Пероксидазы промежуточные формы

В работе [Березин и др., 19756] показано, что автокаталитиче-ский характер оксидазного окисления ДФК обусловлен образованием в ходе реакции Н О и других соединений типа гидроперекисей. Активной промежуточной формой пероксидазы, которая [c.33]

На основании проведенного анализа реакций совместного окисления субстратов можно сказать, что широкая субстратная специфичность пероксидазы обеспечивается разнообразными механизмами ее окислительных реакций, которые осуществляются, главным образом, за счет высокой реакционной способности промежуточных форм фермента, образующихся только при наличии стабильного гем-белкового комплекса. [c.44]

После модификации трех функционально важных СООН-групп пероксидазы остаточная активность составляет 30% активности нативного фермента. По-видимому, эти группы расположены вблизи участка связывания о-дианизидина и важны для процесса переноса электронов с органического субстрата — донора водорода — на промежуточные формы Е, и Е пероксидазы. В результате модификации о-дианизидином изменяется заряд, увеличивается объем и гидрофобность СООН-групп, поэтому уменьшение констант и может быть обусловлено также затруднением диссоциации и выхода продукта в раствор. В то же время связывание органического субстрата, о-дианизидина с ферментом по этим же причинам может облегчаться. На пероксидазное окисление субстратов, связывающихся в других участках активного центра пероксидазы, модификация СООН-групп фермента не оказывает влияние. [c.122]

Д часть молекулы кислорода. По-видимому, здесь возникает так называемая димерная форма [4], имеющая структуру, показанную на схеме. Образование промежуточных продуктов с активными веществами может обусловить ряд каталитических эффектов при действии солей тяжелых металлов. Это особенно отчетливо наблюдается у солей меди в реакциях окисления посредством перекиси водорода (пероксидазный процесс). В данном случае пероксидазное действие меди, обнаруживаемое даже при разбавлении 1 10 , почти равно активности фермента-пероксидазы. Промежуточным продуктом здесь, по-видимому, является перекись меди С11О2 или СиОг Н2О. [c.138]

Методом быстро сканирующей спектрофотометрии показано, ЧТО при реакции образуются две промежуточные окисленные формы цитохром с пероксидазы, аналогичные промежуточным формам (Е, и Е ) пероксидазы. Стехиометрия цитохром с пероксидазной реакции указывает на то, что восстановление обоих интермедиаторов — соединения I в соединение II и далее в стабильную восстановленную форму фермента — это одноэлектронный процесс, сходный с общепероксидазным [Ronnberg et al., 1981]. Однако исследование электронной структуры соединения [c.19]

Соединение E, является промежуточной формой пероксидазы с константой перехода в Е 5 с [ han e, 1949Ь]. Константа скорости образования Е, не зависит от pH в диапазоне от 3,5 до [c.37]

Хотя тем самым представление о промежуточных соединениях пероксидазы с Н2О2 как о простых аддитивных комплексах ставится под сомнение, эта работа, тем не менее, крайне ценна тем, что в ней достигнут очень высокий уровень разрешения, позволяющий предполагать, что образование нескольких (вероятно, многих) различных форм комплекса является правилом. [c.63]

Обнаружено, что ферменты, состоящие из нескольких субъединиц, значительно менее устойчивы в водно-органических смесях по сравнению с ферментами типа каталазы и пероксидазы, состоящими из одной полипептидной цепи. Необратимая инактивация ферментов, состоящих из нескольких субъединиц, вероятно, обусловлена неполной реассоциацией предварительно диссоциировавших субъединиц при возвращении системы к нормальным условиям. Процессы диссоциации и реассоциации субъединиц, происходящие под. влиянием органического растворителя. и гари замораживании, могут приводить к образованию полимерных форм, не обладающих ферментативной активностью. Так, замораживание растворов двух злектрофоретически индивидуальных форм лактат-дегидрогеназы, а затем их последующее плавление в присутствии хлорида натрия приводит к образованию пяти различных форм. Органические растворители, такие как этиленгликоль, пропилен-гликоль, глицерин или диметилсульфоксид, при их добавлении в растворы полностью ингибируют образование этих форм и, за исключением пропиленгликоля, способствуют сохранению ферментативной активности [626, 627]. Как правило, растворимость веществ, включая ферменты и субстраты, уменьшается при понижении температуры и при введении органических растворителей. Несмотря на это, для обнаружения промежуточных соединений при низких температурах часто бывает достаточно не очень больших концентраций субстратов, поскольку при понижении температуры увеличиваются стационарные концентрации [615, 628]. Необходимо, однако, проверять, являются ли обнаруженные при низких температурах промежуточные соединения теми же самыми, что и при нормальных условиях, так как направление процесса может измениться. Активность ферментов, которые находятся в биомем- ранах и связаны е липидами, падает при переводе их в водные буферные растворы. Например, известно, что цитохром Р-450 ин-активируется при экстракции в водные растворы (при этом наблю- [c.237]

Существование постулированных теорией Палладина дыхательных хромогенов было впервые доказано Опариным, создав-щим биологическую модель из хлорогеновой кислоты, аланина, перекиси водорода и пероксидазы. В присутствии кислорода хлорогеновая кислота окисляется, при этом ее окраска изменяется из желтой в зеленую. В отсутствии кислорода происходит восстановление окисленной хлорогеновой кислоты за счет водорода аланина, причем хлорогеновая кислота вновь принимает свойственную восстановленной форме желтую окраску. Опарин показал, таким образом, что хлорогеновая кислота выполняет роль промежуточного катализатора дыхания, акцептируя водород молекулы аминокислоты. [c.220]

Таким образом, для системы ферроцианид калия — о-дианизидин — пероксидаза предложен механизм субстрат-субстратной активации, предполагающий непосредственное участие белковой глобулы фермента в каталитическом процессе. В пользу последнего также свидетельствовал тот факт, что о-дианизидин не ускорял окисление ферроцианида в отсутствие пероксидазы, хотя неферментативная реакция также протекала с участием промежуточных радикальных форм [Лебедева, Угарова, 1996]. При этом, образующийся на поверхности белковой глобулы полуокис-ленный продукт может быть активно использован в биогенных системах как механизм повышающий возможности биогенных систем при их адаптации к экстремальным условиям. [c.43]

Пероксидаза катализирует окисление неорганических и органических соединений в присутствии перекиси водорода. По скорости окисления их можно условно разделить на быстро окисляемые (о-дианизидин, гидрохинон, />-крезол и т.д.) и медленно окисляемые (аскорбиновая кислота, NADH, люминол, ферроцианид и Т.Д.). Предложено [Угарова и др., 1981 Кутузова, 1981], что взаимодействие субстратов-восстановителей с промежуточными окисленными формами фермента может осуществляться при участии боковых функциональных групп белка. Методом химической модификации в пероксидазе обнаружена функционально важная имидазольная группа гистидина [Welinder, 1979 Welinder et al, [c.53]

Ряд соединений, относящихся к стероидным гликозидам (ци-гоксин, строфантин и др.), не являются субстратами пероксидазы, так как не способны реагировать с промежуточными окисленными формами фермента (Е, и Е ). Однако эти соединения обладают антиоксидантным действием. Стероидные гликозиды в химическом отношении родственны между собой и являются сложными органическими соединениями в составе которых углеводы (гликоны) и агликоны (генины) в основе имеют пергид-рофенантренциклопентан к семнадцатому углеродному атому которого присоединяется ненасыщенное пятичленное, реже [c.90]

Норадреналин не окисляется соединениями Е, и Е пероксидазы, т.е. он не может быть пероксидазным субстратом фермента. Тогда как викасол восстанавливает промежуточные окисленные формы пероксидазы, являясь медленно окисляемым субстратом пероксидазы. При pH 4,5—6,0 викасол не ингибировал фермент в реакциях пероксидазного окисления о-диани-зидина и аскорбиновой кислоты, а при pH > 6,5 в реакциях пероксидазного окисления аскорбиновой кислоты викасол проявлял конкурентный характер ингибирования. В реакциях окисления о-дианизидина тип ингибирования пероксидазы викасолом зависел от pH. При pH 6,5 проявлялся конкурент- [c.101]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология