Разделение оснований ДНК методом хроматографии на бумаге

Бумажную хроматографию применяют в основном для определения гидрофильных веществ. При проведении разделения на импрегнированной бумаге метод можно использовать для разделения липофильных веществ. При получении неудовлетворительных результатов разделения методом фракционного распределения даже с большим числом ступеней разделения применяют сочетание метода бумажной хроматографии с методами, основанными на других принципах разделения (адсорбции, ионного обмена). Область применения бумажной хроматографии можно расширить, применяя бумагу специальных сортов или импрегнируя обычную бумагу. [c.359]

В таком случае вступает в свои права комплекс мощных аналитических методов — хроматография. Это способ анализа веществ, основанный на их физическом разделении. Например, при хроматографии на бумаге вещества двигаются по хроматограмме с током растворителя с различными скоростями, индивидуальными и характерными для данного вещества в данных условиях. Последняя оговорка весьма существенна в разных лабораториях и в разных руках точно воспроизвести абсолютные скорости — их называют хроматографическими подвижностями — весьма и весьма трудно. Позтому здесь не обойтись литературными данными — нужно прямое сравнение двух образцов. [c.58]

Для установления химического строения выделенных индивидуальных полисахаридов используется ряд химических методов, основанных на реакциях деструкции с изучением ее продую-ов метилирование с последующим гидролизом периодатное окисление частичный кислотный гидролиз контролируемый ацетолиз ферментативный гидролиз щелочная деполимеризация. Для разделения и идентификации продуктов деструкции используют хроматографические методы (хроматография на бумаге, тонкослойная хроматография и газо-жидкостная), в том числе в комбинации с масс-спектроскопией и др. [c.282]

Кроме осаждения и соосаждения, существуют и другие методы разделения, основанные на различных явлениях на поверхности твердой фазы. Общий и наиболее характерный из этих методов основан на применении твердого носителя (колонка с зернами поглотителя, полоска бумаги или пластинка и т. п.). Смесь, пропускаемая через такой носитель, постепенно разделяется на отдельные компоненты. Процессы разделения основаны иногда на ионном обмене, в других случаях — на адсорбционных явлениях или на сочетании экстракционных и адсорбционных процессов. Первых два способа относятся к хроматографии. [c.43]

Широкое применение в биохимических исследованиях получил метод хроматографии на бумаге, основанный на различной способности компонентов исследуемой смеси веществ распределяться между водой и органическим растворителем. При этом одна из фаз — органический растворитель — подвижная, т. е. свободно просачивается по порам бумаги, а другая — вода — неподвижная. Бумага является инертным носителем водной фазы. При разделении аминокислот в качестве подвижного растворителя можно использовать фенол. Скорость передвижения на бумаге отдельных компонентов смеси будет разная, вследствие их различных коэффициентов распределения, которые выражаются [c.123]

Для разделения пуриновых и пиримидиновых оснований, нуклеозидов и нуклеотидов в лабораторной практике используют все виды хроматографии хроматографию на бумаге (включая электрофорез на бумаге и фингерпринт ), тонкослойную хроматографию [16], все типы колоночной хроматографии (адсорбционную, распределительную, ионообменную и гель-проникающую). Считают, что при разделении методом тонкослойной хроматографии оптимальное количество нуклеотидов составляет 0,2—30 мкг методом хроматографии на бумаге 10—200 мгк методом электрофореза на бумаге 100—500 мкг. На колонке можно делить нуклеотиды в количестве от 50 мкг до нескольких сотен миллиграммов. Конечно, в отдельных случаях аналитического или препаративного разделения эти рамки можно существенно раздвинуть. [c.37]

Метод хроматографии на бумаге основан на разделении веществ между двумя фазами, одной из которых — неподвижной — является бумага, на которой задерживается большая часть водной фазы вторую — подвижную фазу — представляет собой протекающий органический растворитель. Условия эти более благоприятны для разделения органических веществ, чем для неорганических, ионный характер которых мешает переходу их из водной фазы в органический растворитель. Несмотря на это, хроматография на бумаге неорганических веществ получила большое развитие, так как было найдено, что можно подобрать способ, при котором ионный характер веществ маскируется образованием ониевых солей с сильными минеральными кислотами или образованием комплексов с различными органическими реактивами. [c.256]

В капельном анализе часто применяются электрохимические методы разделения. Иногда, особенно при проведении хроматографии на бумаге, применяется дифференциальная диффузия, в которой электрическое поле используется для достижения желаемого разделения. Большое значение в работе с капельными реакциями имеют электрографические методы, применяемые при исследовании металлов, сплавов и руд. Принцип разделения основан на использовании анодного растворения металлов. Практически в качестве анода применяют исследуемое вещество, а в качестве катода—алюминиевую фольгу. Между электродами помещают фильтровальную бумагу, смоченную надлежащим реагентом. При наложении соответствующего напряжения металлы, растворяясь, переходят с поверхности образца, и их место в образце фиксируется реагентом на бумажном отпечатке. Общее [c.78]

Теоретические сведения. Хроматографическое разделение смесей веществ на бумаге относится к методам распределительной хроматографии, основанным на различии величин коэффициентов распределения анализируемых веществ между подвижным и неподвижным растворителями. Подвижным растворителем является смесь одного или нескольких веществ с водой. Неподвижным растворителем является набухшая целлюлоза. Целлюлоза набухает за счет воды, которая находится в подвижном растворителе. [c.73]

Ионообменная хроматография для разделения нуклеиновых оснований и нуклеозидов не имеет особых преимуществ перед хроматографией на бумаге. Емкость ионитов по основаниям и нуклеозидам невелика, разделение трудоемко и длительно. Однако Щ7о для получения точных количе- 20 ственных результатов все-таки предпочтительна ионообменная 10 хроматография. Описан ряд методов разделения оснований и нуклеозидов (учитывая амфотерность [c.325]

Хроматография — метод разделения и анализа смеси веществ, основанный на различной сорбции компонентов анализируемой смеси определенным сорбентом. Впервые X. предложена в 1903 г. русским ученым М. Цветом. Разделение ведут в колонках, наполненных силикагелем, оксидом алюминия, ионообменными смолами (ионитами) и др., или же на специальной бумаге. Вследствие различной сорби-руемости компонентов смеси (подвижная фаза) происходит их зональное распределение по слою сорбента (неподвижная фаза) — возникает хроматограмма, позволяющая выделить и проанализировать отдельные вещества (процесс подобен многоступенчатой ректификации). В зависимости от агрегатного состояния подвижной фазы различают газовую и жидкостную X. по механизмам разделения — ионообменную, осадочную, распределительную и молекулярную (адсорбционную) X. в зависимости от техники проведения разделения в X. различают колоночную (колонки сорбентов), бумажную (специальная фильтровальная бумага), капиллярную (используют узкие капилляры), тонкослойную X. (применяют тонкие слои сорбентов). Методами X. анализируют смеси неорганических и органических соединений, концентрируют следы элементов. В химической технологии X. применяют для очистки, разделения веществ. X. позволяет разделять и анализировать смеси веществ, очень близких по свойствам (напр,, лантаноиды, актиноиды, изотопы, аминокислоты, углеводороды и др.). [c.151]

Хроматографическое разделение аминокислот. Для аналитических целей определения аминокислот в смесях разделение их производится хроматографией на бумаге или на ионитах. Метод десорбционного анализа, разработанный Муром и Штейном [29], основан на сорбции аминокислот сульфокатионитом и десорбции кислотой или буфером—нитратом натрия. Фракции с колонн собираются обычно автоматическим приспособлением и анализируются колориметрически реакцией с нингидрином. Аминокислоты в отдельных фракциях идентифицируются по порядку, в котором они [ВЫХОДЯТ из колонны при десорбции буферами с повышающимся pH. [c.597]

Для определения содержания "8 в смеси различных типов пенициллина применяются также методы разделения, основанные, главным образом, на хроматографиче-ской адсорбции во, распределительной хроматографии и (в том числе — на бумаге ч ) и противоточном распределении . [c.514]

Этот метод разделения основан на распределении соединений между двумя несмешивающимися жидкими фазами. Он отличается от обычной распределительной хроматографии тем, что ни одна из фаз не фиксируется на сорбенте или бумаге, однако в основе его лежит тот же принцип, что и в традиционной распределительной хроматографии, а именно различие в коэффициентах распределения соединений между двумя несмешивающимися фазами. В качестве фаз для противоточного разделения применяют смеси растворителей, буферов, солей и различные комплексообразующие реагенты. [c.77]

Современные теоретические представления о механизме хроматографических процессов в колонках или в тонких слоях (в том числе и на бумаге) возникли при рассмотрении адсорбционно-хроматографических закономерностей, открытых М. С. Цветом. По мере открытия новых хроматографических явлений, известные ранее закономерности в той или иной мере использовались для теоретической интерпретации наблюдений в области ионообменной, распределительной, осадочной и других разновидностей хроматографии. Такая преемственность в формировании теоретических концепций влечет за собой необходимость при обсуждений различных по механизму процессов хроматографии, объединяемых наименованием сорбционные процессы , исходить из сложившихся теоретических представлений об адсорбционно-хроматографических закономерностях и явлениях [5, 61. Это обстоятельство принято во внимание при изложении теоретических основ хроматографии как метода разделения гомогенных смесей (гл. I). Однако рассматривать здесь более подробно метод адсорбционной хроматографии нет оснований ввиду его ограниченного применения в анализе неорганических соединений. [c.10]

В табл. 1 дана классификация хроматографических методов анализа, основанная на этих показателях. Как видно изданных, приведенных в таблице, при хроматографическом анализе наиболее часто используется колоночная техника работы. Один и тот же метод хроматографического анализа может применяться в различных вариантах, например, осадочную хроматограмму можно получить в колонке с сорбентом, на бумаге или в гелях. Определенный принцип разделения, например, распределение молекул между двумя фазами, лежит в основе различных методов хроматографического анализа. Необходимо также отметить, что в методах тонкослойной хроматографии возможен практически любой принцип разделения — сорбционный, распределительный, ионообменный и т. д. Однако чаще всего разделение в тонких слоях сорбента используется в адсорбционной, распределительной и ионообменной хроматографии жидкостей. [c.7]

Принцип метода. Метод разделения веществ, основанный на различии в их коэффициентах распределения между двумя несмешивающимися жидкими фазами, одна из которых нанесена на бумагу, называется распределительной бумажной хроматографией. [c.113]

По механизму разделения хроматографии на бумаге является распределительной. Метод основан на различии в коэффициентах распределения между двумя несмешивающимися фазами. Неподвижная фаза в этом случае удерживается в порах специальной хроматографической бумаги, которая служит носителем. Подвижная фаза продвигается вдоль листа бумаги, главным образом благодаря капиллярным силам. Для количественной оценки подвижности веществ в хроматографической системе используют параметр равный отношению скорости движения зоны определенного компонента к скорости движения фронта подвижной фазы. Значения определяют как и в ТСХ. На подвижность веществ в условиях хроматографии на бумаге влияет не только коэффициент распределения, но и взаимодействие их с волокнами, условия проведения эксперимента и характеристика бумаги. Мето- [c.614]

Хроматография — метод разделения газов, паров, жидкостей и растворенных веществ на границе двух фаз — подвижной и неподвижной. Хроматография на бумаге (бумажная хроматография) — один из видов распределительной хроматографии. Метод основан на различии коэффициентов распределения разделяемых веществ между двумя мало-смешивающимися растворителями. В качестве носителя неподвижной фазы используют специальную хроматографическую бумагу. Она должна быть химически чистой, однородной по плотности и обеспечивать определенную скорость движения растворителя. [c.45]

Фильтровальная бумага использовалась для разделения веществ еще до разработки принципов распределительной хроматографии. Различные авторы использовали бумагу для разделения красителей, основываясь на новаторской работе русского ботаника Цвета, который первый разделил красители растительного происхождения при помощи адсорбционной хроматографии. Однако этот метод основан преимущественно на явлениях адсорбции обычно его называют капиллярным анализом. [c.444]

Хроматография на бумаге основана на использовании в качестве иммобилизованной фазы высококачественной фильтровальной бумаги, адсорбирующей воду. В последнее время широкое распространение получила тонкослойная хроматография вместо бумаги здесь используется тонкий слой силикагеля, нанесенный на стеклянную пластинку. Этот метод гораздо удобнее хроматографии на бумаге, поскольку дает более быстрое и качественное разделение (рис. 2-34). Для разделения летучих веществ применяется газовая хроматография, основанная на [c.160]

Применение методов хроматографии на бумаге для быстрого анализа пуриновых и пиримидиновых оснований [76, 77] в гидролизатах небольших количеств рибонуклеиновых кислот вскоре показало, что молярная эквивалентность этих оснований скорее была исключением, чем общим правилом. Еще более важным было наблюдение, что разделение смеси нуклеотидов в щелочном гидролизате рибонуклеиновой кислоты при помощи ионообменной хроматографии дает изомерные пары нуклеотидов, являющихся, как позже было показано, нуклеозид-2 - и пуклеозид-З -фосфатами [78]. Хотя эти изомеры не подвергались взаимопревращению в щелочи, кислота легко катализировала миграцию фосфатного остатка между 2 - и З -гидроксильными группами. Таким же методом были обнаружены 5 -фосфаты аденозина, цитидина, гуанозина и уридина (среди прочих продуктов) после гидролиза кишечной фосфодиэстеразой рибонуклеиновых кислот, предварительно обработанных рибонуклеазой [79]. Со значительно более высокими выходами нуклео-зид-5 -фосфаты получены при действии диэстеразы змеиного яда на рибонуклеиновые кислоты из дрожжей и печени теленка гидролизаты содержали также свободные нуклеозиды и нуклеозид-2 (3 ),5 -ди-фосфаты [80]. [c.373]

Наиболее удобный и чаще всего использующийся метод концентрирования кобальта (а иногда одновременно и его отделения от мешающих элементов) заключается в извлечении дитизоната кобальта хлороформом или четыреххлористым углеродом [403, 422, 438, 491—493, 496, 652, 827, 1037, 1267, 1369, 1389, 1464] или эфиром [1092]. Применяется и экстракция диэтилдитиокарбамината [1185, 1186], пирролидиндитиокарбамината (637, 1365] или нитрозонафтолатов 428, 575, 1138] кобальта толуолом, изоамилацетатом и другими органическими растворителями. Роданидные комплексы кобальта экстрагируют амиловым спиртом и диэтиловым эфиром [538]. Кобальт осаждают 8-оксихинолином [1294] или рубеановодородной кислотой 184]. Из других методов концентрирования и разделения следует упомянуть ионообменные методы, основанные на поглощении хлоридного комплекса кобальта анионитом [796, 1378, 1407], и методы хроматографии на бумаге [491, 493, [c.209]

Предложен метод определения германия, фосфора и мышьяка [625], основанный на спектрофотометрировании желтых" пятен гетерополикислот определяемых элементов после их разделения хроматографированием на бумаге и проявлении азотнокислым раствором парамолибдата аммония. В качестве подвижного растворителя применяют бутанол, насьпценный 10%-ной HNOg. Разделение проводят методом нисходяш ей хроматографии. Метод применим для определения 2 мкг фосфора в присутствии 20-кратного количества Si, As, V и 5-кратного количества Ge. Если количества Fe, Мо и W соответственно составляют менее чем 0,15, 1,25 и 2,5 ч. от присутствующего количества фосфора, то эти элементы не мешают анализу. Хром мешает определению, если содержание его составляет более чем 0,15 ч.от присутствзтощего содержания фосфора. Мешающее влияние Fe и Сг, по мнению авторов, обусловлено образованием фосфатных комплексов этих элементов. [c.102]

В настоящее время хроматографические методы в значительной степени вытеснили все другие методы фракционирования липидов в аналитическом и микропрепаративном масштабе. Для разделения сложных смесей липидов на отдельные классы соединений использовали адсорбционную и распределительную хроматографию на колонках с силикагелем, на целлюлозных фильтрах, импрегнированных силикагелем, и на бумаге из стекловолокна. Распределительная хроматография с обращенными фазами использовалась для разделения членов винилогомологического ряда на гидрофобизованной колонке или на гидрофобизованной бумаге. Газовую хроматографию использовали в виде распределительно-хроматографического варианта в первую очередь для разделения метиловых эфиров жирных кислот. Разделение смеси липидов по степени ненасыщенности можно осуществить путем хроматографического разделения на силикагеле комплексных ртутноацетатных соединений ненасыщенных липидов. Для выделения кислот и для фракционирования сильно полярных липидов была использована ионообменная колоночная и ионообменная бумажная хроматография. Методом хроматографии на колонках с мочевиной или на бумаге, пропитанной мочевиной, можно отделить жирные кислоты с прямой цепью от кислот с разветвленной цепью. Эффект разделения основан на образовании соединений включения неразветвлеиных жирных кислот с мочевиной. Разли шые хроматографические методы разделения липидов описаны в многочисленных обзорах [23, 86, 96, 100]. [c.144]

Рандерат первым описал анализ методом ХТС нуклеиновых оснований, нуклеозидов и мононуклеотидов [68—71], а также анализ нуклеотид-полифосфатов и нуклеотид-коферментов [71—73]. По эффективности разделения ХТС на целлюлозе и силикагеле Г превосходит хроматографию на бумаге [69, 70]. При получении хроматограммы на слое целлюлозы и хроматограммы на бумаге при совершенно одинаковых условиях пятна на тонком целлюлозном порошке получаются меньше и более резко очерченными, чем на волокнистой бумаге [71]. Кроме того, для разделения производных нуклеиновых кислот методом ХТС затрачивается меньше времени, чем для разделения методом хроматографии на бумаге [70—72]. [c.442]

Согласно Тамму, Шапиро, Лифшицу и Чаргафу [88], дистиллированная вода пригодна для разделения методом хроматографии на бумаге пурин-и пиримидин-оснований и их нуклеозидов. Рандерат [69, 71], а также Рандерат и Струк [70] нашли, что вода обеспечивает также хорошее разделение на слое целлюлозы в течение 45 мин. Рандерат [69] использовал воду для фракционирования пуклеооснований и нуклеозидов на силикагеле Г. [c.443]

Для разделения весьма малых количеств многокомпонентных смесей на индивидуальные компоненты широко применяют методы хроматографии на бумаге и в тонком слое. Неизбежно, что с развитием этих методов должны предприниматься некоторые попытки количественного определения индивидуальных компонентов в зонах. Первые попытки такого рода сделаны в 1949 г. Фишером, Парсонсом и Холмесом, предложившими измерение размеров зон. Пэди и Тру-тер в 1962 г. ввели методы, основанные на математическом соотношении между площадью зоны и количеством присутствующего в ней вещества, которые успешно используются в настоящее время. Однако широкое распространение получили и физико-химические методы оценки зон при хроматографическом разделении на бумаге и в тонком слое. [c.7]

Подробное описание применения метода хроматографии на бумаге для разделения пуриновых и пиримидиновых производных можно найти в многочисленных обзорах, посвященных этому вопросу [9, 16, 17, 18]. Вкратце хроматография сводится к следующему. Небольшое количество гидролизата, полученного одним из описанных выше методов, наносят вблизи одного конца полоски фильтровальной бумаги, после чего производят обычные для одномерной хроматографии операции с использованием таких растворителей, как насыщенный водой к-бутанол. Конец полоски фильтровальной бумаги вблизи пятна гидролизата погружают в лоток с растворителем другой конец полоски свободно подвешивают под стеклянным колпаком, накрывающим всю систему. Под ним создается атмосфера, насыщенная парами растворителя. Растворитель медленно передвигается по фильтровальной бумаге, увлекая за собой основания или нуклеотиды. При этом различные соединения передвигаются с различной скоростью, что и делает возможным их разделение. Примерно через 24 час бумагу вынимают и высушивают, отметив предварительно положение фронта растворителя. Затем определяют положение пятен отдельных оснований или нуклеотидов. Для этого обычно пользуются наиболее быстрым методом Холидэя и Джонсопа [10], который состоит в просматривании пятен неносредствеппо в ультрафиолетовых лучах, прошедших через подходящий фильтр. С целью сохранения результатов получают отпечатки хроматограммы на специальной фотобумаге, облученной при подходящих условиях ультрафиолетом. Белые пятна на темном фоне такого отпечатка соответствуют веществам (основаниям), поглощающим ультрафиолет (Маркхэм и Смит [5]). Один из подобных отпечатков приведен на фиг. 3. [c.30]

Смеси аминокислот можно фракциопировать также с помощью давно известного метода хроматографии на бумаге, основанного на различиях в коэффициентах распределения аминокислот между органической и водной фазами. Хроматография па бумаге с использованием какой-нибудь одной системы растворителей обычно не дает возможности осуществить полное разделение всех аминокислот. Значительно большей разрешающей способ-ностью обладает метод двумерной хроматографии. При этом после хроматографирования в одном направлении с использованием одной системы растворителей хроматограмму поворачивают на 90° и продолжают разделение с помощью второй системы растворителей. Типичная двумерная хроматограмма гидролизата белка приведена на фиг. 12. Индивидуальные аминокислоты проявляются пршгидрииом в виде пятен сине-фиолетового цвета. Пятна можно вырезать, элюировать и определить оптическую плотность элюатов, которая пропорциональна количеству соответствующей аминокислоты. Этот метод более трудоемок и обычно менее точен, чем автома- [c.58]

С. И. Бурмистров показал, что метод хроматографии на бумаге пригоден для идентификации ариламинов, получающихся при восстановлении азокрасителей. На основании идентификации аминов можно определить состав исходных азокрасителей. На бумаге можно достигнуть полного разделения двух компонентных смесей некоторых ароматических аминов, нанося раствор смеси (полученный экстрагированием водно-щелочного раствора, образующегося после восстановления азокрасителя, эфиром, бензолом или хлороформом) на бумагу, обработанную парами соляной, муравьиной или уксусной кислоты и проявляя хроматограмму несколькими каплями бензола. Амины располагаются на бумаге, обработанной кислотами, в порядке, зависящем от их основности, причем наиболее основной амин остается в центре. При последующей обработке хроматограммы растворами нитрита натрия и а-нафтола в центре хроматограммы появляется окрашенная полос- [c.317]

Принцип распределительной хроматографии основан на различии в коэффициентах распределения аминокислот между водой и органическим растворителем. Особенность метода распределительной хроматографии на бумаге по сравнению с обычной экстракцией ам.инокислот из водного раствора органическим растворителем заключается в том, что одну из фаз, чаще всего водную, помещают на какой-нибудь инертный твердый носитель, а органический растворитель — подвижная фаза,— проходя через первую, извлекает и распределяет аминокислоты на бумаге в соответствии с их коэффициентами распределения. Положение аминокислот на бумаге определяют по отношению скорости движения аминокислоты скорости движения фронта растворителя и обозначают Rf. Величина за висит в первую очередь от строения аминокислоты, затем от системы растворителей, pH среды и сорта бумаги, Чем полярнее аминокислота, тем меньше она растворяется в органических растворителях и тем меньше ее R . Увеличение длины углеродной цепи повышает . Введение в молекулу полярных групп, например, гидроксильной, аминной или карбоксильной понижает Rf Так, Rf фенилаланина в системе фенол/вода = 0,85, а тирозиит 0,51. Другие примеры изменения в зависимости от строения аминокислоты представлены на рис. 3 и 4. Подбирая соответствующие смеси растворителей, можно провести достаточно тонкое разделение аминокислот. Наиболее часто пользуются для такого разделения системами вода — фенол — аммиа вода — бутапол — уксусная кислота бутанол — аммиак — коллидин и т. д. Разделение можно проводить на одномерной или двумерной хроматограммах. Можно пользоваться также различными типами распределительной хроматографии на бумаге — нисходящей, восходящей и радиальной. Величины Rt для каждой из систем растворителей оказываются постоянными при соблюдении [c.479]

Метод хроматографии на бумаге. Долгов время метод хро матографии на бумаге был единственным методом определенш нунлеотидного состава ДНК. Определение состава ДНК этим мето дом состоит из следующих основных этапов выделение ДНК, ei гидролиз до азотистых оснований, разделение их с помощью хро матографии на бумаге, элюирование оснований и последующа ультрафиолетовая спектрофотометрия. [c.130]

Применен метод хроматографии распределения на бумаге для разделения и анализа синтетических дикетопиперазинов. Метод основан на качественной реакции ангидридов с 3,5-динитробензойной кислотой. [c.347]

Очистка извлечения. Для очистки извлечений чаще эго проводится повторное переведение солей алкалоидов в водный створ и свободных оснований в органический растворитель (см. 133). Кроме того, для очистки извлечений, а также для разделения калоидов широко используется хроматографический метод (ко ночная хроматография, хроматография в тонком слое сорбента на бумаге). [c.145]

Существует много методов отделения серебра от других элементов и разделения сложных смесей, основанных на применении ионообменной и бумажной хроматографии, хроматографии на импрег-нированной бумаге, электрохроматографии и др. [c.163]

При разделении менее сложных смесей (10—15 пептидоа) часто опускается стадия ионообменной хроматографии. Выбор схемы разделения проаодится на основании анализа так называемых пептидных карт. Для получения пептидной карты (рис. 10) смесь пептидоа, образовавшаяся в результате ферментативного или химического гидролиза белка, наносится в анде небольшой полоски на лист хроматографической бумаги или пластинки с тонким слоем целлюлозы и подвергается электрофорезу или хроматографии во взаимно перпендикулярных направлениях. После проявления пептидной карты специфичным реактивом иа бумаге или пластинке образуется характерный для данного белка набор пятен, их взаимное расположение позволяет оценить эффективность использованных методов разделения и выбрать оптимальный вариант. [c.53]

Хроматография — метод разделения смесей, основанный на избирательном распределении их компонентов между двумя фазами, одна из которых (подвижная) движется относительно другой (неподвижной). Основное достоинство хроматографических методов заключается в разнообразии механизмов разделения. Это может быть адсорбция, распределение между двумя жидкими или жидкой и газовой фазами, ионный обмен, гель-фильтрация, комплексообразование, образование малорастворимых соединений и др. Соответственно различают адсорбционную (газовая и жидкостная), распределительную (газожидкостная хроматография, экстракционная хроматография, распределительная хроматография на бумаге), ионообменную, гель-проникающую (эксклюзион-ная), комплексообразовательную (адсорбционная, лигандо-обмеиная, хроматография на хелатных сорбентах), осадочную хроматографию. Возможны и другие методы. Дополняя друг друга, хроматографические методы позволяют решать широкий круг аналитических задач. Этим объясняется ведущее место хроматографии среди методов разделения, имеющихся в арсенале современной аналитической химии. [c.77]

В противоположность этому, в случае метода РРР (разделение — реакция — разделение) в обоих направлениях разделение проводят при точно одинаковых условиях (например, одинаковые растворители). Поэтому соединения, не разлагающиеся при разделении, должны лежать на одной линии, а именно на диагонали между направлением 1 и 2. Таким способом можно просто установить, происходит ли в данном растворителе изменение какого-либо вещества смеси. Если на основании хроматографического разделения в направлении 1 предположить протекание реакции, приводящей к структурным изменениям одного или нескольких компонентов, то, проводя разделение с этим же растворителем в направлении 2, можно твердо установить, идет эта реакция или нет. Этот простой метод позволяет быстро определить изменение отдельных компонентов смеси под действием излучения ( -, рентгеновские, УФ-лучи), газов и температуры. Итак, дело касается вопросов, представляющих весьма большой интерес (защита от излучения, фотохимия, испытание на стабильность). Этот уже давно известный в хроматографии на бумаге метод РРР был успешно использован при изучении дезактивации перетрина (рис. 149) [601. [c.45]

Сообщения о разделении деметаллированных нефтяных порфиринов более информативны. Эти смеси удалось разделить на спектрально различающиеся фракции методом колоночной и тонкослойной хроматографии на оксиды алюминия и силикагеля [88, 96], а также хроматографированием на бумаге [86]. Какой-либо дискретности состава порфиринов во всех этих случаях отмечено не было отсекание фракции проводилось, как правило, чисто механически по объему собранного элюата или по длине пробега пятна. Лишь с распространением приборной жидкостной хроматографии высокого давления было достигнуто разделение порфириновых оснований на дискретные фракции [90, 101]. [c.324]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология