК, чем геномная [92]. [c.344]

Структурными компонентами вириона, необходимыми для адсорбции, являются гликопротеиновые выступы (пепломеры) на поверхности вирусной мембраны. У альфавирусов они состоят из двух основных полипептидов, называемых Е1 и Е2 у флавивирусов в них входит только один белок V3 [68]. Хотя для поддержания общей структуры пепломера необходимы оба белка альфавирусов, инфекционность вируса нейтрализуют антитела только к одному из них (Е2) [16, 66]. Белок Е1 отно- [c.345]

Перенос генома из вирионов, находящихся в эндоцитозных везикулах, в цитоплазму открывает путь для дальнейших этапов вирусной репродукции, включающих трансляцию, репликацию и транскрипцию геномной РНК. Эти ранние биохимические события еще плохо изучены, и в настоящее время многое остается на уровне догадок. Имеются, однако, сведения о структуре РНК SIN и SFY, опираясь на которые, можно попытаться выдвинуть правдоподобную схему этих процессов. Вирионные РНК транслируются in vitro, и поэтому есть предварительная информация о некоторых белковых продуктах. Обычно считают, что структура нуклеокапсида альфа- и флавивирусов достаточно гибкая, чтобы обеспечить диссоциацию комплекса РНК—капсидные белки при вхождении РНК в цитоплазму после слияния оболочки эндосомы с оболочкой вириона. В случае SFV при низких значениях pH нуклеокапсид сжимается в диаметре примерно на 15%, что может обеспечить раздевание РНК. Полагают, что для раздевания протеазная активность несуще- [c.347]

В клетках ВНК и EF почти все гликопротеины, обнаруживаемые на поверхности клетки, иммобилизованы в скоплениях в местах почкования вируса, т. е. свободных гликопротеинов почти нет [41]. Это послужило основой для гипотезы о том, что на конечных этапах движения гликопротеинов к поверхности клетки нуклеокапсид связывается с ними на внутренних везикулах, где происходит внутреннее почкование. У флавивирусов внутренние везикулы, видимо, служат основным местом сборки и почкования [49]1 интактные, покрытые мембраной вирусы секретируются затем из этих внутренних органелл. Но механизм почкования флавивирусов в некоторой степени отличается от рассмотренного выше, поскольку, как предполагают, один из структурных белков флавивирусов VI образует внутренний матрикс, выстилающий липидный бислой. Сборка тогавирусов в клетках членистоногих также несколько отличается от таковой в клетках позвоночных. В зараженных тогавиру-сами клетках членистоногих наблюдается некоторая везикулярная компартментализация областей, где происходит репликация вируса. В этих клетках не наблюдается поверхностного [c.358]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология