Натрия азид, приготовление раствора

Иммуноанализ проводят следующим образом. Полистирольные пробирки (80X11 мм) покрываются антителами при обработке 1 мл раствора антител. Растворы антител разбавляют ОД М N a-карбонатного буфера (pH 9,8) или фосфатным (солевым) буфером. Пробирки с этими растворами оставляют на 3 ч при 37 °С для хранения раствор оставляют в пробирках на холоду. Перед определением необходимое число пробирок промывают 0,9%-ным хлоридом натрия, содержащим 0,05% твина 20. В каждую пробирку помещают 0,5 мл одного из следующих растворов 1) стандартный раствор иммуноглобулина G, 2) неизвестный образец, 3) буферный раствор. После этого добавляют 0,1 мл разбавленного конъюгата щелочной фосфатазы и иммуноглобулина G (приготовленного с помощью сщивапия глутаровым альдегидом). Для разбавления используют фосфатный (солевой) буферный раствор, содержащий 1% сывороточного альбумина человека и 0,02% азида натрия. Пробирки инкубируют при комнатной температуре в течение ночи (16 ч) на роторной мешалке так, чтобы поверхность, покрытая антителами, покрывалась 0,6 мл раствора, находящегося в каждой пробирке. Затем пробирки промывают три раза раствором Na l-твин. Количество фермента, присоединенного к иммуноглобулину G, связанному стенками пробирок, покрытых антителами, определяют, добавляя 1 мл 0,05 М Na-карбонатного буфера (pH 9,8), содержащего 1 мг/мл п-нитрофенилфосфата и 1 ммоль/л хлорида. магния. Через 30 мин реакцию останавливают, добавляя 0,1 мл 1 М ХаОН. Измеряют оптическую плотность при 400 нм и строят стандартный график зави-си.мости ферментативной активности (изменение оптической плотности в единицу времени) индивидуальных образцов от содержания в них иммуноглобулина G. [c.382]

Иод-азидный раствор. 3 г азида натрия и 1,75 г иодида калия растворяют в 100 мл 0,01 н. раствора иода, приготовленного из 0,1 и. непосредственно перед, употреблением. Раствор сохраняется в темной склянке в течение 2—3 дней. [c.219]

Водные растворы азотистого водорода легко получить обработкой технического азида натрия серной кислотой. Чистый азотистый водород чрезвычайно взрывчат, а его пары обладают очень неприятным физиологическим действием, поэтому рекомендуется быть чрезвычайно осторожным при его приготовлении. Нельзя обрабатывать серной кислотой сухой азид натрия или его холодный раствор, так как при этом образуется чистый азотистый водород (т. кип 37°), который может конденсироваться в безводную жидкость или давать концентрированный водный раствор, являющиеся чрезвычайно взрывчатыми. [c.78]

Для приготовления реактива 3 г азида натрия растворяют в 100 мл 0,1 N раствора иода в KJ. Ионы SjOa и S N мешают [771]. Реакция используется для обнаружения в животном угле и красителях [1530], в органических соединениях после сплавления их со щелочью [852]. [c.46]

За обычный рабочий день, когда идет очистка фермента, иногда проводят лишь одно или два, но чаще десять или двадцать измерений активности, а во время элюции их может понадобиться еще больше. Многие смеси для тестирования ферментов содержат целый ряд компонентов — буферы, соли, субстраты, кофакторы и т. д. поэтому приготовление отдельно каждой смеси не только неудобно, но и плохо в том отношении, что вследствие небольших изменений и ошибок в процессе приготовления состав смеси каждый раз будет меняться. Лучше всего подсчитать, сколько смеси расходуется за день, и приготовить весь необходимый объем сразу, исключив из него субстрат, который добавляют в последний момент при каждом определении. Некоторые реактивы, наприМер простые буферные и солевые растворы, можно смешивать и хранить (охлажденными) в течение нескольких недель. Таким образом можно приготовить реактив А , включающий все компоненты буфера, соли и, возможно, кофакторы чтобы получить полную смесь, в него нужно добавить лишь один или два компонента. Многие биохимические реактивы весьма устойчивы в незамороженных растворах, при условии что исключено бактериальное или грибковое заражение. Для этого обычно достаточно добавить одну каплю 20%-ного раствора азида натрия на каждые 20 мл раствора. Многие исходные концентрированные растворы можно хранить при этом в течение нескольких месяцев в холодильнике. Другие реактивы могут быть химически неустойчивыми, и поэтому их надо приготавливать каждый день заново. Азид натрия редко влияет на ферменты, и, во всяком случае, он сильно разбавляется, если исходные растворы реактивов были концентрированными. В качестве примера приведем протокол смешивания реактивов для определения гексокиназы. [c.307]

Суспензию клеток ( 1—2 мл) хроматографируют при 4°С на приготовленной таким образом колонке в фосфатно-солевом буферном растворе (pH 7,2) при скорости потока буферного раствора 40—60 мл/мин. Клетки, не обладаюшие сродством к связанному гаптену, свободно проходят через колонку, в то время как клетки, имеющие сродство к связанному гаптену, количественно элюируются несколько позднее. По окончании разделения колонку промывают 100 мл раствора лактозы и снова уравновешивают фосфатно-солевым буферным раствором биогель со связанным гаптеном хранят при 4°С в 0,02%-ном растворе азида натрия. [c.39]

Приготовленные для серебрения растворы годны к употреблению не больше одного месяца. Сохранять их надо раздельно в темном прохладном месте тщательно беречь от пыли и особенно от органических примесей. Необходимо иметь в виду, что при долгом стоянии аммиачного раствора серебра в нем может образоваться азид серебра. Прежде чем использовать в работе аммиачный раствор серебра, не взбалтывая раствора, внимательно проверьте, не образовались ли яа дне или стенках сосуда черные кристаллы. Если они есть, то, следовательно, образовался азид серебра, и брать в руки этот сосуд очень опасно. Достаточно малейшего сотрясения и может произойти взрыв большой разрушительной силы. Такой раствор надо уничтожить. Для этого его разбавляют дистиллированной водой до растворения кристаллов. После этого из раствора можно осадить серебро в виде хлорида, действуя раствором хлористого натрия. [c.196]

Известно несколько методов, исключающих стадию приготовления растворов азотистоводородной кислоты. Одна из них заключается в нагревании азида натрия и ледяной уксусной кислоты с нитрилом в изопропаноле или [c.13]

Термостатированные растворы смешивают в последовательности 2 мл раствора иодида калия, 0,5 мл раствора азида натрия, 0,5 мл раствора иода, буферный раствор, исследуемый раствор. При этом pH раствора должен быть 4,6. Реакцию проводят в термостате. По истечении 10 мин реакцию останавливают добавлением раствора хлорида кадмия и измеряют на фотометре оптическую плотность иодкрахмального раствора. Предварительно готовят серию стандартов с различным содержанием сульфид-иона (применяют раствор сульфида натрия в воде). Чувствительность реакции — 0,01 мкг1мл. Каталитическая активность зависит от способа приготовления раствора сульфида натрия. [c.175]

Вместо азотистой кислоты можно также применять этилнитрит [2], амилнитрит [3, 4] и другие алкилни-триты [5] в водном или спиртовом растворе в присутствии едкого кали или алкоголята калия. В описанном ниже методе применяется бутилнитрит. Его легче приготовлять и с ним проще работать, чем с этилнитритом. Этот метод можно применять также для приготовления азида натрия. [c.135]

Приготовление бензольного раствора азотистоводородной кислоты ). В трехгорлой колбе с капельной воронкой, термометром, мешалкой и отводной трубкой готовят взвесь равных весовых количеств азида натрия и теплой воды. На каждые 0,1 моля азида натрия добавляют 40 мл бензола, охлаждают смесь до 0° и при перемешивании добавляют эквивалентное количество концентрированной серной кислоты. Температура при этом не должна подниматься выше 10°. Затем смесь снова охлаждают до 0°, отделяют бензольный слой и сушат его сульфатом натрия. [c.616]

После приготовления йодазидного раствора проверяют чистоту перекристаллизованного азида натрия. Для этого в три колбочки наливают по 2 мл 3% раствора спиртовой щелочи, по 2,5 мл 5% раствора уксусной кислоты, добавляют по 0,5 г углекислого кальция, по 10 мл йодазидного раствора, по 20 мл дистиллированной воды и титруют 0,01 н. раствором мышьяковистой кислоты (см. ниже). Результаты титрования всех трех проб должны совпадать. Через 2 ч повторяют проверку раствора и затем проверяют его еще раз через двое суток. Если результаты титрования при третьей проверке равны первоначальным — можно считать азид хорошо очищенным если титр азида начнет снижаться, следует очистить его еще раз или готовить только такое количество йодазидного раствора, какое необходимо для анализа в данный день. [c.222]

Приготовленный таким образом иммуносорбент переводят в 0,01 М фосфатный буфер (pH 7) с 0,15 М Na l, заполняют им небольшую колонку, на которую и наносят антисыворотку или иммуноглобулины, растворенные в том же буфере. Колонку хорошо промывают фосфатным буфером, но с удвоенной концентрацией соли, а иногда и с добавкой 1—2% неионного детергента Тритона Х-100 —все это для снятия неспецифически сорбированных белков. Элюировать антитела с колонки можно 0,1 М уксусной кислотой или 4,5 М раствором Mg b. Затем следуют завершающие операции нейтрализации, диализа и, если надо, концентрирования раствора очищенных антител. Колонку регенерируют, хорошо промывая посадочным буфером, и хранят на холоду с добавкой 0,1% азида натрия. [c.111]

Азид натрия (КаМз). Получают действием оксида азота на амид натрия, или из гидразина, этилнитрита и гидроксида натрия бесцветные кристаллические чешуйки. Растворим в воде, слегка разлагается во влажной атмосфере. Сильно изменяется под воздействием диоксида углерода в воздухе. Чувствителен к удару, подобно гремучей ртути, но менее чувствителен к нагреванию, чем гремучая ртуть. Используется для приготовления инициирующих взрывчатых веществ для детонаторов. [c.136]

Техника работы на агарозе. Приготовление колонки. Техника упаковки агарозы в колонку не отличается от уяаковки геля сефадекса. Размер колонки может варьировать в зависимости от дели работы. Но наиболее благоприятное отношение высоты столба геяя к диаметру является 20 1. Благодаря малой вариабильности размера гранул геля колонка наполняется очень хорошо следуюш,им образом. Суснензию агарозы разводят соответствующим образом до такой консистенции чтобы из нее можно было легко удалить пузырьки воздуха. Колонку, установленную вертикально, наполняют буфером я через воронку вливают порцию суспензии геля. Гранулам геля дают осесть на дно, открывают кран для оттока буфера и медленно наполняют колонку гелем до нужной высоты. Колонку уравновешивают промыванием буферным раствором. Если в работе используют коммерческий препарат агарозы, то его нужно отмыть от содержащегося в нем азида натрия Чтобы достичь воспроизводимых результатов, важно очень аккуратно наполнить колонку. Столб геля в колонке стабилизируй ют до определенной высоты, применяя постоянное гидростатическое давление в течение 24 часов. [c.145]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология