Концентрация субстратов

Если холинэстераза иммобилизована с помощью ковалентного связывания, то срок службы биосенсора возрастает Так, датчик, состоящий из рН-электрода с иммобилизованной на поверхности ацетилхолинэсте-разой (путем сшивки глутаровым альдегидом с альбумином), функционирует без изменения характеристик достаточно длительное время. С его помощью определяли паратион и севин на уровне 10 - 10моль/л Продолжигельность анализа 30 мин. Содержание паратиона и севина контролировали по относительному снижению отклика сенсора после внесения в ячейку аликвоты пробы. Заметим, что величина измеиения pH зависит не только от активности фермента, но и от буферной емкости раствора. Поскольку увеличение кислотности происходит лишь на мембране, а в объеме раствора pH остается практически постоянным, обычно применяют высокие (до 0,1 моль/л) концентрации субстрата и ячейки большого (100 мл и выше) объема. Кроме глутарового альдегида для иммобилизации холинэстеразы используют сополимеры акрил- и метакриламида, желатин. В последнем случае стеклянный шарик рН-электрода погружают в 5-10%-й раствор желатина, содержащий фермент, затем высушивают и обрабатывают водным раствором глутарового альдегида. Аналогичные мембраны используют и в датчиках на основе рН-чув-ствительных полевых транзисторов (911. [c.294]

Зависимость констант Михаэлиса кз и Км от pH мон ет быть весьма сло кной. Поэтому для исследования зависимости от pH србды требуется использование буферных растворов. При этом нередко оказывается, что между компонентами буферного раствора (особенно НРО ") и ферментом имеется определенное взаимодействие. Кроме того, влияние на активность белка и активность субстрата также оказывает ионная сила раствора, что еще в большей стенени усложняет интерпретацию процесса в буферном растворе. Этот факт не всегда принимался во внимание. Во всех уравнениях, применявшихся в этом разделе, концентрации должны быть заменены на активности. Когда концентрация субстрата меняется в широком диапазоне, то поправка на активность может быть весьма существенной. Например, изучение скорости реакции уреаза — мочевина в диапазоне концентрации мочевины от 0,0003 до 2,0 М показало, что при высоких концентрациях мочевины скорость реакции надает [112]. Это может быть связано с изменением активности, а не механизма реакции. [c.564]

Реальность такого реактора была показана на примере получения аланина из молочной кислоты. Смещение равновесия в нужную сторону в таком реакторе, содержащем лактатдегидрогеназу, достигается использованием высокой концентрации субстрата и быстрой утилизацией пировиноградной кислоты вторым ферментом. Стоит отметить, что подобная система служит также моделью возможного применения в лечебных целях, в которой ферменты и коферменты, иммобилизованные вместе, могут функционировать как самостоятельная единица для коррекции метаболического дисбаланса. [c.260]

Предположение о существовании стационарного состояния является спорным для систем, в которых концентрация комплекса фермент — субстрат велика по сравнению с концентрацией свободного фермента, а концентрация субстрата (3) не сильно превышает концентрацию (Ео). Если (3) > (Ео) или (Е-З) < (Ео), то предположение о стационарности справедливо для случая, когда глубина реакции (Зо) — (3) > (Е-З). [c.562]

Концентрация субстрата [5] как аналог концентрации компонента газовой смеси в мембране зависит от скорости его поступления извне / (5) и расхода в реакции Т г(5) [c.35]

К внешним воздействиям (факторам) относятся концентрации субстрата, продуктов метаболизмов, элементов минерального питания, температура, pH среды и др. [c.100]

Нелинейность подобной системы обусловлена торможением процесса в результате связывания фермента в неактивный комплекс Е8 при повышенных концентрациях субстрата этот процесс аналогичен изменению свойств матрицы мембраны при значительной растворимости газов. [c.35]

В то же время в регенераторе при низкой концентрации субстрата и повышенной концентрации активного ила происходит интенсивное окисление продуктов автолиза, и следовательно, обеспечивается восстановление первоначального качества ила, соответствующего условиям его наибольшей активности для данных адаптационных условий. [c.164]

Кинетическая модель характеризует скорость развития общей численности популяций Л как функции комплекса параметров внешней среды ж (концентрации субстрата и продуктов метаболизма, состава минерального питания, температуры, pH и др.) и вектора параметров модели 0 [c.137]

Аналогично реакции нуклеофильного замещения N2, реакция элиминирования у первичных алкилгалогенидов, названная 2, является бимолекулярном, и ее скорость также зависит как от концентрации субстрата, так и от концентрации реагента который действует в данном случае не как нуклеофил, а как основание. [c.106]

Были проведены опыты также по переалкилированию смеси [1—6 С] бензола и толуола изопропилбензолом, в которых изменялось соотношение концентраций субстратов, а их суммарная концентрация, как и концентрация алкилбензола, оставалась постоянной. После обработки эксперимента получены следующие результаты [c.184]

Если обозначить общую концентрацию субстрата (в свободном состоянии и в виде комплекса) s, а общую концентрацию фермента е, то, поскольку [c.257]

Применение холинэстераз для определения суперэкотоксикантов основано на зависимости скорости реакции К от концентрации субстрата [Л в соответствии с уравнением Михаэлиса-Ментен [c.290]

Практически концентрация фермента всегда много меньше концентрации субстрата, и величиной е, а следовательно, и [5Е] по сравнению с з можно пренебречь, т. е. положить [5] я. В этом случае [c.257]

При этих концентрациях субстрата весь фермент находится в активной промежуточной форме. [c.258]

Величина Штах может быть определена непосредственно, если удается провести кинетические измерения при концентрации субстрата зЭ/См, так как при этом ш = г щах- Скорость реакции при этом не зависит от концентрации субстрата до тех пор, пока з не упадет до значений, соизмеримых с /См- Реакция в этом диапазоне значений з нулевого порядка, т. е. идет с постоянной скоростью. [c.258]

Константа Михаэлиса может быть определена как концентрация субстрата, при которой скорость процесса равна /г тах- [c.258]

Рис. 72. Зависимость скорости распада НСО под действием фермента карбоангидразы от концентрации субстрата Е1 координатах ш, ш/ при 0, 5 С и pH 7,3 (по данным Дево и Кистяковского)

Оптимизация определений необратимых ингибиторов холинэстераз-достаточно сложный и трудоемкий процесс. Поэтому при вьшолнении анализа строго соблюдают последовательность операций по подбору фер-мергга, составу реакционной среды, концентрации субстрата и др Эго позволяет снизить пределы обнаружения ингибитора и повь сить то шость определений [c.291]

So — начальная концентрация субстрата [c.85]

Рис. 2.1. Зависи.мость работы адгезии от концентрации (субстрат - ПЭВ, адгезив -

Рис. 2.4. Зависимость работы адгезии от концентрации (субстрат - алюминий, адгезив - ПВА)

Каталитическая селективность сополимера к положительно заряженному субстрату объясняется электростатическим притяжением между субстратом и анионами карбоксильных групп полимерной матрицы, что создает высокую локальную концентрацию субстрата вблизи нуклеофильных имидазольных групп. [c.299]

Как правило, в случае катализа ионами металлов и ферментами концентрация катализатора мала по сравнению с концентрацией субстратов и концентрация свободного (не связанного в комплекс) субстрата [S] практически не отличается от полной концентрации субстрата S. Тогда [c.264]

Видно, что скорость возрастает не пропорционально концентрации субстрата, а стремится к предельному значению. [c.265]

Скорость роста клеток в зависимости от концентрации субстрата и продуктов метаболизма может быть представлена в виде модели Moho - Иерусалимского [c.101]

Для сравнения скоростей обоих процессов удобно рассмотреть две крайние кинетические области концентраций субстрата. [c.37]

Рис. 13. Зависимость скоростей реакций от концентрации субстрата

Доля активной промежуточной формы фермента, а следовательно, и скорость реакции растет с ростом концентрации субстрата и при достаточно больших концентрациях последнего достигает предельного значения Шшах. равного [c.258]

Из последнего соотношения видно, что зависимость скорости реакции от концентрации субстрата при заданной концентрации ингибитора в координатах М а, 1/5 изображается прямой ли- нией, пересекающей ось ординат в точке 1/Шщах- В этих координатах все соответствующие прямые, отвечающие разным концентрациям ингибитора или разным ингибиторам, должны пересекаться в одной точке на оси ординат. Тангенс угла наклона получаемых прямых линий дает величины /См(1 + + г7/С )/ш ах, из которых, зная /См и йИгпах по кинетике в отсутствие ингибитора, можно найти /С . [c.260]

Для проведения измерения готовят раствор субстрата и фермента (в качестве субстрата используют 1-диметиламиноиафта-линсульфонил-пептид в качестве фермента — пепсин) в 0,1 М формиатном буферном растворе (pH 3,1). Концентрации субстрата (моль/л) 0,02-10-3 0,06-10- 0,Ы0- 0,15-10- 0 2-10-з. Концентрация фермента постоянна 7,14-10 моль/л. Измеряют флуоресценцию образовавшегося фермент-субстратного комплекса (А-воаб = 285 нм, >ифл = 500 нм) в каждом из растворов и строят график зависимости aji от l/[So]. По тангенсу угла наклона определяют константу диссоциации комплекса /(,. [c.86]

Рис. 5.8. Предполагаемая модель сверхбыстрого переноса протона в гидратной оболочке, образованной головками ПАВ, обращенной мицеллы ДАП в бензоле. Поскольку ПАВ присутствует в концентрации, значительно превышающей концентрацию субстрата, перенос протона должен происходить от додециламмоний-пропионоЕой кислоты к пирен-1-карбоксилату. Для наглядности изображены два пиреновых остатка в одной мицелле. На самом деле в среднем на одну мицеллу приходится гораздо меньше, чем одна молекула субстрата. Затененная область — водный слой, гидратирующий головки ПАВ [161]. Воспроизведено с разрешения.

За освобождением л-нитрофенола при 25°С, pH 9,0 в 0,01 М боратном буфере, содержащем 0,5% диоксана, и концентрации субстрата 10 моль/л можно наблюдать спектрофотометрячески (рис. 5.9). [c.291]

Нами найден высокоактивный дрожжевой штамм 80-11, образующий в процессе восстановления этилацетоацетата (З)-этил-З-оксибу-тират (ЭОБ) (синтон для синтеза лекарственных препаратов, средств защиты растений (феромонов насекомых), биоразлагаемых полимеров) с 99% химическим выходом, но с 84% оптической чистотой. В процессе поиска условий реакции, обеспечивающих синтез наиболее чистого З-зтил-З-оксибутирата установлено, что наилучшими параметрами реакции являются температура — 32-34°С pH буфера — 7,0 концентрация субстрата — 5 г/л концентрация клеток — 8,5-12 г(асв)/л. Оптическая чистота продукта, полученного в этих условиях составила 96% ее. [c.57]

Среди применений искусственных нейронных сетей хочется особенно отметить их эффективное использование для описания статики и динамики трудно формализуемых математически процессов. Примером являются процессы, протекающие в биореакторах. Росг биомассы в таких процессах зависит от множества факторов и, как следствие этого, кинетические модели являются плохо устанавливаемыми. С целью преодоления указанных обстоятельств в [2] применили гибридную нейронную сеть для описания процесса ферментации в биореакторе. Собственно нейронная сеть моделировала скорость роста популяции, которая непосредственно не может быть измерена. Поэтому модель биореактора дополнялась уравнениями сохранения, позволившими замкнуть описание процесса и выразить измеряемые выходные переменные (концентрации биомассы и субстрата). Таким образом, стало возможным применение алгоритам обратного распространения для обучения нейронной сети. Оценочная функция Е представляла собой средневзвешенное квадратичное отклонение измеряемых и даваемых гибридной сетью выходных переменных безразмерной концентрации субстрата 8 и безрезмерной концентрации биомассы X [c.76]

Если же АО впутр О (и, следовательно, переходное состояние ферментативной реакции стабилизировано связью Е-К), из уравнения (2.21) следует, что всегда существует такой интервал концентраций субстрата, в котором VI /уи> 1, т. е. ферментативный процесс протекает быстрее гомогенно-каталитической реакции. Однако благоприятствующие катализу значения концентрации субстрата КУ не должны быть слишком большими, как видно из уравнения (2.21), причем верхняя граница этого интервала дана значением [c.42]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология