Эстераза и химотрипсин

Относительная групповая специфичность проявляется тогда, когда фермент специфичен к типу химической связи, но допускает изменение природы компонентов этой связи. Например, липазы и эстеразы расщепляют не только триглицериды (жиры), но и диглицериды, моноглицериды и другие сложные эфиры. Широкой специфичностью обладают пепсин, химотрипсин и остальные протеолитические ферменты. [c.128]

Белками являются многочисленные ферменты (энзимы) животных и растительных организмов, такие, как ферменты пищеварения — пепсин, химотрипсин, трипсин, различные пептидазы и другие протеолитические ферменты, эстеразы, в частности холинэстераза (стр. 773) и т. д. [c.689]

По механизму действия ацетилхолинэстераза сходна с химотрипсином. Ацетилхолин взаимодействует со специфическим остатком серина в активном центре ацетилхолин-эстеразы с образованием в качестве промежуточного продукта ковалентно связанного ацетил—фермента, а холин высвобождается. Ацетил—фермент далее вступает во взаимодействие с молекулой воды, что приводит к образованию ацетата и регенерированного свободного фермента (рис. 37.12). [c.334]

Г.-белки с мол. м. от 10-15 тыс. до 200-300 тыс. Они проявляют свою каталитич. активность, как правило, в отсутствие к.-л. кофакторов лишь в нек-рых случаях необходимы ионы металлов-гл. обр. Zn " , Со " , Са , Mg " . Для небольшого числа Г. известна первичная, а для нек-рых и пространств, структура молекулы (напр., для лизоци-ма, пепсина, трипсина, химотрипсина). Отмечено значит, сходство структуры ферментов одного подкласса, особенно в области активного центра. Так, мн. протеиназы имеют в активном центре одинаковую последовательность аминокислот Gly Asp Ser Gly Gly Pro (обозначения см. в ст. Аминокислоты]. Близкое строение имеет и активный центр ряда эстераз. [c.561]

Остаток L- . встречается во всех организмах в составе молекул белков, особенно много их в фиброине шелка остаток С. входит также в молекулу фосфатидилсерина. Активность ряда ферментов (трипсин, химотрипсин, холин-эстераза) связана со специфич. реакц. способностью гидроксигруппы остатка С., входящего в структуру их активных центров. [c.325]

Так, у эстераз и эстеролитически активных протеиназ определено наличие в активном центре функционального остатка Сер, который подвергается ацилированию на промежуточной стадии процесса. Активный серил фигурирует в псевдохолинэсте-разе, фосфоглюкомутазе, в химотрипсине и трипсине и в ряде других ферментов. На рис. 6.7 изображена схема связывания субстрата ацетилхо-лина ацетилхолинэстеразой (АХЭ) и схема ингибирования ее активности при высокой концентрации субстрата [32]. В эсте-разный участок АХЭ входят нуклеофильная группа V и смежная с ней диссоциирующая кислотная Рис. 6.9. Схема действия креатинкиназы. группа НХ. Ацильный ос- Переходное состояние, [c.375]

Хотя кинетические исследования определенного типа были проведены со многими известными в настоящее время ферментами, только некоторые из них детально и широко изучены. К их числу относятся [3] пептидазы пепсин, трипсин, химотрипсин и карбо-ксипептидаза эстеразы холннэстераза и аденозинтрифосфатаза уреаза фумараза лактикодегидраза пероксидаза и каталаза. [c.109]

Ионы металлов. Ферменты, можно разделить на три класса ления активности которых необходимы иптактные тиольные группы (папаин, фицин и подобные им ферменты растительного происхождения некоторые катепсины). 2. Ферменты, которые ингибируются диизопропилфторфосфатом и подобными фосфор-органическпми соединениями (сериповые эстеразы, например трипсин, химотрипсин, субтилизин, холинэстераза, тромбин и т. д.). 3. Ферменты, для проявления активности которых необходима добавка иона металла или наличие прочно связанного иона металла. К ферментам класса (3) относится ряд дипептидаз, которые не удалось получить в чистом виде глицилглицин-дипептидаза [активирующее действие ионов металлов уменьщается в следующем ряду Со(П) >Л п (II) >М (11) =0>7п П), причем последний ион выступает уже в роли ингибитора] [183], глицил-ь-дипептидаза [2п( П)—фермент из мышц крысы. [c.124]

Химотрипсин является представителем ферментов, относящихся к классу сериновых протеиназ или эстераз [8]. Этот класс объединяет такие ферменты, в активном центре которых находится активированная оксиметильная группа серина. Реакция химотрипсина с низкомолекулярными эфирами и амидами является двухстадийным процессом (так называемая реакция двойного замещения). На первой стадии субстрат после предварительного связывания с ферментом аиилирует активный центр. На второй стадии ацилированный фермент сольволизуется [c.241]

Поскольку ДФФ не является полным структурным аналогом нормальных субстратов этих ферментов, опасность присоединения метки не к активному центру, а к каким-то другим участкам молекулы фермента в этом случае, естественно, больше, нежели в случаях описанных выше. Однако скорость, стехиометрия и специфичность реакции присоединения ДФФ явно указывают, что метка действительно попадает в активный центр. Известно, например, что ДФФ специфически фосфорилирует один из двух остатков серина в химотрипсине. Химотрипсин может быть помечен и многими другими аналогичными агентами, в том числе и-нитрофенилацетатом, причем в каждом случае аципируется одна и та же гидроксильная группа серина, тогда как никакие другие группы не ацилируются. Во многих (хотя и не во всех) исследованных эстеразах и протеиназах ДФФ фосфорилирует гидроксильную группу только того серина, с К-концом которого связан либо аланин, либо глицин. Данные, характеризующие окружение реакционноспособного серина в некоторых белках, приведены в табл. 29. Из таблицы видно, что даже ферменты, сильно различающиеся по своей специфичности, могут иметь одинаковую последовательность аминокислот в участках, примыкающих к остатку серина, содержащему реакционноспособную гидроксильную группу. Это позволяет думать, что специфичность фермента и его способность ката- [c.198]

Строение активного центра в настоящее время в наибольшей степени выяснено для группы ферментов так называемого сери-нового катализа, обладающих сильным эстеразным действием (протеиназы и некоторые эстеразы). Мы уже знаем, что фосфор-органические соединения типа диизопропил-фторфосфата (ДФФ) являются специфическими необратимыми ингибиторами таких ферментов. Было доказано, что, например, в химотрипсине фос-форильная группа присоединяется к гидроксилу одного из остатков серина. В химотрипсине имеется более 20 остатков серина. Так как одна молекула ДФФ полностью убивает активность фермента, то было ясно, что эта одна из сериновых групп играет особую роль и тесно связана с активным центром. [c.76]

Клосс и Шрёдер [1263а] предложили способ ферментативного гидролиза эфиров N-защищенных и свободных пептидов в препаративных масштабах на основе использования химотрипсина и трипсина. При этом было показано, что эстеразная активность ферментов весьма мало зависит от природы С-концевого аминокислотного остатка. В то же время эфиры пептидов с С-концевой D-аминокислотой, а также со-эфиры не способны к ферментативному гидролизу. Протеолитическое расщепление пептидных связей в условиях гидролиза сложных эфиров под действием эстераз очень незначительно (ср. [1470]). [c.93]

Активность эстеразы можно определять либо измеряя флуоресценцию индоксила либо интенсивность окраски ингидо При расщеплении резоруфинацетата холинэстеразой (pH 7,4) или фос-фатазой и а- или у-химотрипсином образуется интенсивно флуоресцирующий резоруфин 20, флуоресценцию которого можно измерить уже при концентрации его 10" М. [c.171]

Серин в эстеразах (холинэстераза) и протеолитических ферментах (химотрипсин) находится в окружении, с одной стороны, глицина и глутаминовой кислоты или аспарагина, а с другой — аланина или глицина. Естественно предположить, что это соседство и повышает его специфическую активность, доводя ее до уровня ферментной. Но попытки создать модель фермента из коротких пептидных цепочек, содержащих последовательность Гли-асп-сер-гли, привели к отрицательным результатам такие фрагменты не обнаружили каталитической активности. Следовательно, не ближайшие соседи или во всяком случае не только они ответственны за высокий уровень активности гидроксила серина. Вполне возможно, [c.176]

Действие других эстераз, например химотрипсина, трипсина, некоторых эстераз насекомых и ряда других энзимов, также мо- жет быть ингибировано фосфорорганическими пестицидами. Для всех этих ферментов существуют специфические субстраты. Учи- утывая это, для определения пестицида можно выбрать не холин- эстеразу, а другой фермент и соответствующий ему субстрат, или даже смесь ферментов, что до некоторой степени и осуществляется в методах, использующих подавление активности плазмы крови. [c.17]

Успехи в этой области достигнуты благодаря применению к эстеразам электронной теории органической химии. Для холинэстеразы Уилсон [38] получил веское доказательство преимущественного образования комплекса (ЕЗ)] (I), сопровождаемого отщеплением спирта и образованием ацетилирован-ного фермента (Е5)2, который затем гидролизуется. Фосфорные ингибиторы действуют путем образования крепко связанного фосфорилированного фермента, и имеются доказательства того, что активным центром является имидазол. Этот вывод подтвердили Догерти и Васлоу [39] в случае химотрипсина. Лейдлер [40] более склонен принять механизм для гидролитической активности, предложенный на основании работы Свена и Брауна по каталитической активности 2-оксихинолина [41], который предполагает наличие промежуточного комплекса (Е5)1 (II), содержащего молекулы эфира и воды. [c.319]

Об активном центре эстераз мы знаем еще довольно мало. Илюется много оснований думать, что наряду с серином в него входит гистидин. Это следует, во-первых, из данных но фотоокис-лительной инактивации ферментов, во-вторых, из зависимости активности фермента от pH. Кривые активности ферментов как функции pH имеют характерную колоколообразную форму. Для сахаразы п трипсина подобные кривые изображены на рис. 50. Их можно истолковать как результат наложения двух кривых титрования. Так, например, можно полагать, что для действия трипсина необходимо, чтобы какая-то группа с р порядка 5—6 и вторая группа с рК 8—9 находились в ионизованном состоянии. Первая группа — кислая, вторая — основная. У химотрипсина [c.149]

Кроме холинэстераз, паратион или его продукт окисления параоксон подавляют и другие жизненно важные для животных и растений ферменты, а именно различные эстеразы, липазы, трипсин, химотрипсин, каталазы, перо-ксвдазы [482, 483]. Это не значит, однако, что такая ингибирующая активность паратиона также заметно влияет на токсичность его для теплокровных и насекомых [254]. В табл. 15 сопоставлены данные об острой токсич- [c.68]

Синтез эфиров пептида метионина из изопропилового эфира метионина под действием кристаллического химотрипсина [514а] или гомогенатов печени [5146] является аналогичным процессом, повидимому, связанным с эстераз-ной активностью используемого фермента. [c.193]

Для примера рассмотрим гидролиз N-ацетилтирозина под влиянием а-химотрипсина. а-Химотрипсин (КФ 3.4.4.5) относится к классу гидролаз он действует как пептидаза, расщепляя пептидную связь, или как эстераза, осуществляя гидролиз эфиров. Взаимодействие а-химотрипсина с субстратом осуществляется в две стадии путем так называемой реакции двойного замещения. Многочисленные данные говорят о том, что сначала происходит образование ацетилированного по серину (в а-химотрипсине это Ser 195) фермента а-Химотрипсин-f СНз — СО — Туг — - СНз — СО — а-Химотрипсин + Туг (V.1) [c.160]

Обработка химотрипсина радиоактивным ДИФФ или зарином и расщепление меченого белка дает ряд фосфопептидов, для которых установлена последовательность аминокислот. Последовательность аминокислот активной области химотрипсина [328—330], трипсина [331—335], алиэстеразы печени [336], псевдохолин-эстеразы, тромбина [337] и фосфоглюкомутазы [316] может быть представлена следующим образом [c.132]

Другое семейство близкородственных белков образует несколько сериновых эстераз. К ним относятся протеолитические ферменты химотрипсин, трипсин, эластаза и тромбин. На рис. 2.19 сравниваются аминокислотные последовательности этих четырех белков. Сравнение выявляет соответствие не только в аминокислотной последовательности, но и в расположении многих дисульфидных поперечных связей, а также в локализации очень реакционноспособного остатка серина, который, как известно, находится в активных центрах всех этих ферментов. Можно предположить, что такое сходство первичных структур должно приводить к сходству их третичной структуры. Именно это и представлено на рис. 2.20, где изображены три из четырех упомянутых выше белков. Следует, однако, обратить внимание на то, что, несмотря на сходство последовательностей, структуры и механизмов функционирования, позволяющее рассматривать эти четыре белка как родственные в эволюционном смысле, все же считать их тождественными никак нельзя. Различием аминокислотных последовательностей, и особенно пространственных структур, можно объяснить некоторые особенности субстратной специфичности этих белков и механизма их действия. [c.79]

Химотрипсин. трипсин, субтилизин, эластаза, тромбин, ацетилхолин-эстераза, плазмин [c.295]

Смотреть страницы где упоминается термин Эстераза и химотрипсин: [c.39] [c.561] [c.109] [c.29] [c.267] [c.159] [c.633] [c.265] [c.336] [c.107] [c.158] [c.73] [c.132] [c.583] [c.590] [c.302] [c.233] [c.323] [c.326] [c.353] [c.132] [c.139]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология