Нитратредуктазы

В настоящее время процесс восстановления нитратов представляется в следующем виде. На первой стадии нитраты под действием фермента нитратредуктазы восстанавливаются до нитритов. Донатором протонов и электронов является НАДФ-Н2( или НАД-Нг). Это — довольно сложная реакция, и в ней в качестве промежуточного переносчика водорода принимает участие флавиновый фермент, для проявления активности которого необходим молибден, а также другие вещества и кофакторы. Схематически действие нитратредуктазы изображается следующим образом [c.238]

Для выявления микробной нитратредуктазы ставят тест на восстановление нитрата в нитрит (последний в присутствии N,N-диметил-1-нафтиламина образует диазосоединение, которое окрашивает среду в красный цвет). Культуру выращивают на полужидкой среде, содержащей 0,1 % нитрата, и добавляют смесь указанного реактива с сульфаниловой кислотой, наблюдая в течение нескольких минут за развитием красного окрашивания среды (свидетельствует о присутствии нитрита). [c.33]

Препараты нитратредуктазы проявляют активность также и с цитохромом с вместо нитрата. Однако вопрос о специфичности нитратредуктазы остается нерешенным. [c.397]

Точный механизм участия молибдена в катализе неизвестен. Состояния Мо(1П) и Mo(V) парамагнитны, но легко регистрируемые ЭПР-сигналы отвечают лишь состоянию Mo(V). Этот сигнал легко распознать по его характерной сверхтонкой структуре, содержащей шесть линий. Такой сигнал был зарегистрирован в случае ксантиноксидазы, нитратредуктазы и сульфитоксидазы при их взаимодействии с субстратами. Однако нитрогеназа дает только сигналы ЭПР, характерные для железа. Более того, нет никаких данных, из которых следовало бы, что N2 в нитрогеназе реагирует непосредственно с атомами молибдена. Тем не менее заманчиво предположить, что присутствие молибдена в нитрогеназе связано со способностью Mo(VI) акцентировать три электрона с образованием Мо(П1). Два атома Мо(П1), отдавая далее по три электрона, могли бы доставить те шесть электронов, которые нужны для осуществления реакции (14-10). [c.86]

Нитрат восстанавливается также грибами и высшими растениями перед включением в состав аминокислот и других клеточных компонентов. Первой стадией процесса является восстановление в нитрит. Наиболее изучена ассимилирующая нитратредуктаза из Neurospora ras- [c.430]

С дыхательной цепью нитратредуктазы сопряжены на уровне цитохрома Ь (см. рис. 98, В). [c.406]

В целом, за редким исключением, к семейству энтеробактерий принадлежат культуры грамотрицательных палочек, обладающие тремя признаками ферментация глюкозы, наличие нитратредуктазы и отсутствие оксидазной активности. [c.162]

I — пируват ферредоксин-оксидоредуктаза 2 — гидрогеназа 3 — ферредоксин НАД(Ф)-оксидоредуктаза 4 — формиатдегидрогеназа 5 — ксантиндегидрогеназа 6 — нитрогеназа 7 — ферредоксин СОз-оксидоредуктаза (возможно, это формиатдегидрогеназа, катализирующая реакцию 4 в обратном направлении) 8 — реакция 3, протекающая в обратном направлении 9 — сульфатредуктаза 10 — реакция 1, протекающая в обратном направлении 11 — нитратредуктаза [c.235]

В конце концов до цитратов. Эти бактерии вездесущи и чрезвычайно активны, а потому почти весь попадающий в почву аммиак в конечном счете окисляется до нитратов. Этот процесс носит название нитрификации. Растения и многие виды бактерий при помощи нитратредуктазы вновь легко восстанавливают нитраты до аммиака. Из образовавшегося таким путем аммиака растения синтезируют аминокислоты, а животные, питающиеся растениями, используют эти аминокислоты (как заменимые, так и незаменимые) для построения своих белков. После смерти животных их трупы подвергаются микробному разложению. Аммиак, выделяющийся при распаде белков, возвращается в почву, и нитрифицирующие бактерии превращают его здесь снова в нитриты (КОз) и нитраты N0 . [c.675]

Ферментативная активность. При изучении биохимических особенностей культуры определяют активность протеиназ по разжижению желатины (скорость и характер разжижения при уколе столбика желатины, рис. 12) свертывание и пептонизацию молока (отмечается кислотное свертывание по покраснению синей лакмусовой бумаги с образованием устойчивого сгустка и коагуляции с последующей пептонизацией), а также пептонизацию без предварительного свертывания и скорость изменения молока активность амилазы по величине зоны гидролиза крахмала (проба с раствором Люголя на 3—4-е сутки посева культуры штрихом на крахмалоаммиачном агаре) активность целлюлозы по степени распада клетчатки на среде Гетчинсона активность р-фруктофуранозидазы (инвертазы) по гидролизу сахарозы (с помощью реактива Фелинга ) активность уреа-зы по накоплению аммиака (используется реактив Нес-слера), нитратредуктазы по восстановлению нитрата (на среде Гильтая) до нитрита (нитрит проверяют в кислой среде реактивом цинк-йод-крахмалом). [c.82]

НИТРАТРЕДУКТАЗЫ (NADH- или NADPH нитрат оксидоредуктазы), ферменты класса оксидоредуктаз, катализирующие восстановление нитратов в нитриты [c.256]

Нитратредуктаза таких бактерий, как Е. соЫ, прочно связана с мембраной. Солюбилизированный фермент из Е. oli имеет мол. вес 720 000 и содержит четыре тяжелые и четыре легкие полипептидные цепи, а также четыре атома молибдена [125, 126]. Полагают, что именно этот металл непосредственно взаимодействует с нитратом. Электроны из цепи переноса проходят через цитохром 6555 и попадают на атом молибдена [126]. С нитратредуктазой, по-видимому, тесно связана фор-миатдегидрогеназа (гл. 9, разд. В,3), и донором электронов в процессе восстановления является преимущественно формиат. [c.430]

Зелен, крист. -I- <17% HjO Е о -1-0,219 В (pH 7, 30°С). Раств-сть р. HjO, X. р. EtOH. Акцептор электронов. В нейтр. раств. окисленная форма имеет сннюю окраску, восстановленная форма бесцветна. Восстанавливается флавопротеиновыми ферментами. Использ. как акцептор в р-ции Хилла. Восстановленное соединение использ. как донор электронов, напр, для нитратредуктазы. Окисление Oj протекает о. медл. Тв. в-во уст. на возд. прн хранении в темноте, медл. разл. на свету. Водн. раств. разл. при стоянии, особ, при кисл. pH. Восстанавливается аскорбиновой кисл., дитионитом, восстановленным феназинметосульфатом. [c.302]

Восстановление нитратов до аммиака осуществляется посредством последовательного действия двух ферментов — нитрат- и нитритредуктазы. Нитратредуктаза катализирует НАД Нг-зависи-мое восстановление нитрата до нитрита [c.85]

Аммонификация нитрата. Бактерии кишечной группы способны выделять аммиак в процессе аммонификации нитрата, когда диссимиляционная нитратредуктаза А проводит только первый этап — восстанавливает нитрат до нитрита, а далее нитрит переходит в аммиак в процессе ассимиляции. [c.446]

Ре8-центры + молибден нитрогеназа, диссимиляционная нитратредуктаза, формиатдегидро-геназа и др. [c.234]

В большинстве случаев конечным акцептором электронов служит Оз, который не может быть заменен никаким другим акцептором. Рост отдельных штаммов возможен в микроаэробных условиях. Некоторые тионовые бактерии являются факультативными аэробами они могут использовать в качестве конечного акцептора электронов не только Оз, но и нитраты, восстанавливая их до N3 или только до нитрита. В анаэробных условиях использование нитратов в качестве конечного акцептора электронов индуцирует синтез диссимиляционной нитратредуктазы, осуществляющей перенос электронов дыхательной цепи на нитраты. [c.372]

Полный процесс денитрификации состоит из 4 восстановительных этапов, каждый из которых катализируется специфической мембрансвязанной редуктазой. Нитратредуктазы всех денитрификаторов структурно сходны между собой (содержат Мо—Ре8-бел-ки) и катализируют восстановление нитрата до нитрита в соответствии с уравнением [c.406]

Наряду с коферментами существенную роль в формировании активных ферментов играют железо, медь, магний, марганец, кальций, цинк и др. Металлы могут выступать в качестве коферментов, а также активаторов ферментативной активности. Уже на организменном уровне можно оценить роль того или иного металла в функционировании фермента. Так, дефицит молибдена в пище животных проявляется в падении активности фермента ксантиноксида-зы. Дефицит этого же микроэлемента в питательной среде является причиной резкой инактивации нитратредуктазы у гриба Меигозрот сгавза. Для однозначного ответа на вопрос, является ли металл активатором или неотъемлемой частью зрелого фермента, необходимо получить последний в высокоочищен-ном или гомогенном состоянии. Если металл при диализе не отделяется от фермента, а более жесткое его удаление приводит к полному подавлению каталитической активности, значит, это истинный металлофермент. Металл в этом комплексе прочно связан с белком посредством множественных координационных связей. [c.63]

Бартонеллы выделяют из исследуемого материала при посеве на специальные полужидкие и плотные питательные среды с добавлением гемина, 5—10% крови человека или животных (барана, кролика). Посевы инкубируют во влажной атмосфере с 5 — 10 % СОз при 35 — 37 °С В. ba illifomis — при 21—30 °С). Характерный рост бартонелл проявляется через несколько недель (иногда через 45 — 60 сут). Идентификацию и дифференциацию выделенных чистых культур проводят по характеру и оптимальной температуре роста, подвижности, биохимическим свойствам (каталаза, оксидаза, нитратредуктаза и др.), а также по составу жирных кислот в клетке, определяемому методом газо-жидкостной хроматографии. [c.243]

Путь 1 реализуется в аэробных условиях. Путь 2 существует в микроаэробных условиях (при низком содержании кислорода). Путь 3 к 4 функционируют в анаэробных условиях с использованием в качестве конечных акцепторов электронов (и протонов) фумарата (ФР - фумаратредуктаза) или нитрата (НР - нитратредуктаза) [c.176]

Некоторые виды микроорганизмов могут развиваться как в присутствии кислорода, так и без него, т. е. в анаэробных условиях. Такие микробы относят к группе условных (факультативных) анаэробов. Если в среде есть кислород, они используют его в качестве конечного акцептора аналогично аэробам. В анаэробных условиях конечными акцепторами для них служат соединения типа нитратов. Использование нитратов в процессе дыхания присуще многим видам денитрифицирующих бактерий. Предполагают, что денитрификаторы имеют ту же цепь переноса водорода, что и аэробы, с той лишь разницей, что в цитохромной системе вместо цитохромоксида-зы присутствует фермент нитратредуктаза. В общем виде процесс анаэробного дыхания за счет нитратов может быть записан так [c.65]

Ассимиляционная нитратредукция. Подавляющее большинство бактерий и грибов на первом этапе ассимиляционной нитратредукции восстанавливаются до нитритов. Цикл этих превращений катализирует специфический фермент - ассимиляционная нитратредуктаза В. Второй этап представляет комплекс восстановительных реакций, катализируемых нитратредуктазой, что приводит к образованию аммиака, который используется для синтеза аминокислот и других азотсодержащих компонентов клетки. [c.446]

Восстановление нитратов в нитриты происходит под действием ферментов нитратредуктаз — флавопротеидов, содержащих металл Мо и др. и действующих в присутствии НАД На или НАДФ Нг [c.280]

При восстановлении нитратов в нитриты донором водорода служит НАД-Нг или НАДФ-Нг. Фермент нитратредуктаза представляет собой металлофлавопротеид, содержащий ФАД и молибден. По-видимому, он имеет следующий механизм действия [c.397]

Ассимиляция нитрата. В процессе ассимиляции нитрат сначала восстанавли вается до нитрита, а затем до аммиака последний используется для синтеза аминокислот и других азотсодержащих компонентов клетки. Первый этап катализирует нитпрстредуктаза этот фермент (нитратредуктаза В) находится в цитоплазме, и его синтез индуцируется в том случае, если нитрат оказывается единственным источником азота в питательной среде. Нитрит восстанавливается до аммиака с помощью нитритредуктазы, на что затрачивается 6 электронов. Электроны поступают от 1ЧАВ(Р)Н2 (у грибов и бактерий) или ферредоксина (у [c.305]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология