Иммуноглобулин моноклональные

Определение классов и подкласс ов антител важно для выбора способа их очистки. Классы и подклассы моноклональных иммуноглобулинов, секретируемых специфическими гибридомами, определяют прямым методом ИФА (рис. 41). [c.322]

Тот факт, что разные участки молекулы иммуноглобулина выполняют разные функции, позволяет модифицировать моноклональное антитело [c.215]

С развитием технологии рекомбинантных ДНК и разработкой способов получения моноклональных антител, а также с установлением структуры и функций иммуноглобулинов появился интерес к использованию специфических антител для лечения различных заболеваний. Работа с генами антител облегчается тем, что отдельные домены молекулы антитела выполняют разные функции. [c.224]

Еще с прошлого столетия известно, что моча больных, страдающих этим заболеванием, часто содержит необычные белки, названные белками Бенс-Джонса по имени английского врача, который их впервые описал. Однако только в 1950-х годах выяснилось, что эти белки представляют собой свободные L-цепи иммуноглобулина. Первоначально детальная структура антитела была определена путем изучения миеломных белков из мочи или крови больных или же белков от мышей, у которых были целенаправленно индуцированы аналогичные формы рака. Впоследствии появилась возможность делать В-клетки, секретирующие антитела, бессмертными путем их слияния с клетками миеломы, не секретирующими антитела. Образующиеся гибридомы стали удобным источником моноклональных антител, которые можно получить против любого желаемого антигена в неограниченном количестве (разд. 4.5.4). [c.238]

В классическом методе иммуноэлектрофореза в агаровом геле сочетание электрофореза с иммунодиффузией дает большое увеличение числа различаемых компонентов, хотя степень разрешения электрофореза при этом не повышается. В сыворотке человека таким путем можно обнаружить 20—30 компонентов в зависимости от качества применяемой антисыворотки. Линии преципитации соответствуют индивидуальным белкам, а не группам белков с одинаковой подвижностью. Обычно иммуноэлектрофорез рассматривают как источник качественной информации о белковом составе сыворотки. И действительно, он служит наиболее эффективным способом обнаружения недостаточности того или иного белка и изучения свойств моноклональных иммуноглобулинов. Описан также полуколичественный метод определения белкового состава сыворотки с применением иммуноэлектрофореза [8, 80]. Более удачным решением пробле- [c.335]

Чашечные методы [9—15] адсорбция антител на полисти-рольных чашках (химически неопределенным способом) наиболее часто используются методы двойных антител, т. е. пластиковые чашки, покрытые антителами против мышиных иммуноглобулинов, селективно связывают клетки, предварительно обработанные специфическими моноклональными антителами. [c.247]

Получение моноклональных антител с более низкой антигенностью по отношению к человеку может быть осуществлено с помощью генноинженерных методов. Моноклональные антитела, созданные с помощью этого подхода ( химерные ), включают активный центр из иммуноглобулина мыши, а остальную часть молекулы, F -фрагмент, — из иммуноглобулина человека. [c.167]

МОЩЬЮ трансфекции генов иммуноглобулинов в миеломные клетки [14-16]. Применение обычных и новых моноклональных антител подробно рассмотрено в работах [17, 18 ]. [c.38]

Моноклональными называют однородные иммуноглобулины, продуцируемые потомками одной лимфоидной клетки — клоном клеток. [c.48]

Введение в организм реципиента генов антител, которые связываются со специфическими антигенами, было названо иммунизацией in vivo. Для этого гены Н- и L-цепей иммуноглобулинов моноклонального мыши- [c.434]

Разработка новых методов профилактики и лечения многих заболеваний человека внесла огромный вклад в рост благосостояния людей в XX в. Однако этот процесс никогда нельзя считать завершенным. Так называемые старые заболевания (например, туберкулез) могут дать о себе знать вновь, как только будут ослаблены профи-лактичес1сие меры или появятся резистентные штаммы. Весьма привлекательной выглядит перспектива применения в качестве терапевтических средств специфических антител их можно будет использовать для нейтрализации токсинов, борьбы с бактериями,, вирусами, для лечения раковых заболеваний. Антитело можно уподобить самонаводящейся ракете, которая либо нейтрализует нарушителя - чужеродный агент, либо, если она оснащена боеголовкой , разрушает специфическую клетку-мишень. К сожалению, несмотря на многообещающие возможности, антитела довольно редко применялись для профилактики и лечения болезней и других патологий. И лишь в последнее время, с развитием технологии рекомбинантных ДНК и разработкой методов получения моноклональных антител и с расшифровкой молекулярной структуры и функции иммуноглобулинов, интерес к применению специфических антител для лечения различных заболеваний вновь пробудился. [c.204]

Первые успехи в изучении строения иммуноглобулинов были связаны с изучением иммуноглобулинов, полученных от больных миеломой (см. 1.4). Как уже говорилось, у таких больных в результате присутствия одного злокачественно разросшегося клона В-лимфоцитов вырабатывается огромное количество индивидуального иммуноглобулина, который сравнительно леп о отделить от всех остальных. Дальнейшие успехи в получении индивидуальных антител связаны с достижениями клеточной биологии, позволившими осуществлять слияние клеток миеломы как носителей способности к неограниченному размножению с нормальными В-лимфоцитами как носителями программы для выработки антител определенной, задаваемой экспериментатором специфичности. Получающиеся клетки, гибридоми сохраняют способность к неограниченному размножению и вырабатывают индивидуальные антитела. Так как в этом случае гибридомы происходят от одной исходной слитной клетки, то они представляют собой единый клон получающиеся из них антитела называют поэтому моноклональными антителами. [c.39]

Иммунобиотехнология объединяет производства вакцин, иммуноглобулинов крови, иммуномодуляторов, моноклональных антител и некоторьпс других. [c.6]

Рис. 163. Схема получения моноклональных антител с помощью габридом-ной техники АС — агент слияния клеток, 1 —В-клетки из селезенки иммунной мыши, 2 — культура миеломных клеток мыши, 3 — гибридизация, 4 — гибридомы, 5 — селекция и клонирование гибридом, 6 — гибридомы, образующие моноклональные антитела, 7 —- введение гибридом, образующих моноклональные антитела, в организм сингенной мыши, 8 — клетки гибридомы, образующие моноклональные антитела, культивируемые в виде культуры ткани, 9 — выращивание гибридомных клеток, образующих моноклональные антитела, в ферментаторе, 1дкж — иммуноглобулины в культуральной жидкости, 1дас — иммуноглобулины в асцитической жидкости, 10 — высаливание 1д-ов аммония сульфатом, 11 — стандартизация 1д-ов, 12 — лиофили-зация 1д-ов.

При исследовании компонентов моноклонального иммуноглобулина Гоббс [15] применил тонкослойную гель-фильтрацию сыворотки в сочетании с зональным электрофорезом и иммуноэлектрофорезом. Такое сочетание эффекта молекулярных сит и иммунной преципитации позволило обнаружить очень интересный компонент иммуноглобулина, представляющий собой половину молекулы иммуноглобулина О [26]. Парвес [27] предложил применять гель-фильтрацию в тонком слое для диагностики болезни тяжелых цепей , характеризующейся присутствием в сыворотке и моче больных аномального белка, напоминающего тяжелую полипептидную цепь иммуноглобулина О (или А). Этот пример приведен на рис. 3. [c.264]

Уолхейм и Снигурович [21] пользовались препаративным вариантом гель-фильтрации в тонком слое для изучения частоты легких цепей типа й и Я, в моноклональных иммуноглобулинах М. После гель-фильтрации в слое сефадекса 0-200 часть геля, содержащую макроглобулин, переносили в пробирки, белок элюировали, концентрировали элюат, а затем подвергали [c.264]

Био синтез и получение индивидуальных иммуноглобулинов. Иммуноглобулины синтезируются в лимфоцитах, которые образуются при диф( ренциации лимфоидной стволовой клетки. В настоящее время общепринятой является так называемая теория клональной селекции, согласно которой каждый лимфоцит может синтезировать, вероятно, только один иммуноглобулин. Групйа лимфоцитов, специализировавшихся на синтезе какого-либо иммуноглобулина, называется клоном. При обычном иммунном ответе (действие нормальной микробной флоры или заражение) про- исходит образование многих различных лимфоцитов, иммуноглобулины которых направлены на различные участки молекулярной структуры антигена. Такой ответ называется поликлональным. В некоторых случаях при гиперстимуляции иммунизации—продолжительной инъекции антигена—наблюдается преобладание относительно небольшого числа клонов это так называемый ограниченный ответ. При ограничении числа клонов практически возможно выделить чистые иммуноглобулины. Еще большие возможности возникают при моноклональном типе ответа. Такой ответ редко наблюдается при обычной иммунизации, но имеет место при дезорганизации размножения клеток — опухолях плазменных клеток. Такие опухоли можно легко трансплантировать нормальным животным, где они продолжают продуцировать большие количества гомогенного иммуноглобулина. Возможно у популяции мышей индуцировать опухоли плазменных клеток частыми внутрибрюшинными инъекциями минерального масла или рентгеновским облучением. [c.103]

Каждую реакцию иммунопреципитацни проводите с таким объемом надосадочной фракции, который эквивалентен примерно ЗХЮ клеток. Инкубируйте клеточный экстракт с 100 мкл надосадочной фракции антител нли с 10 мкл мышиной антисыворотки в течение ночи при 4 °С. Клеточные экстракты, инкубировавшиеся с моноклональными антителами, далее инкубируйте с 5 мкг антимышиных иммуноглобулинов (DAKO) и 5 мкл нормальной сыворотки кролика в течение 2 ч при комнатной температуре. [c.189]

У мышей довольно легко можно получить миеломы (плазмацитомы) (М. Potter, 1972). Эти опухоли являются потомками одной клетки (т. е. имеют моноклональное происхождение) и се-кретируют уникальные иммуноглобулины, некоторые из которых могут взаимодействовать с известными антигенами. Опухоли индуцируют у животных путем внутрибрюшного введения минеральных масел или инертного твердого пластика. Для возникновения миелом большое значение имеет генетический статус жи- [c.91]

Мнеломные белки — иммуноглобулины, продуцируемые злокачественными (мие-ломными) плазматическими клетками поскольку мнеломные клетки конкретного индивидуума представляют собой клон, продуцируемые ими иммуноглобулины относятся к категории моноклональных иммуноглобулинов. [c.465]

Для понимания многих биологических явлений необходимо выделение субпопуляций клеток, находящихся на различных стадиях дифференцировки и в различных формах специализации. Разделение клеток особенно важно для изучения иммунной системы, состоящей из множества клеток, обладающих специфическими фенотипами и функциями. Основные методы основываются на наличии специфических компонентов на поверхности выделяемых клеток, например рецепторов лектинов, антигенов, иммуноглобулинов. Их развитию в большой степени способствовала возможность получения моноклональных антител против детерминант клеточной поверхности. [c.243]

Розеточные методы [4—8] фиксация антимышиных иммуноглобулинов на эритроцитах быка (с помощью хлорида хрома) и обработка в розетках выделяемыми клетками, предварительно покрытыми специфическими моноклональными антителами (продуцируемыми мышиной гибридомой) выделение связавшихся клеток достигается селективным лизисом эритроцитов. [c.247]

Предварительные результаты подтверждают, что процесс, заключающийся в иммобилизации антител против иммуноглобулинов мыши на мерсалил-трисакриле и выделении клеток, предварительно покрытых специфическими моноклональными антителами мыши, может применяться как общий метод. Этот процесс, уже использованный в чашечных методиках , требует лишь небольших количеств указанных моноклональных антител (Бонафо и др., неопубликованные данные). Этот метод имеет хорошие перспективы использования для разделения подгрупп специфических клеток и выделения антигенспецифических лимфоцитов. [c.259]

Моноклональные антитела синтезируются отдельными клонами гибридных клеток (гиб-ридомами), которые впервые были получены в 1975 г. Келером и Мильштейном в результате соматической гибридизации клеток миеломных опухолей и В-лимфоцитов, продуцирующих антитела после иммунизации животных соответствующим антигеном. К настоящему времени отобраны такие варианты миелом (например, линии Х63-А8.6.5.3, р2/0-А и др), которые не способны синтезировать собственные иммуноглобулины, и вся гибридомная продуктивность выражается и синтезе огромного количества моноклональных антител с интересующёй исследователя специфичностью. [c.164]

В случае, когда активный центр формируют идентичные полипептидные цепи, образующие димер, конфигурация активного центра полностью симметрична. При этом избирательность связывания лиганда значительно выше, чем при асимметричной конфигурации центра, и, как следствие этого, сродство лиганда к рецептору будет весьма велико. Этот вывод согласуется с данными рентгеноструктурного анализа димера легких цепей иммуноглобулинов, связывающих тринитрофенильную группу. Последняя целиком заполняет глубокий щелеобразный карман между вариабельными районами этих целей (Л. Deisenhofer, 1982). Для сравнения можно привести реконструированную структуру активного центра моноклонального антитела против фосфорилхолина (рис. 3). Асимметричный по структуре активный центр этого антитела сформирован при участии разноименных цепей легкой и тяжелой. Расположенный в полости центра низкомолекулярный лиганд занимает небольшое пространство, контактируя лишь с несколькими из образующих его коротких участков полипептидных цепей. [c.16]

НОВ на всей их протяженности (К. Е. Мо51оу е а ., 1984). Вс внеклеточных доменах этого рецептора 28 /о остатков гомологичны остаткам вариабельных доменов легкой / цепи моноклонального иммуноглобулина человека S W, использованного в качестве эталонного. Наибольшая степень гомологии найдена для первого с Ы-конца домена пoли-Ig/ , где она составляет 36%. Именно в пределах этого домена находятся участки, гомологичные вариабельным доменам иммуноглобулинов по консервативным участкам аминокислотной последовательности (рис. 17). [c.63]

Иммуноглобулины одного класса и даже подкласса продуцируют многие плазматические клетки, а точнее, клоны плазматических клеток. Каждый из этих клонов синтезирует молекулы, отличающиеся друг от друга по аминокислотной последовательности. Это было доказано при сравнительном изучении миеломных иммуноглобулинов, т. е. иммуноглобулинов, синтезируемых клетками больных множественной миеломой или клетками перевиваемой плазмацитомы мышей. И те и другие опухоли образованы клетками одного определенного клона плазматических клеток. В том случае, когда индивидуальные миеломы (плазмацитомы) продуцируют иммуноглобулины одного и того же класса и подкласса, представляется возможным сравнить первичные структуры легких и тяжелых цепей моноклональных белков. [c.63]

Смотреть страницы где упоминается термин Иммуноглобулин моноклональные: [c.322] [c.401] [c.216] [c.216] [c.217] [c.146] [c.401] [c.19] [c.183] [c.581] [c.264] [c.253] [c.240] [c.25] [c.432] [c.47] [c.48] [c.48] [c.49] [c.62] [c.63] [c.72] [c.78] [c.80]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология