Эксклюзионная хроматография селективность

Селективность колонок в эксклюзионной хроматографии определяется их разделительной емкостью. Если набор колонок оптимизирован по диапазону разделения, то для повышения селективности приходится увеличивать число колонок, а следовательно, и продолжительность анализа. [c.52]

Характер аналитических задач, решаемых с помощью важнейшего из этих методов — инструментальной или регистрационной колоночной ЖХ,— определяется природой используемых стационарной и подвижной фаз, а также принципом детектирования элюатов. Универсальные детекторы (рефрактометрический, диэлькометрический, транспортные и др. [109, 111, 2541) использовались для количественного анализа самых различных ГАС (аминов [255, 256], порфиринов [257], жирных кислот [258, 259], фенолов [260], сернистых соединений [261 ]) в условиях адсорбционной или координационной хроматографии, а также для определения молекулярно-массового распределения высокомолекулярных веществ [69, 109, 262, 2631 при эксклюзионном фракционировании или разделении на адсорбентах с неполярной поверхностью, например, на графитирован-ных углях. Качественная идентификация элюируемых веществ в этих случаях проводится по заранее установленным параметрам удерживания стандартных соединений и при изучении смесей неизвестного состава часто затруднена из-за отсутствия таких стандартов. Групповая идентификация ГАС отдельных типов существенно облегчается при использовании специфических селективных детекторов спектрофотометрических (УФ или ИК), флю-орометрического [109, 111, 254 и др.], пламенно-эмиссионного [264], полярографического [111], электронозахватного [265] и др. [c.33]

Несмотря на эти недостатки этот детектор имеет несомненные достоинства. Во-первых, он является одновременно универсальным и селективным при детектировании по поглощению С—Н-связи он обнаруживает практически любые органические вещества, а по поглощению функциональных групп (например, ОН, 0=0, 0=0 и т.д.) — только соединения, содержащие такие группы. Во-вторых, сигнал детектора почти не зависит от молекулярной массы вещества, что существенно облегчает количественную интерпретацию результатов. В-третьих, он может работать при температурах до 150 °С. Все эти особенности обусловливают ценность ИК-детектора для эксклюзионной хроматографии синтетических полимеров. [c.159]

Из соотношения (III. 17) следует, что, варьируя Л/", /С и а Для двух веществ, всегда можно добиться практически любого желаемого значения К - При адсорбционной и распределительной хроматографии Kr максимален при К2 - оо, тогда а- оо, ( t — 1) а = 1 — 1/а = 1 и Kft, = 0,25N / . При эксклюзионной хроматографии можно подобрать условия, когда К = О и Кг = Vs/Vm — случай очень селективного сорбента, когда первый пик выходит со свободным объемом колонки V , а второй с полным объемом (1/ + 1/ ). Этим условиям соответствует Kfi 0,2N / . Таким образом, независимо от используемого метода разделения, максимально достижимое значение Кц ограничивается только значением N колонки. [c.55]

Принципиальными отличиями эксклюзионной хроматографии от других вариантов являются заранее известная продолжительность анализа в конкретной используемой системе, возможность предсказания порядка элюирования компонентов по размеру их молекул, примерно одинаковая ширина пиков во всем диапазоне селективного разделения и уверенность в выходе всех компонентов пробы за достаточно короткий промежуток времени, соответствующий объему У . Хотя данный метод применяют, главным образом, для исследования ММР полимеров и анализа макромолекул биологического происхождения (белки, нуклеиновые кислоты и т.д.), указанные особенности делают его чрезвычайно перспективным для анализа низкомолекулярных примесей в полимерах и предварительного разделения проб неизвестного состава. Получаемая при этом информация существенно облетает выбор наилучшего варианта ВЭЖХ для анализа данной пробы. Кроме того, микропрепаративное эксклюзионное разделение часто используют в качестве первого этапа при разделении сложных смесей путем комбинации различных видов ВЭЖХ. [c.42]

Еще большую эффективность имеет сорбент PRP-1 с размером зерен около 5 мкм. который выпускают с 1984 г. набитым в колонки размерам 150X4,1 мм, По селективности данный материал подобен обращенно-фазным сорбентам ie но работоспособен в диапазоне рН=1—13 при концентрации буферных солей до 0.5—1 М. Кроме того, его можно использовать в эксклюзионной хроматографии для разделения молекул с молекулярной массой от 2X10 до 10 , а также в ион-парной хроматографии. [c.100]

Коэф. емкости к существенно влияет на величину R при изменении к от О до 10 (оптим. пределы) сильно возрастает. Значение к определяется уд. пов-стью сорбента и его кол-вом в колонке, а также константой адсорбц. равновесия (константой Генри). Коэф. селективности а определяется различием констант адсорбц. равновесия двух разделяемых компонентов. При увеличении а (от I до 5) резко возрастает, при дальнейшем увеличении а-меняется мало Селективность колонок зависит от хим. структуры пов-сти (в эксклюзионной хроматографии-геом. структуры) сорбента, состава элюента, т-ры колонки и строения разделяемых соединений. Т. к. сорбция хроматографируемых в-в в Ж. X. определяется попарным взаимод. трех осн. компонентов системы-сорбента, разделяемых в-в и элюента, то изменение состава элюента - удобный способ оптимизации процесса разделения. [c.152]

Пористые полимеры, обычно используемые для разделения в эксклюзионной хроматографии, могут быть успешно использованы для сорбционной хроматографии в системах с обращенной фазой, как это показано на рис. 10.13. Порагель PN — сшитый пористый полимер — применяется с водным метанолом (полярный растворитель) для разделения стероидов. Хотя эффективность таких колонок относительно низка Neff — 100 для циастерона), полученное разрешение обеспечивает высокую селективность. На рисунке показаны кривые, полученные с двумя детекторами ультрафиолетовым и рефрактометром. [c.261]

Эксклюзионная хроматография полимеров предъявляет ряд специфических требований к растворителям, используемым в качестве элюента при разделении [25, 106 ]. Эти растворители должны полностью растворять исследуемый полимер, иметь малую вязкость и быть устойчивыми к действию окислителей и препятствовать деструкции полимера в процессе анализа. Чем лучше термодинамическое качество растворителя, тем селективнее разделение. Растворитель должен обеспечивать максимальную чувствительность детектора, допускать быстрое выделение полимера из фракций, а также быть достаточно полярным, либо иметь полярные добавки (спирты, ТГФ), чтобы подавить адсорбцию полимера. В случае рефрактометрического детектора выбор растворителя определяется, при прочих равных условиях, максимальной разницей в показателях преломления полимера и растворителя. В случае абсорбционных детекторов (ИК- и УФ-спектрофотометров) растворитель должен обладать минимальной оптической плотностью в области рабочих длин волн детектора. При использовании в ка честве сорбента гелей необходимым условием является хорошее набухание геля в растворителе —элюенте. Иногда гидрофобные гели можно использовать для разделения водорастворимых полимеров, при введении в элюент ПАВ. Например, добавка 0,1% Ыа-ла-урилсульфата в воду позволяет проводить на стирогелях разделе ние декстранов [365]. [c.190]

Кислые ионообменные смолы на основе сульфополистирола, такие, как дауэкс 50, редко используют для разделения нуклео-зидов, поскольку N-гликозидная связь пуриновых оснований с углеводным остатком чувствительна к кислотам. Альтернативный подход заключается в использовании анионообменных смол, которые представляют собой высокопористый полистирол, но в качестве функциональных групп содержат остатки четвертичных аммониевых оснований. При pH 4 азотистые основания и нуклеозиды селективно вытесняются с этих смол [16] (этот процесс был назван катионная эксклюзионная хроматография ), а при более высоких значениях pH их разделение подчиняется принципам анионного обмена [16, 17]. [c.164]

Адсорбция ИК-света может быть использована как для селективного, так и неселективного детектирования. Если ранее детекторы этого типа применяли главным образом в эксклюзион-ной хроматографии с колонками большого диаметра, то в настоящее время они все шире внедряются в высокоэффективную жидкостную хроматографию. На рис. П1.22 приведена схема современного ИКД. Свет от источника 1 проходит через обтюратор 2 и диск 3 с укрепленными на нем тремя интерференционными фильтрами на диапазоны 2,5—4,5 4,5—8,0 и 8,0—14,5 мкм. Диск [c.270]

Эффект ограниченного проникновения в поры сорбента самых крупных молекул можно успешно использовать для разделения очень больших молекул. В зависимости от размера молекул (в растворе) они будут в большей или меньшей степени исключаться из пор сорбента, что в результате повлияет на их время удерживания. Этот эффект используется в эксклюзион-ной, или гель-проникаюшей хроматографии. В этих методах умышленно устраняются любые взаимодействия между растворенным веществом, и неподвижной фазой. Растворенные молекулы остаются исключительно в подвижной фазе, но доступный объем этой фазы и соответственно объем удерживания могут меняться в пределах общего объема подвижной фазы до так называемого исключаемого объема (предела эксклюзии), который представляет собой объем подвижной фазы вне нор. В этом объеме элюируются очень большие растворенные молекулы ( исключаемые вещества), которые будут первыми появляться на хроматограмме. Эксклюзионную (гель-проникающую) хроматографию целесообразнее всего использовать для анализа соединений с молекулярной массой более 3000 (см., например, [1], с. 270). Поскольку этот метод разделения основан на различиях в размере молекул, а не (термодинамической) селективности, в данной книге он не рассматривается. [c.33]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология