Мутанты по клеточному циклу

Чтобы идентифицировать гены, участвующие в контроле клеточного цикла, нужны соответствующие мутанты и способы получения от них потомства. Однако клетки с нарушенным механизмом клеточного цикла [c.409]

Дрожжевые мутанты сйс могут быть использованы для анализа сопряжения меаду событиями клеточного цикла [c.410]

Рис. 11-32. Эта схема показывает, как можно отличить температурочувствительного мутанта по клеточному циклу ( d ) от других температурочувствительных мутантов. Большая часть мутантных клеток, неспособных расти при высоких температурах, будет иметь дефекты в тех или иных процессах, важных для общей жизнеспособности (например, в выработке АТР). Как показано на схеме, при высокой температуре рост этих мутантных клеток спустя определенное время остановится в каких-то случайных точках клеточного цикла. В отличие от этого мутанты d останавливаются лишь в определенных точках цикла, специфичных для каждого из таких мутантов (в приведенном примере-в начале фазы S).

МУТАНТЫ по КЛЕТОЧНОМУ ЦИКЛУ ( d ) Моменты остановки роста [c.170]

Оказалось, что хотя в любой из клеток min-мутанта существуют два типа функционально активных сайтов построения перегородки, в течение клеточного цикла срабатывает лишь один из них. Это обстоятельство позволяет постулировать существование определенного компонента — активатора сборки клеточной перегородки. По-видимому, на протяжении клеточного цикла образуется ограниченное количество ( квант ) этого активатора, достаточное для функционирования лишь одного сайта (при этом активатор, по-видимому, полностью расходуется). [c.68]

Выращивание клеточных суспензий в жидкой питательной среде имеет ряд преимуш,еств перед выращиванием каллусных тканей поверхностным способом. Здесь легче и более воспроизводимо влиять на метаболизм и рост клеточных популяций экзогенными факторами. Они удобнее для биохимических и молекулярно-био-логических экспериментов — изучения индукции ферментов и связи их с событиями клеточного цикла, экспрессии и репрессии определенных генов, изолирования и характеристик мутантов. [c.22]

Исключение составляют мутанты, у которых клеточный цикл блокирован на стадии Gi — d 28, 35. Тем самым выявляется фаза клеточного цикла, на которой клетка как бы принимает решение [c.64]

В любой из клеток /пш-мутанта одновременно существуют два функционально активных сайта построения перегородки, но в клеточном цикле срабатывает лишь один из них (рис. 44). [c.116]

Б. Соответствует ли точка удара моменту остановки клеточного цикла у вашего мутанта Что вы можете сказать по этому поводу [c.243]

Трансформация клетки может быть вызвана одним геном. Температурочувствительные мутанты по гену v-sr из вируса саркомы Рауса были использованы для демонстрации того, что трансформирующий ген действует как переключатель в определенной точке клеточного цикла и в другое время не нужен для поддержания трансформированного состояния. [c.248]

ТЕМПЕРАТУРОЧУВСТВИТЕЛЬНЫЕ МУТАНТЫ ПО КЛЕТОЧНОМУ ЦИКЛУ (сс с) [c.409]

Нри воздействии НММ можно применять очень разнообразные режимы, варьируя концентрацию и экспозицию. Сходная выживаемость может быть получена при дозах 0,07%—48 час. и 1% —1,5 час. (7Х10 и 6Х10 соответственно). Это обстоятельство значительно расширяет возможности воздействия на различные стадии клеточного цикла. Известно, что физиологическая стадия обрабатываемого материала и доза мутагена в значительной степени влияют па выход и характеристику мутантов [4, 10, И]. [c.45]

Этими авторами выделены также мутанты с блокированными на разных стадиях процессами образования почек и клеточного деления. Нутем переноса в разные сроки культур мутантов из условий инкубации при 23° в условия 36° и нараллельного микрофотографирования клеток определены термочувствительные точки в цикле клеточного деления различных мутантов. Поскольку развитие культур различных мутантов заканчивается при картинах различной морфологии клеток, введены специальные параметры — точка выполнения и точка окончания , которые характеризуются морфологией клеток к моменту переноса клеток в условия повышенной температуры и к моменту окончания функции. Показано при этом, что у 15 из 100 термочувствительных, или ts-му-тантов, блокирование клеточного деления приходилось на одну и ту же стадию клеточного цикла, но контролировалось тремя разными генами. Точка выполнения у всех трех генов приходится на раннюю стадию митотического цикла, примерно на момент закладки почки, а точки окончания были различными. У одного из мутантов точка выполнения и точка окончания совпадали, и клетки гибли вскоре после формирования мелкой почки. Другая мутация блокировала митоа, а третья — отделегше дочерней клетки от материнской. В этом последнем случае, следовательно, наблюдается нормальная закладка почек, синтез ДНК и деление ядер, а точка окончания отсутствует (Hartwell et al., [c.18]

Рис. 13-18. Эти схемы показывают, как можно отличить термочувствительвого мутанта с измененным механизмом клеточного цикла (с(1с) от других термочувствительных мутантов При повышении температуры до рестриктивного уровня, когда продукт мутантного гена не может функционировать нормально, мутант будет продолжать свой клеточный цикл до тех пор, пока не дойдет до этапа, который он не в состоянии пройти (в данном случае это инициация фазы 8). Поскольку, несмотря на блокаду цикла, клетка продолжает расти, мутанты с(1с становятся ненормально большими (на схеме не показано). Между тем при других мутациях, вызывающих нарушение процессов, необходимых для роста на протяжении всего цикла (таких, как синтез АТР), клетка будет останавливаться в любой стадии никла, как только она израсходует свои

Мутации, специфически влияющие на отдельные компоненты механизма клеточного цикла, нельзя обнаружить по одной лишь утрате способности мутантных клеток к делению, так как к этому будет приводить любой летальный дефект. Мутации цикла клеточного деления Ыс-се11-ё1у181оп-еуе1е) более достоверно выявляются по тому, как они блокируют или нарушают специфическую фазу клеточного цикла при пермиссивной гемпературе (рис. 13-18). У почкующихся дрожжей наличие и размеры почки служат простым визуальным индикатором, показывающим, какой )тап клеточного цикла блокирован у данного мутанта с(1с в случае делящихся дрожжей нужны более сложные подходы с использованием методов анализа клеточного цикла, о которых говорилось выше. [c.410]

Если повысить температуру до рестриктивного уровня, у большинства мутантов сс1с клеточный цикл останавливается на той стадии, на которой действует продукт гена сб/с. Как правило, клетка теряет способность переходить к следующей стадии цикла, и это означает, что начало каждого процесса находится в зависимости от завершения предыдущего процесса Таким образом, у дрожжей, как и у млекопитающих, большинство этапов клеточного цикла, но-видимому, связаны между собой как звенья единой цепи. Эта связь была более тщательно проанализирована в экспериментах с клетками, содержащими разные комбинации различных мутаций сс1с. Как показали результаты, события хромосомного цикла образуют ряд зависимых друх от друга этапов, который не связан жестко с событиями цитоплазматического цикла (рис. 13-19). Например, хотя цитокинеза не произойдет, если предотвратить деление ядра, тем не менее мутанты сс1с, не способные пройти цитокинез из-за дефектов в механизме формирования почки, все же осуществляют повторные циклы синтеза ДНК и деления ядра. Но-видимому, общим правилом не только для дрожжей, но и для клеток млекопитающих, насекомых и многих других организмов является то, что хромосомный цикл может продолжаться, даже если цитокинез предотвращен. В самом [c.410]

Можно предположить, что роль такого механизма играет клеточный цикл. Однако факты не нодтвержают это нредноложение дифференцировка ранних эмбриональных клеток следует установленной схеме и при искусственном ограничении клеточных делений под влиянием химических веществ, ингибирующих цитокинез или синтез ДНК. Клеточные деления не следует уподоблять периоду колебаний маятника биохимических часов, определяющих темп развития скорее ситуация обратная и именно биохимические часы контролируют темп клеточных делений и продолжительность клеточного цикла у множества видов животных. Изменение химического состояния клетки одновременно влияет на принятие решений о делении клеток, а также на время и нанравление дифференцировки. Молекулярные механизмы контроля клеточных делений в эмбриогенезе практически не изучены и представляют собой одну из центральных проблем современной биологии развития. Генеалогические мутанты нематод могут сыграть ключевую роль в решении этой проблемы. [c.91]

Генетические исследования на мутантах дрожжей показали, что, хотя растущие клетки удваивают свое содержимое в целом независимо от фаз цикла, в процессе их роста осуществляется также ряд последовательных процессов, специфически связанных с определенными фазами клеточного цикла. Многие из этих процессов, по-видимому, включают построение надмолекулярных структур из предсуществующих молекул. Завершение сборки этих структур делает возможной следующую стадию сборки. Про.чежуток между последовательными митозами определяется суммарным временем, необходимым для осуществления всех звеньев такой цепи событий. Одна из реакций в этом каскаде может служить специальным регулятором, обеспечивающим нормальные размеры клеток. В клетках млекопитающих подобная регуляторная система препятствует прохождению точки рестрикции в фшзе (а значит, и началу синтеза ДНК) до тех пор, пока не будут синтезированы все ко.мпо-ненты, необходимые для завершения всех последовательных процессов сборки в предстоящих фазах 8, 61 и М. [c.175]

Построение клеточной перегородки. Данный этап завершает клеточный цикл. В раскрытии механизмов регуляции этого цикла важный вклад внесло изучение специфических мутантов, из которых наибольшую ценность представляют условные мутанты. У мутантов данного тина процесс протекает нормально нри обыч-1Н>1х физиологических условиях (пермиссивных условиях), а при ненермнссивных условиях (повышенная температура, действие радиации) процесс подавляется. Иногда мутация приводит к появлению зависимости клеточного деления от дополнительных факторов, например, госГ -мутанты Вас. subtilis и Вас. li heniformis на обычных средах в процессе роста образуют нити из кокковидных тел [c.67]

Высокоспецифичные протеиназы играют важную роль в регуляции клеточного цикла, в частности при переходе от вегетативного роста к образованию спор у дрожжей и бактерий. У мутантов дрожжей с низким уровнем протеиназ А и В снижена способность к споруляции. Выделен температурно-чувствительный мутант по споруляции Вас. subtilis, у которого этот дефект связан с повреждением структурного гена для внутриклеточной протеиназы. У Вас. thuringiensis с началом спорообразования специфическая протеиназа расщепляет -субъединицу РНК-полимеразы, осуществляя необходимую модификацию фермента. [c.56]

Мутанты, т. е. организмы или клетки, несущие мутацию, у которых на разных стадиях блокирован клеточный цикл, получены у ряда одноклеточных организмов — дрожжей родов Sa haromy es и S hizosa haromy es, водоросли hlamidomonas, плесневого фиба [c.62]

Скорее всего рецессивные мутации генов, контролирующих клеточный цикл, будут летальными. Поэтому соответствующие мутанты выделяют как условные, или условно-летальные, т. е. как мутанты с более узкой нормой реакции (см. гл. 3, раздел 3). Обычно выделяют мутанты, гибнущие при так называемой непермиссивной (обычно повышенной) температуре инкубированияг [c.63]

Вы инкубируете культуру мутанта i/ lOl дрожжей при рот риктивной температуре (37°С) в течение 2 ч (приблизительна продолжительность клеточного цикла у дрожжей) с тем, чтоб проявился мутантный фенотип. Затем вы переносите клеп в среду, содержащую гидроксимочевину, и инкубируете их пр пермиссивной температуре (20°С). Клетки не делятся. [c.242]

А. В какой фазе клеточного цикла блокирован мутант d lOl пр рестриктивной температуре Объясните результаты опытов обратной сменой температуры. [c.242]

Синхронизировать рост клеток такого мутанта очень труда но вам хотелось бы как можно точнее установить, в какой тон клеточного цикла температурочувствительный продукт гена дол жен действовать, чтобы клетка завершила цикл. Критическа точка, где действует данный продукт,-это точка удара да мутанта. Один толковый приятель, у которого есть хорош микроскоп с нагревательным столиком и видеокамера для i раферной съемки, предлагает вам заснять клетки в поле зреш при повышении температуры и проследить таким способом з поведением отдельных клеток при остановке их роста. Посколы это неподвижный организм, то относительно легко наблюдать изменениями в индивидуальных клетках. Чтобы разобратье [c.242]

А. Опыты со сменой температуры свидетельствуют о том, что мутант d XQl блокирован при 37°С в фазе Gj клеточного цикла. Первый опыт показывает, что точка мутационного блока предшествует точке блокады гидроксимочевиной или совпадает [c.475]

Б. Результаты опыта с мутантом d lQl показывают, что клетки блокированы при 37 °С в фазе S. Из первого опыта следует, что точка мутационного блока предшествует или совпадает с точкой блокады гидроксимочевиной, иначе клетки должны были бы делиться при температуре 20 °С. Второй опыт говорит о то, что точка блокады гидроксимочевиной предшествует точке мутационного блока или совпадает с ней, иначе клетки могли бы делиться при 37 °С. Вместе эти два опыта показывают, что точки мутационного блока и блокады гидроксимочевиной совпадают. Поскольку и гидроксимочевина, и мутация d Q2 действуют на одну и ту же фазу клеточного цикла, порядок обработки не имеет значения клетки останавливаются на фазе S и, следовательно, не делятся. [c.476]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология