Электрофорез яичный альбумин

Для построения калибровочной кривой при определении молекулярных масс используют белки-стандарты тропонин С (18 000 Да), тропонин I (24 000 Да), тропонин Т (38 000 Да), яичный альбумин (42 000 Да) и бычий сывороточный альбумин (68 000 Да), а также стандартный набор для определения молекулярной массы белков. При электрофорезе в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия препарат миозина дает расположенную почти у старта интенсивную полосу тяжелых цепей с м. м. ок. 20 ООО Да и три слабые, но отчетливые полоски легких цепей с м. м. ок. 20 ООО Да для самой тяжелой из них и около 16 000 Да — для самой легкой. Подвижность этих полос в описанных выше условиях высока, поэтому при достаточно большой продолжительности электрофореза эти полоски могут обнаружиться почти у фронта красителя (бромфенолового синего). [c.397]

Получение белков в кристаллическом состоянии еще не является достаточным доказательством их однородности (как это происходит в случае обычных веществ). Методом электрофореза было доказано, что некоторые белки (например, яичный альбумин, альбумин сыворотки, токсин касторовых семян), хотя и образуют индивидуальные кристаллы, все же являются смесями двух или нескольких очень сходных белков. [c.417]

В последние годы для определения гомогенности белков пользуются электрофорезом при различных значениях pH (см. гл. V). При помощи электрофореза было показано, что кристаллический яичный альбумин, бычий сывороточный глобулин, Р-лактоглобулин и все остальные исследованные по этому методу белковые препараты представляют собой смесь нескольких белков [25]. Вполне возможно, что совершенно однородных белковых молекул вообще не существует и так называемые чистые белки представляют собой в действительности смесь очень [c.15]

При рассмотрении вопросов, касающихся электрофореза белков, уже указывалось, что водные растворы белков обладают большим показателем преломления, чем вода, и что это обстоятельство может служить для определения положения подвижной границы при электрофорезе. Показатель преломления растворов белка линейно возрастает по мере увеличения концентрации белка в растворе. Разница между показателем преломления 1-процентного раствора белка и показателем преломления воды получила название удельного прироста преломления. Этот прирост слегка варьирует в зависимости от характера белка. Так, например, для сывороточного альбумина быка он равен 0,001901, для сывороточного альбумина человека — 0,001887, для яичного альбумина — 0,001876, для у-глобулинов человека — 0,001875 [106]. Температура и наличие в растворе солей не влияют заметным образом на удельный прирост преломления, поэтому концентрация белка в растворе может быть определена весьма быстро путем измерения показателя преломления раствора и вычитания из него показателя преломления диализата. Необходимо, однако, помнить, что прирост показателя прелом-. ления липопротеидов, равный 0,00171, значительно меньше, чем соответствующая величина для белков, не содержащих жиров [107]. [c.139]

В 1889 г. Гофмейстер обнаружил, что яичный альбумин, выделенный из белка куриных яиц, кристаллизуется из концентрированного раствора сернокислого аммония, из которого предварительно были осаждены остальные белки [232]. Наилучшие результаты могут быть достигнуты в том случае, если рН раствора, из которого осуществляется кристаллизация, приблизительно равен 4,8, а температура близка к 20° [162]. Яичный альбумин, приготовленный этим методом или по какому-либо из его вариантов [224, 233, 234] и перекристаллизованный несколько раз, является, как показали иммунологические [235] и иные пробы [236, 237], чистым веществом. Электрофорез обнаруживает наличие двух [c.54]

Электрофорез Продукты гидролиза яичного альбумина пепсином 1100 (средний) 399 [c.163]

Исследование поведения кристаллических белков в электрическом поле (методом электрофореза) показало, что способность некоторых белков к кристаллизации нельзя рассматривать как доказательство их гомогенности. Так, например, оказалось, что яичный альбумин представляет собой смесь по крайней мере двух компонентов, глобулин сыворотки крови состоит из трех и более основных компонентов, обозначаемых а-, р- и у-глобулины.. Таким образом, экстракты, полученные из клеток или органов, содержат смесн различных белков. [c.10]

При каком значении pH будет достигнуто наиболее эффективное разделение методом электрофореза следующих белковых смесей а) многлобин и химотрипсиноген б) яичный альбумин и пепсин в) сывороточный альбумин и гемоглобин (р/ белков приведены в таблице) [c.36]

Другие животные альбумины и глобулины. Важнейшими протеинами яичного белка являются альбумин (о во альбумин), глобулин, флавопротеин (коналъбумин) и мукоид (овомукоид). Последний обусловливает свойства яичного белка вытягиваться в нити . Яичный альбумин кристаллизуется особенно гладко, но нри помощи электрофореза было доказано, что он представляет собой смесь нескольких белков. [c.445]

Важным результатом, полученным при изучении электрофореза растворов белков, было открытие того, что многие белки, которые являются чистыми по другим критериям, в действительности состоят из нескольких видов молекул. Ярким примером этого может служить яичный альбумин (рис. 125). Этот белок кристалличен (поэтому свойственно предположить, что все молекулы являются почти абсолютно идентичными) и показывает однородность в ультрацентрифуге (отсюда следует, что все молекулы имеют один и тот л<е молекулярный вес и коэффициент трения). Этот белок также показывает однородность в экспериментах по электрофорезу при различных условиях, таких, какие использовал Лонгворс, чтобы получить данные, представленные на рис. 123 (см. также рис. 125, верхнюю диаграмму). Однако если используется поле большой напряженности и эксперимент проводится очень длительно, то появляются благоприятные условия для разделения компонентов с почти одинаковыми подвижностями. При данных условиях, как показывает рис. 125, было найдено, что чистый белок состоит из трех отдельных компонентов. Предполагают , что эти три компонента являются идентичными во всех отношениях, кроме количества фосфата, которое они содержат, причем в них могло быть два, один и ни одного фосфатного иона соответственно. Фосфат связан с белком через гидроксильную группу в боковой цепи, и каждая фосфатная группа, [c.489]

Под дополнительными методами имеются в виду методы хроматографии на колонке (гл. 4), электрофореза и гель-проникающей хроматографии (гл. 5). В первом случае разделение исследуемых полимерных образцов происходит на основании зависимости растворимости от молекулярного веса и химического состава. Нетрудно понять механизм разделения по молекулярным весам, поскольку растворимость уменьшается при увеличении молекулярного веса. Но растворимость зависит также от присутствия в полимере полярных групп в связи с этим при наличии химической неоднородности происходит фракционирование и по составу молекул. Если полярность групп в разных звеньях макромолекулы примерно одинакова, то фракционирование определяется главным образом величиной молекулярного веса. При больших различиях в степени полярности разных групп влияние полярности может оказаться более сильным, чем влияние молекулярного веса, и разделение на фракции сможет осуществляться преимущественно по химическому строению. Именно на этом было основано разделение сывороточного альбумина лошади и яичного альбумина в водном фосфатном растворе на фракции с различным содержанием.кислых фосфатных групп [17]. Белки с большим содержанием серы были разделены методами хроматографии на фракции с различным содержанием серы и азота [18]. Влияние на результаты фракционирования сродства между исследуемым соединением и материалом носителя было изучено на примере рацемической смеси поли-4-метилгексена-1 [19]. При фракционировании методом хроматографии [c.299]

Таким образом, число сульфгидрильных и дисульфидных групп в яичном альбумине точно не известно. Вероятно, присутствует 4 или 5 сульфгидрильных и 1 или 2 дисульфидпые группы. Разные результаты, которые были получены отдельными группами исследователей, по-видимому, могли быть обусловлены тем фактом, что существуют две формы нативного яичного альбумина, отличающиеся по скорости денатурации нагреванием при pH 3 и по некоторым другим показателям. Труднее денатурирующаяся форма образуется в белке яйца из более легко денатурирующейся формы по мере старения яйца [45—47]. Другая возможная причина несовпадения результатов заключается в гетерогенности белка, которая проявляется при электрофорезе на крахмальном геле [48]. Этим методом можно обнаружить до шести фракций точное число и подвижность различных фракций альбумина, по-видимо-му, генетически детерминированы. Причина этой гетерогенности, помимо того, что она обусловлена различным содержанием фосфора (раздел 7), в настоящее время неизвестна. [c.12]

Кристаллический куриный яичный альбумин обнаруживает гетерогенность при некоторых велпчиных pH при проведении свободного электрофореза. Электрофореграмма альбумина в этом случае более проста, чем электро-фореграмма, полученная при электрофорезе на крахмальном геле [48]. Электрофореграммы, полученные с помощью шлиреновской оптической системы при свободном электрофорезе при pH от 4,2 до 9,5 I = 0,1), показывают, что в альбумине присутствуют два компонента в соотношении примерно 3 1. Большая часть более подвижна и названа компонентом А , меньшая фракция названа компонентом Аг [84]. Эти фракции легко разделяются хроматографией па катионообменниках [85]. [c.15]