Агглютинации методы

Метод агглютинации используется также для изучения растворимых антигенов. Они связываются химическим путем с эритроцитами или частицами латекса, образуя таким образом частицы, называемые сенсибилизированными. Антитела противо-растворимых антигенов, добавляемые в суспензию таких частиц, косвенным образом провоцируют агглютинацию сенсибилизированных частиц. Этот способ называется пассивной, или косвенной, агглютинацией [9, 72, 109]. Принцип его схематически представлен на рисунке 4.3. Указанная методика позволяет также использовать антитела вместо антигенов для получения сенсибилизированных частиц. Применение моноспецифических антител позволяет в первую очередь количественно определять содержание отдельного белка в смеси белков. Если антисыворотка не является строго специфичной, то для определения количества содержащегося белка необходимо, чтобы используемые для сенсибилизации частиц антигены были очищены от примесей, которые могут реагировать с неспецифическими антителами в сыворотке. [c.98]

Рис. 4.3. Методы ингибирования пассивной агглютинации антиген (Аг) антитело (Ат) частицы (Ч) (например, частицы латекса или красные кровяные тельца).

Экспресс-диагностика основана на обнаружении в спинномозговой жидкости или крови больного специфического антигена, осуществляется с помощью латекс-агглютинации, ИФА, встречного иммуноэлектрофореза с групповыми преципитирующими антисыворотками. Эти методы приобретают особое значение при неэффективности микроскопической диагностики и посевов. [c.117]

Серологическое исследование. В сыворотках больных агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела обнаруживаются в невысоких титрах и непостоянно. В этой связи серодиагностика имеет вспомогательное значение и используется в основном при отрицательных результатах обнаружения возбудителя в патологическом материале. Обычно с сывороткой больного ставят реакцию латекс-агглютинации. Чувствительным методом диагностики является также РИФ. [c.327]

Метод агглютинации микробных ассоциаций, полученных путем смыва с плотной питательной среды всей массы выросших бактерий, рационален вследствие своей экспрессности как ориентировочный, имеющий сигнальное значение. Он позволяет обнаружить пробы воды, в которых содержатся патогенные бактерии, что облегчает дальнейшее углубленное бактериологическое изучение обследуемого водоисточника. [c.157]

Особый случай агглютинации представляет собой гемагглютинация. Метод гемагглютинации благодаря своей точности сослужил серологии отличную службу. При этом сначала экстрагируют токсин (антиген), а затем сажают его на поверхность эритроцитов. Если теперь добавить соответствующую антисыворотку, то будут склеиваться (агглютинировать) [c.324]

Инъекция сыворотки крови животного, перенесшего болезнь в легкой форме, также является средством предотвращения или лечения заболевания. Сущность этого метода состоит в действии антител сыворотки, которые разрушают или иммобилизуют соответствующие патогенные микроорганизмы. Специфическая агглютинация культур патогенных бактерий соответствующими антителами является способом идентификации патогенных микробов. [c.402]

К основным методам обнаружения реакций антиген — антитело относятся следующие а) реакции преципитации и агглютинации, в том числе образование линий преципитации, появляющихся на пластинках с агаровым гелем между лунками, содержащими антитела и антигены, которые движутся навстречу друг другу либо в результате простой диффузии, либо под действием электрического поля (при электрофорезе) б) реакция нейтрализации инфекционности вируса специфическим антителом [c.46]

Методы определения групп крови. В медицинской практике групповая принадлежность крови по системе ABO определяется реакцией агглютинации при помощи стандартных сывороток, содержащих антитела по отношению к антигенам (агглютининам) эритроцитов А и В. [c.490]

В 90-х годах начаты разработки по экспресс-анализу наркотических веществ. На основании большого практического опыта по созданию диаг-ностикумов сотрудниками лаборатории иммунохимии ИФАВ РАН выполнено комплексное исследование по разработке методов экспресс-анализа опиагов, барбитуратов, эфедрона на основе реакции латексной агглютинации, которые можно применять в полевых ус ювиях в отсутствие специального оборудования. без предварительной подготовки анализируемого образца. Время анализа составляет 2-3 минуты. [c.199]

Выполнение работы включало три основных этапа I) направленный синтез высокоспецифических реагентов, являющихся основой получения коньюгатов антигенов, и последующая наработка иммуноспецифических субстанций антител к наркотикам и монодисперсных полимерных суспензий с заданными свойствами реакционно-способных комплексов гаптенов либо их специфических антител с ферментом или их макромолекулярным носителем (белок, полимер) 2) разработка иммунохимического метода анализа для определения опиатов, каннабиноидов и гидазепама на основе полученных реагентов с использованием латексной агглютинации 3) разработка экспериментально-технологического регламента и пакета нормативно-технической документации для выпуска опытно-промышленной серии иммунодиагностикумов для быстрого определения наркотиков в биологической жидкости человека. Создание и испытание опытных серий наборов тест-систем для получения необходимых рекомендаций для внедрения в клиническую практику. [c.200]

Разработка метода определения опиатов на основе латексной агглютинации. На основе полученных реагентов - антител к опиатам и конъюгата морфина меченого латексом, был разработан метод для выявления опиатов в биологических жидкостях организма с использованием латексной агглютинации. Для этого непосредственно перед работой разводили латексный конъюгат до 1% концентрации буферным раствором. Специфичные антитела против опиатов разводили в плашке, используя серию двойных последовательных разведений. Для проведения опыта в микрокамеры с коническими лунками вносили по 10 мкл сыворотки каждого разведения и быстро добавляли равную аликвоту раствора латекса, модифицированного морфином или конъюгатом морфин-овальбумин. В качестве контроля использовш1и лунку, в которую не добавляли антитела. Интенсивность реакции агглютинации оценивали через 1 час по 4-крестовой схеме [2]. Из полученных результатов выбра1ш условия для проведения реакции ингибирования. Для этого использовали концентрацию антигена на латексе 100 мкг/мл и 50 мкг/мл, а разведения сыворотки соответствовали 1 16, 1 32 и 1 64, Морфин вносили в лунки после серии пятикратных разведений в интервале концентраций от 500 мкг/мл до 200 нг/мл, В каждую лунку вносили 7 мкл антиопиатной сыворотки, 7 мю1 раствора морфина соответствующей концентрации и 7 мкл раствора латекса. Контрольные [c.202]

Была предпринята попытка разработать тест-систему и при использовании двух других латексных антигенов - акролеинового и белкового. В случае применения латекса на основе БСА агглютинация происходила лишь при больших концентрациях морфина 500 мкг/мл и данный метод нельзя рекомендовать для практической диагностики. Использование морфина, меченого акролеиновым латексом, позволило разработать метод с высокой чувствительностью выявления опиатов 100 нг/мл. Однако, результаты плохо воспроизводились из-за происходящей в ряде случаев спонтанной агглютинации. [c.203]

Выделение чистых И. проводится с помощью ионообменных смол с послед, гель-фильтрацией. Для мн. целей используют препараты миеломных И., особенно минорных классов. Антитела выделяют с помощью иммуносорбентов - фиксированных на нерастворимых носителях (напр, целлюлозе) антигенов. Обнаружение и количеств, определение И. разных классов проводят иммунологич. методами с помощью соответствующих антисывороток. Для определения кол-ва антител используют методы преципитации (иммунная р-ция осаждения антигена антителом), агглютинации (взаимод. антитела с двумя клетками), нейтрализации бактерий и вирусов и др. Широкое распространение получают радиоиммунные и ферментно-иммунные методы, обладающие исключительно высокой чувствительностью и позволяющие определять очень малые кол-ва антител (или антигенов) в смесях с др. в-вами. [c.217]

Большое значение для медицины имеет применение лектинов для определения группы крови. Метод основан на избирательном взаимодействии лектинов с эритроцитами систем ABO и MN. Так, например, лектин из ОоИскач biflorus специфически связывает N-ацетилгалактозамин рецепторов, определяющих группу крови А,. Предпочтительная агглютинация раковых клеток по сравнению со здоровыми используется для определения раковых трансформаций в клеточных культурах. Так, безуглеводный лектин из земляных орехов (М 120 000, 4 субъединицы) лучше связывается с раковыми клетками молочной железы, чем с соответствующими нормальными клетками. [c.429]

Взаимодействие вирусных частиц с поверхностными антигенами эритроцитов имеет значение на первых стадиях вирусной инфекции в организме животных и человека. Так, в опытах in vitro показано, что вирус гриппа прикрепляется к поверхности эритроцитов, вызывая их агглютинацию. Затем под действием нейраминидазы вируса происходит освобождение вирусных частиц и изменение антигенных свойств поверхности эритроцитов. Об углеводсодержащем биополимере—рецепторе вируса см. Иммунохимическими методами показано присутствие и ряда других антигенов на поверхности эритроцитов. [c.603]

Реакции непрямой (пассивной) агглютинации. В некоторых случаях АГ, используемые для реакции агглютинации, настолько высокодисперсны, что комплекс агглютиноген-агглютинин не виден невооруженным глазом. Для того чтобы эта реакция была хорошо видна, предложены методы адсорбции таких АГ на более крупных частицах-носителях с последующей их агглютинацией специфическими АТ. В качестве адсорбентов применяют эритроциты, различного вида бактерии, частицы латекса, угля, талька, коалина и т.д. Эта реакция получила название реакции непрямой, или пассивной, агглютинации. Положительный результат реакции проявляется видимой агглютинацией частиц носителя. [c.61]

Методы индикации возбудителя (экспресс-диагностика). Для быстрого обнаружения патогенных для человека легионелл в исследуемом материале применяют прямую РИФ (исследование мокроты), а также ИФА, РИА и реакцию агглютинации латекса (исследование мочи). Чувствительность этих методов составляет 25 — 90 %, специфичность — более 85 %. Результаты исследования получают через несколько часов недостатком является ограниченное количество выявляемых серогрупп легионелл. [c.138]

Реакцию агглютинации ставят обычным объемным методом, а также более экономичными (капельным или микроскопическим) методами с диагностикумом, приготовленным из риккетсий Провачека. Поскольку РА бывает положительной уже на 3 —5-й день болезни, ее можно использовать для ранней диагностики заболевания (хотя в этот период возможны перекрестные реакции с другими риккетсиями группы сыпного тифа). [c.237]

Серологическое исследование. Для сероэпидемиологических исследований в очагах применяют реакцию латекс-агглютинации или иммунодиффузии. Для диагностики и оценки состояния больных ставят РП, РСК, РИФ, ИФА, позволяющие выявлять титры специфических IgM и IgG. Для подтверждения кокцидиоидного менингита важным является обнаружение антител в ликворе больных, так как другие методы исследования при этой форме заболевания часто оказываются безрезультатными. [c.333]

Серологическое исследование. Для серодиагностики амебиаза применяют РНГА (с антигеном из разрушенных ультразвуком Е. histolyti a), реакцию латексной агглютинации, РСК, РВИЭФ (как для обнаружения антител, так и для выявления специфического амебного антигена), ИФА и др. Наиболее эффективно применение серологических реакций для диагностики внекишечных форм амебиаза. При поражении печени исследуют ее пунктат, а также применяют рентгенологические и радиологические методы исследования. [c.368]

Серологическое и аллергологическое исследования. При шистосомозах иммунодиагностика дополняет микроскопическое исследование, но в качестве самостоятельных методов диагностики ее применять не рекомендуется. Практическое значение имеют РИФ, РСК, ИФА, РП, РГА, а также внутрикожная проба, реакция флоккуляции на предметном стекле, реакция кольцепреципитации, реакция преципитации вокруг яйца шистосомы, реакция агглютинации церкариев, реакция иммобилизации мирацидиев и др. Для исследования необходимы гепаринизированная кровь (не менее 1 мл) и [c.393]

Может быть осуществлен метод покадровой съемки движущегося поля сперматозоидов с последующим наложением кадров в проекции. Этим методом возможно не только установить ТЕ50, но и объективно зарегистрировать патологические формы движений, такие, например, как агглютинация. Для съемок удобен специальный отечественный микроскоп МБИ-12 (с термостатом и реле экспозиций). [c.255]

ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ НА ПРИСУТСТВИЕ ТИФОЗНОПАРАТИФОЗНЫХ И ДИЗЕНТЕРИЙНЫХ БАКТЕРИЙ МЕТОДОМ АГГЛЮТИНАЦИИ МИКРОБНЫХ АССОЦИАЦИЙ [c.155]

Методы непосредственного обнаружения патогенных микробов. кишечной группы в воде требуют значительного времени и не всегда оказываются достаточно эффективными. Иногда поэтому возникает необходимость использовать и косвенные методы обнаружения тифозно-паратифозных й дизентерийных бактерий в воде. К числу таких методов относится метод агглютинации микробных ассоциаций, разработанный А. Ф. Стояновским и сотрудниками (1955—1957 гг.). [c.155]

Для более быстрого предварительного ответа при исследовании питьевой воды можно использовать метод выращивания посева в присутствии специфической агглютинирующей сыворотки. Это осуществляется следующим образом. Одновременно с носевоц на чашки с щелочным агаром ставят реакцию агглютинации с той же засеянной пептонной средой. При этом в штатив устанавливают ряды стерильных пробирок по числу засеянных флаконов. В каждом ряду должно содержаться по 7 агглютинационных пробирок. Во все пробирки соответству-юш,его ряда стерильно наливают по 1 мл засеяннЬй пептонной среды, взятой с поверхности данного флакона. Затем в отдельной пробирке разводят агглютинирующую холернук сыворотку в отношении 1 50. Для разведения сыворотки Вместо физиологического раствора берется засеянная пептонная среда соответ- ствующего флакона. После этого 1 мл разведенной сыворотки вносят в первую пробирку данного ряда, содержащую 1 мл засеянной среды (получают разведение [c.166]

В Настоящей работе сочетается крайне чувств итель ный иммунологи-чеокий метод с методом хроматографии иа бум ате. До Последних лет в этом направлении были сделаны лишь отдельные по пытки изучения на бумаге агглютинации ба ктерий [1, 2] и эритроцитов [3]. [c.361]

Однако многие методы анализа основаны на торичнмх реакциях, т. е. ка-, ких-то последствиях первичного взаимодействия антитела с антигеном К этим вторичным реакциям относятся преципитация, агглютинация клеток и связывание комплемента. Последнюю реакцию можно использовать пото му, что компоненты системы комплемента связываются только с антителоц находящимся в комплексе с антигеном при этом исчезновение компоненто комплемента может служить мерой количества образующегося комплекса антиген-антитело. Однако чаще всего применяют реакцию преципитации антигена с антителом в жидкостях или гелях. Например, в методе Ухтермни антиген и антитело помещают в отдельные лункн, вырезанные в агаровом геле, Реагенты диффундируют из лунок до тех пор, пока не встречаются друг с другом в оптимальных соотношениях для образования преципитата, который становится видимым как непрозрачная полоса, рассеивающая свет (рис. 17-29). [c.28]

Иммунизацию кроликов проводили после 47 суток хронического отравления. Животным однократно подкожно вводили гретую брюшнотифозную вакцину, изготовленную из штамма в дозе 1 млрд. микробных тел (по оптическому стандарту). Через 7 14 21 28 и 35 суток после иммунизации у кроликов из ушной вены брали кровь и с сывороткой ее ставили реакции агглютинации по макроскопическому объемному методу (М. Н. Лебедева, 1955). При этом использовали брюшнотифозные монодиагностикумы О (IX) и Н ( ) производства Ленинградского института вакцин и сывороток. Последнее разведение сыворотки, дававшее отчетливую реакцию агглютинации (50%, или ++), принимали за титр соответствующих агглютининов у данного животного. [c.147]

Через 4 7 13 суток после иммунизации у крыс из хвоста брали кровь и с сыворотками крови ставили реакции агглютинации. При постановке реакции использовали монодиагпостикум брюшнотифозный О (IX), производства Ленинградского научио-псследователь-ского института вакцин и сывороток (серия № 71, контрольный № 824). Реакция макроагглютннации ставилась по общепринятому методу (В. Е. Предтеченский и др., 1950). [c.295]

Приобретенный иммунитет может представлять собой более сложное явление, чем первоначально предполагали это было показано работами Бриггса [249] и Стефенса [1962], которые поставили под сомнение существование некоторых антител у насекомых. Работая с 11 видами бабочек, Бриггс использовал в качестве антигенов для инъекции или скармливания насркомым живые и ослабленные бактерии (патогенные и непатогенные) и растворы яичного белка.-Ему не удалось обнаружить природные или приобретенные иммунные свойства гемолимфы такими серологическими методами, как реакции агглютинации, преципитации и связывания комплемента. Он установил, однако, что в сыворотке вакцинированных насекомых содержится крайне термостабильное бактерицидное начало, которое можно демонстрировать in vitro. Это специфическое бактерицидное начало сохраняется на протяжении всей жизни гусеницы, оно устойчиво к кислотам и щелочам, но переходит в форму суспензии под действием пепсина. Эта иммунологическая реакция появляется только при инъекции, но не при скармливании антигена. Термостабильность искусственно приобретенного бактерицидного начала отличает его от антител позвоночных. Стефенсу [1962] не удалось обнаружить никаких настоящих ан- [c.428]

Идентификация чужеродных клеток в организме облученного животного — это проблема, к решению которой подошли различными путями. В экспериментах, проведенных van Bekkum, крысиные эритроциты в циркулирующий кр01ви были идентифицированы методом агглютинации со специфической антисывороткой, а гра-нулоциты крысы и мыши можно было различить по реакции щелочной фосфатазы 6, 7]. Другие иммунологические i[8] и цитологические [4] методы требуют забоя исследуемых животных. [c.405]

Электрофорез окажется, повидимому, наиболее полезным в области биохимии в качестве метода очистки белков, антител, ферментов, гормонов, вирусов и т. п. При изучении антител, концентрация которых допускает их наблюдение на диаграммах, можно установить расположение и концентрацию антител путем сравнения изображений, полученных до и после осаждения антител специфическими антигенами. Этот случай изучали ва гиперим-мунной лошадиной и кроличьей сыворотках [55—57]. Однако в большинстве случаев концентрация антител лежит ниже предела чувствительности прибора. В таких случаях необходимо прибегать к исследованию выделенных проб (см. стр. 360) при помощи методов дополнительной фиксации, агглютинации, нейтрализации и т. п. [58—60]. [c.377]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология