Биологическая активность интерферона

Биологическая активность интерферона [193] [c.117]

Установлено, что интерфероны синтезируются в клетке сначала в виде предшественников, содержащих на N-конце полипептидной цепи сигнальный пептид, который затем отщепляется, и в результате образуется зрелый интерферон, обладающий Полной биологической активностью. Бактерии не содержат ферментов, [c.141]

ДВЭ применяют в качестве сомономера для получения разнообразных полимеров каучуков, пластмасс, высокомолекулярных связующих, биологически активных веществ — индуктора интерферона, противовирусных и противоопухолевых препаратов. [c.281]

Это отнюдь не новая область. Выпекать хлеб и сбраживать сусло люди научились тысячи лет назад. Процессы ферментации, разделения и очистки давно и хорошо известны. Но с появлением сведений о молекулярной структуре и основных аспектах химии генетического материала в биотехнологии началась новая эра. (см. разд. Ш-Е). Она ознаменовалась разработкой процедур сращивания генов, позволяющих химикам использовать бактерии для производства сложных биологически активных молекул. Были найдены ферменты, способные разрывать цепи ДНК в нужных местах и вводить в них чужеродную ДНК с новыми химическими связями. Модифицированная ДНК вырабатывает белки в соответствии с заложенным в нее измененным кодом. Этими белковыми продуктами могут быть гормоны, антитела или другие нужные нам сложные химические соединения со специфическими свойствами и функциями. Вырабатываемый бактериями с внедренным геном человека интерферон, по-видимому, окажется ценным средством лечения целого ряда болезней. Уже появился на рынке инсулин человека, производимый методом сращивания генов. Активность в этой области высока, и коммерческие предприятия возникают быстро. [c.130]

Особая форма неспецифической вирусной интерференции, которая возникает, очевидно, только у позвоночных, основана на образовании биологически активного вещества, так называемого интерферона, который индуцируется вирусом при первичном заражении и защищает клетки пораженного хозяина от нового заражения тем же или другим вирусом. Только для позвоночных характерен также благоприобретенный иммунитет, основанный на выработке так называемых антител. Антитела образуются в результате первичной инфекции и специфически нейтрализуют данного или близкородственного возбудителя при вторичной инфекции. Эти явления могут быть использованы при активной иммунизации и, следовательно, в борьбе с возбудителями болезней человека и животных (см. раздел 14.1.2). [c.163]

А получение вакцин (вакцина гепатита В, малярии, антигенов ВИЧ и других антигенов), биологически активных пептидов (интерфероны, интерлейкины, ростовые факторы и др.) с помощью методов биотехнологии и приемов генетической инженерии [c.18]

ИЛ-1, ФНО-а и у-интерферон являются главными медиаторами развития острой фазы воспаления, инфекции и травмы. Они имеют перекрывающуюся, но все же разную биологическую активность. Эта система участвует также и в регуляции гуморального иммунного ответа (см. рис. 20.5). В частности, пролиферация и окончательная дифференцировка В-лимфоцитов, узнавших чужеродный антиген, требует активации Т-хелперами. [c.484]

Клетки Е. соИ, содержащие гибридные плазмиды, несуш,ие такую вставк). способны синтезировать полипептид с биологической активностью интерферона Эта активность нейтрализуется антисывороткой к человеческому лейкоцитарному интерферону. Выход антивирусной активности в экстрактах клеток составил 10 1000 ед/мл (10 —10 ед/л), т. е. меньше одной молекулы на клетку, но сам факт синтеза активного полипептида был качественным шагом вперед. [c.192]

Существует три класса человеческих интерферонов а-ИФН и -ИФН, образующиеся преимущественно в лейкоцитах и фибробластах, соответственно, в ответ на вирусную инфекцию или на разнообразные индуцирующие воздействия [92], и у ИФН, называвшийся ранее иммунным интерфероном, или интерфероном класса II, продуцируемый несенсибилизированными лимфоидными клетками в ответ на мутогены и сенсибилизированными лимфоцитами при стимуляции специфическим антигеном [51] (табл. 15.1) -ИФН и Y-ИФН относятся к гликопротеннам, однако олигосахаридные боковые группы не существенны для их биологической активности [75, 90, 128], что объясняет, почему клонированный интерферон, синтезируемый в прокариотах (см. ниже), обладает нормальной биологической активностью. Интерфероны класса а не являются гликопротеинами. а-ИФН и -ИФН, но не Y-ИФН очень устойчивы к низким значениям pH (оба вполне стабильны при pH 2 при 4 С) и сохраняют биологическую активность в присутствии ДСН [227]. Это необычное свойство позволяет применять эффективный способ их очистки на конечных этапах выделения [93]. [c.39]

Наиболее эффективно экспрессия клонированных генов интерферона происходит в дрожжевых клетках. Интерфероновые гены клонировали в челночных бактериально-дрожжевых векторах, в которых они находятся под контролем дрожжевого промотора al DI. Дрожжевые клетки, трансформированные этой плазмидой, синтезируют до 10 молекул биологически активного интерферона на 1 клетку [98]. Недавно несколько генов а-ИФН и ген Y-ИФН были включены в плазмиды под контроль промотора 3-фосфоглицераткиназы, в результате чего были получены биологически активные интерфероны без сигнальной последовательности с выходом примерно 25 млн. ед. на 1 л [53]. [c.45]

Из рис. 95, в видно, что в элюате пика с обнаруживаются три различные фракции интерферона (с , j и з). Оказалось также, что пик Ы на 3-м этапе очистки распадается на три пика, пик — на два. Таким образом, было получепо восемь фракций интерферона (общий выход по активности — 23%). Электрофорезом в ПААГ с ДДС-Na было показано, что семь пз них дают одиночные полосы, а одна (Ьт) — двойную. Молекулярные массы всех фракций, как оказалось, заключены в интервале 17 600—26 200. Самое интересное состоит в том, что все восемь фракций интерферона обладают качественно различной биологической активностью это было установлено по соотношению эффектов защиты от различных вирусных инфекций двух объектов — фибробластов человека и культуры клеток почки быка [Hobbs, Pestka, 1982]. [c.214]

Идентификация экспрессирующих рекомбинантных клонов. ТИе-тод идентификации экспрессирующих клонов зависит от свойств продукта экспрессии. Если этот продукт обладает собственной биологической активностью, то ои может быть идентифицирован по ее проявлению. Например, если экспрессии подвергается ген, кодирующий фермент, то клоны идентифицируют по наличию в них соответствующей ферментативной активности клоны, синтезирующие интерферон,— по противовирусной активности клеточных экстрактоа и т. д. [c.439]

Интерфероны обладают двумя типами биологической активности — противовирусной и противоклеточной. В отношении вирусов действие трех интерферонов сравнимое по эффективности, но в отношении клеток более активен интерферон у, причем против опухолевых клеток он активнее, нежели против нормальных клеток. [c.562]

В обзоре обобщены современные представления по некоторым видам собственной биологической активности водорастворимых синтетических полимеров. Важным свойством таких полимеров является взаимодействие их с биополимерами - белками и нуклеиновыми кислотами, а также с клетками и, прежде всего, с клеточными мембранами. Рассмотрены полимеры катионной природы с антимикробной активностью полианионы с противовирусной и противоопухолевой активностью, обладающие способностью индуцировать интерферон полимеры различной природы, проявляющие иммуноадъю-вантные свойства. Отдельный раздел посвящен синтезу и использованию канцероген-полимерных антигенов в иммунодиагностике эндогенных и экзогенных канцерогенных веществ. Библиография - 107 ссылок. [c.163]

Для получения высокопроизводительных штаммов — продуцентов физиологически активных вегцеств — все шире используются современные генетические методы. Эти методы могут быть широко использованы не только в синтезе антибиотиков, но и в производстве аминокислот, нро-стогландинов, трансформации стероидов и некоторых биологически активных соединений (интерферона, инсулина и др.). [c.337]

Чаще всего нуклеозиды полимеризуют, используя полинуклеотид-фосфорилазу, с образованием 5 -дифосфатов. Из натуральных нуклео-зиддифосфатов ADP, UDP, DF, GDP и ГОР получают соответственно поли(А), поли(и), поли(С), поли(О) и поли(1). Как сами полимеры, так и их биологическая активность являются объектами интенсивных исследований. Первым крупным достижением в этой области стало обнаружение индуцирования интерферона двухцепочечным комплексом поли(1) поли(С) (Филд, 1976). В дальнейшем была изучена биологическая активность многих интерферон-индуцирующих агентов, получаемых введением в полинуклеотиды различных нуклеозидных аналогов, химически связанных с дифосфатами. В последнее время было обнаружено ингибирование обратной транскриптазы различными полинуклеотидами, что представляет особый интерес, поскольку именно этот фермент необходим для культивирования канцерогенных вирусов млекопитающих. [c.193]

Лимфокины — белки неиммуноглобулиновой природы, продуцируемые лимфоцитами и обладающие различной биологической активностью. В числе лимфокинов интерферон и интерлейкины — факторы, регулирующие пролиферацию и дифферснцнровку лимфоцитов. [c.276]

Б ряде случаев может успешно применяться для разделения и очистки биополимеров (иммуноглобулины, яичный альбумин, интерферон, растительные вирусы) чистый кремнезем, однако многие природные соединения слишком прочно удерживаются на нем [250]. Устранение адсорбции путем изменения состава элюента не всегда возможрю, а зачастую приводит к потере биологической активности разделяемых объектов [251[. В этом случае химическое модифицирование кремнезема — едршственный путь создаршя сорбентов с необходимой спецификой поверхности. [c.437]

Искусственные белки. Основываясь на теории белковых структур, можно конструировать белки с новой, т. е. не обнаруженной до сих пор в природе архитектурой. Первым т аким белком стал альбебетин, состоящий из двух повторяющихся элементов аРР (Финкельштейн и др., 1988). Его исследование показало, что практически он так же компактен, как и природные глобулярные белки сходной молекулярной массы, и имеет относительно стабильную структуру. Затем в него был введен биологически функциональный фрагмент из восьми аминокислот, обладающий бласт-трансформирующей активностью интерферона (Долгих и др., 1993). Модифицированный альбебетин имел высокое сродство к рет епторам тимоцитов мыши и активировал реакцию их бласт-тра 1сфирмации даже эффективнее, чем интерферон. [c.446]

Биологическое тестирование — самый чувствительный метод, к тому же единственный, позволяющий получить информацию о биологической активности молекул цитокина. Однако биотесты трудоемки, длительны и недостаточно специфичны, уступая в этих отношениях иммунохимическому подходу (ИФА). Различают четыре разновидности биотестирования по цитотоксическому эффекту, по индукции пролиферации, по индукции дифференцировки и по противовирусному эффекту. По способности индуцировать пролиферацию чувствительных клеток-мишеней проводят биотестирование следующих цитокинов IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6 и IL-7. По цитотоксическому действию на чувствительные клетки-мишени (L929) тестируют TNF-a и TNF- . Колониестимулирующие факторы оценивают по способности поддерживать рост костномозговых предшественников в виде колоний в мягком агаре. IFN-Y выявляют по способности индуцировать экспрессию HLA II класса на клетках-мишенях. Биотест на IL-8 основан на его способности усиливать хемотаксис нейтрофилов. Оценка противовирусной активности позволяет выявить интерфероны, а принадлежность интерферона к определенному типу определяют с помощью реакции нейтрализации, т. е. ингибиции антивирусного действия специфическими моноклональными антителами. [c.218]

Параллельно с исследованиями основных характеристик индукции антивирусного состояния предпринимались интенсивные попытки очистить интерферон, причем эти попытки натолкнулись на неожиданные препятствия. Выяснилось, что интерфероны обладают чрезвычайно высокой биологической активностью в антивирусное состояние клетку могут привести менее чем 50 молекул интерферона. Таким образом, хотя в производстве миллионов единиц интерферона в культуре клеток и не было сложностей, число молекул интерферона, синтезированных при этом, было лишь в 10—50 раз больше, чем число единиц его активности, и, следовательно, по массе это были очень маленькие количества интерферона. Материал, из которого приходилось начинать выделение интерферона, часто содержал не более 0,001—0,017о интерферона. Эта низкая концентрация в сочетании с очень малым суммарным количеством интерферона была серьезным препятствием для его очистки. [c.36]

Действие интерферонов, как и гормонов, осуществляется на плазматической мембране клетки при их соединении с особыми рецепторами [73, 130, 131]. В двух ключевых опытах было четко показано, что интерферон не обладает биологической активностью внутри клетки, в которой он образуется. Прежде всего он должен быть секретирован, а затем вновь адсорбирован клетками [252] (поэтому при микроинъекции интерферон не способен индуцировать антивирусное состояние [106]). В этих [c.55]

При клинических испытаниях препараты интерферона вводили местно, внутримышечно, подкожно, внутривенно и в спинномозговой канал. До недавнего времени фармакокинетические исследования интерферона осложнялись вариабельностью состава и биологической активности различных его препаратов, а также неизбежной вариабельностью при биологических определениях активности интерферона. Успехи, достигнутые в получении рекомбинантных препаратов, и развитие иммунных методов их определения облегчили работу в этой области обнаружено, что рекомбинантный a-2-интерферон и лейкоци- [c.121]

Для всех трех типов интерферонов человека в настоящее время методами генетической инженерии созданы многочисленные суперпродуценты, что позволяет получать эти биологически активные белки в большом количестве и практически в индивидуальном состоянии (че- [c.192]

Новые типы лечебных препаратов можно получить, если создать белок, обладающий биологическими активностями, свойственными двум или более неродственным белкам. На принципиальную возможность конструирования таких молекул указывает наличие мультифункциональных природных белков, которые могут различаться по своей организации у прокариот и эукариот. Первую успешную работу в данном направлении выполнили М. Сено с соавторами (1986 г.). Они создали гибридный ген, который кодировал химерный белок, состоящий на N-конце из 135 АК HuIFN-y (делеция 11 АК с С-конца) и из 134 АК интерлейкина 2 человека (IL-2) на С-конце (полная последовательность). Иммунный интерферон соединили с ин- [c.193]

Несомненно, Streptomy es для генетической инженерии наиболее интересны как продуценты антибиотиков, и особенно гибридных антибиотиков. Однако эти бактерии в ряде сл) аев могут быть полезны и как хозяева при создании штаммов, продуцирующих целевые белки. Например, можно попытаться создать штамм стрептомицетов, который кроме набора антибиотиков будет синтезировать и секретировать из клеток биологически активный полипептид типа интерферона или интерлейкина. Возможно, полученный на базе такого штамма комплексный препарат будет полезен для ветеринарии и/или медицины. [c.279]

Многие биологически активные белки высших эукариот синтезируются в форме предшественников, подвергающихся секреции из клеток. В ряде экспериментов бьшо обнаружено, что если белки такого типа (например, гормон роста быка, активатор тканевого плазминогена человека, у-интерферон человека, прохимозин быка) в процессе синтеза в бактериальной или дрожжевой клетке остаются в цитоплазме, то они переходят в нерастворимую и неактивную форму. Поэтому создание продуцентов, обеспечивающих секрецию и сопутствующую ей модификацию белка, является крайне важной задачей генетической инженерии и биотехнологии. Большое внимание уделяется дрожжам, у которых ряд белков эффективно выводится из клеток в окружающую среду. В отличие от бактерий в клетках дрожжей в процессе секреции может происходить гликозилирование и правильная укладка эукариотических белков. Особо следует отметить, что большинство штаммов S. erevisiae не вьщеляет в культуральную среду протеазы, что в еще большей степени повышает перспективность данной системы для создания высокопродуктивных штаммов, секретирующих в окружающую среду целевые белки. [c.318]

Выраженной противовирусной активностью обладает групп эндогенных соединений — интерферонов. Это вещества белково (низкомолекулярной) природы, обладающие разными видам биологической активности противовирусной, противоопухоле вой, иммуномодулирующей. [c.128]

Смотреть страницы где упоминается термин Биологическая активность интерферона: [c.214] [c.190] [c.267] [c.262] [c.362] [c.215] [c.262] [c.362] [c.503] [c.990] [c.339] [c.174] [c.339] [c.397] [c.104] [c.131] [c.45] [c.56] [c.116] [c.255] [c.397] [c.396]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология