Метод высоковольтной электронной микроскопии

Методом высоковольтной электронной микроскопии и микродифракции была изучена кристаллическая фаза углерода [5]. [c.22]

Разработанные в последние годы высоковольтные электронные микроскопы (ускоряющий потенциал порядка 200 кВ) дают возможность исследовать относительно толстые образцы толщиной 1 мкм и более. При изучении этим методом двухфазных полимерных [c.355]

Новые перспективы открываются в связи с развитием высоковольтной электронной микроскопии, позволяющей просвечивать сравнительно толстые препараты, например биологические, без их разрушения. По мнению японских специалистов, разработавших в последнее время электронный микроскоп на 350 ке [13], наиболее интересным применением приборов такого класса является стереоскопическое изучение внутренней структуры объектов. До сих пор для этой цели применяют метод ультратонких срезов, который однако, имеет ряд серьезных недостатков, рассматриваемых далее. [c.25]

К другим методам прямого исследования относятся имеющие высокое разрешение темнопольная электронная микроскопия и электронно-оптическая фазовая микроскопия. Эти методы не имеют большого значения для исследователей, начинающих изучать структуру бактерий, так как, чтобы их применять, нужны специальные микроскопы и особая обработка образцов. Специальным методом является также высоковольтная электронная микроскопия, которая, помимо того, что она дает высокое разрешение, позволяет исследовать образцы с большой толщиной без излишнего повреждения электронным [c.116]

Однако структура цитоскелета представляется совершенно иной, если клетки не были обработаны детергентом. Такие препараты можно изучать или с помощью высоковольтной электронной микроскопии (рис. 10-76, Г), или методом быстрого замораживания и глубокого травления (рис. 10-76,Д). Главные волокна цитоскелета связаны здесь между собой тонкими нитями, образующими трехмерную сеть и состоящими, видимо, из белков, которые [c.126]

Однако указанный метод имеет два существенных ограничения. Во-первых, он не позволяет наблюдать митохондриальные контакты. Поэтому не удается ответить на вопрос, что является объектом наблюдения — одна протяженная митохондрия или множество органелл, состыкованных друг с другом. Во-вторых, подобно любой другой методике, использующей электронный микроскоп, при высоковольтной микроскопии исследователь имеет дело с фиксированным материалом, что не позволяет прямо следить за функционированием митохондрий. Чтобы преодолеть последнее затруднение, было решено временно вернуться к световому микроскопу. Этим методом в принципе можно увидеть митохондрии в живой клетке, но тонкие митохондриальные филаменты и сети часто ускользают от наблюдения из-за низкого разрешения микроскопии в проходящем свете. Такого рода ограничение снимается, если работать не с поглощением, а с эмиссией света. Когда эмиссия достаточно интенсивна, источник света можно увидеть в темноте, даже если его не удается наблюдать как тело, задерживающее свет. [c.203]

Электронная микроскопия может давать не только изображения неподвижных, застывших атомов или плоских срезов материи. Высоковольтный вариант метода (применяются электроны, ускоренные напряжением до 3000 кВ) позволяет получать сведения о трехмерной структуре замороженных клеток скоростная съемка с помощью стробоскопической техники дает электронное кино с чрезвычайно малым интервалом между кадрами. Временное разрешение, достигнутое на сегодня, составляет 10 с и позволяет фиксировать даже самые быстрые изменения, происходящие, например, на поверхности катализаторов. [c.196]

Структура, затерявшаяся в цитоплазме клетки. Сеть или решетка очень тонких нитей, образующих основное вещество животных клеток при чрезвычайно большом увеличении. Обычные методы электронной микроскопии не позволяли увидеть эту сеть - она бьша обнаружена лишь совсем недавно благодаря новому методу высоковольтной электронной микроскопии с очень высокой разрешающей способностью. На рисунке показана лишь назначительная часть цитоплазмы клетки, которая буквально пронизана этой сложной трехмерной сетью. [c.25]

Так как эпителиальные клетки обладают высокоорганизованным, характерным цитоскелетом, их часто используют в качестве объекта при разработке новых методов выявления цитоскелетных структур. Интактные клетки PtK были исследованы методом высоковольтной электронной микроскопии с предварительным высушиванием в замороженном состоянии или замещением в замороженном состоянии. В целом замороженные клетки выглядели под микроскопом примерно так же, как и клетки, фиксированные обычными методами [103]. В обоих случаях были видны многочисленные микротрабекулы, которые формировали анастомозы, ветвились, контактировали в цитоплазме с разнообразными фибриллярными элементами, а также прикреплялись к различным органеллам. Картина оставалась достаточно сложной и после кратковременной экстракции клеток бриджем (прямые биохимические данные о полноте такой экстракции отсутствуют). Несколько менее сложная картина наблюдается в том случае, когда для предотвращения осмотического шока в экстрагирующий раствор вводят сахарозу [22]. В препаратах, полученных без сахарозы, от цитоскелета остаются в основном лишь голые филаменты, многие из которых до некоторой степени разрушены [104]. Другой путь состоит в том, чтобы фиксировать клетки смесью глутарового альдегида, таниновой кислоты и сапонина. Такая смесь, по-видимому, обеспечивает частичную экстракцию цитоплазматических белков во время фиксации и служит для цитоплазматических филаментов протравой, так что фибриллярные структуры становятся лучше видны даже на тонких срезах — преимущество, которое отчасти компенсирует неизбежное при таком способе обработки огрубление деталей структуры [105]. Трудность изучения филаментов на срезах ясно осознается при сравнении методик, включающих и не включающих освобождение образца от материала для заливки (рис. 3.6). Было предпринято несколько попыток выявить цитоскелетные [c.62]

В области физической химии наибольший интерес представляет изучение химических реакций газ — твердое тело, для чего в общеы случае требуется сочетание газовой камеры с нагревателем. Как видно из рассмотренных работ, в этом направлении пока сделаны только первые шаги. Условием для наблюдения препаратов при высоких давлениях является минимальная толщина газового слоя, тогда как для осуществления их прокаливания требуется достаточно большой объем газовой камеры. Поэтому оптимальные результаты, полученные в отношении каждого метода в отдельности, вряд ли удастся совместить полностью, во всяком случае в ближайшее время. Дополнительные возможности здесь может дать применение высоковольтной электронной микроскопии, так как пучок сверхбыстрых электронов способен пронизывать значительные толщи газа без заметного рассеяния, [c.44]

Используя обычные тонкие срезы, поворачивая их и фотографируя их под разными углами, можно и в обычном просвечивающем электронном микроскопе получить имитацию трехмерного изображения. При наблюдении в стереоочки полученной стереопары изображений объекта возникает псевлотрехмерное изображение. Толщина образцов, изучаемых этим методом, определяется проникающей способностью электронов или их энергией. Совершенствование метода привело к созданию высоковольтных микроскопов с ускоряющим напряжением до 1 млн. вольт (против 100 тыс. вольт у обычных ПЭМ). Эти гигантские приборы позволяют изучать по метод> просвечивающей электронной микроскопии срезы толщиной в несколько микрометров. [c.186]

Наилучшие изображения получаются после экстракции клеток неионным детергентом-при этой процедуре вымываются фосфолипиды и растворимые белки. Обработанные таким способом, а затем быстро замороженные и подвергнутые глубокому травлению клетки дают поразтельно четкую картину цитоскелета (рис. 10-76, Л). Отдельные актиновые и промежуточные филаменты сохраняют свое первоначальное положение, а при особой методике удается сохранить и микротрубочки. Различные типы белковых нитей можно распознать по их толщине, а в некоторых случаях-по расположению составляющих их субъединиц. Аналогичную картину можно получить, используя метод негативного контрастирования тяжелыми металлами после экстрагирования культуральных клеток детергентом край клетки иногда бывает настолько тонким, что его можно исследовать в электронном микроскопе целиком, не делая срезов (рис. 10-76, Б). Относительно толстые слои цитоплазмы можно изучать с помощью высоковольтной электронной микроскопии (рис. 10-76,5). На таких препаратах белковые филаменты всех трех типов выглядят относительно независимыми они связаны между собой (если вообще связаны) лишь редкими поперечными сшивками. [c.126]

Электронографический анализ осуществляется на электронографах — электронно-оптических вакуумных приборах, которые могут работать и как электронные микроскопы, позволяя получать теневые электронно-оптические изображения, хотя их работа в этом режиме имеет вспомогательное значение. К таким приборам, например, относится электронограф ЭГ-100А. По ходу электронного пучка сверху он имеет следующие основные узлы электронную пушку (источник электронов) двойную электромагнитную линзу кристаллодержатель, позволяющий осуществлять различные перемещения образцов по отношению к пучку электронов камеры образцов проекционный тубус фотокамеру с флюоресцирующим экраном для визуальной работы низко- и высоковольтные блоки питания пульт управления. В электронографе имеется устройство для исследования газов и паров различны < веществ. Разрешающая способность прибора позволяет получать раздельные дифракционные максимумы при различии в меж-плоскостном расстоянии на 0,001 А. Наблюдение дифракционной картины производится на флюоресцирующем экране или фотографическим методом. Электронографическая картина различна в зависимости от типа снимаемого объекта точечная электронограмма образуется при съемке монокристаллов на просвет и на отражение кольца на электронограмме образуются при исследовании поликристаллических веществ дуги и кольца — от веществ, имеющих текстуру. [c.106]

При изучении сплавов состав фаз можно определить химически анализом образцов, составляющих единые фазы, установленные металлографическими методами, или путем приготовления сплавов различного состава и определения фазовых диаграмм, как описано выше. За последние годы разработан другой метод, метод спектрометрического рентгеновского локального микроанализа, который оказался весьма плодотворным при изучении гетерогенных веществ, в том числе горных пород и сплавов. Этот метод позволяет произвести полный химический анализ очень небольших участков образца без его разрзгахения. Высоковольтный пучок электронов, подобный пучку электронов в электронном микроскопе, фокусируют на небольшом участке диаметром - 1 мкм полированной [c.526]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология