Мешалки клеточные

Рис. П-13. Турбинная клеточная мешалка ( Хош ).

Ряд частичных успехов связан с исследованием клеточных суспензий клеток лимфатических узлов. Получение подобных суспензий не представляет серьезных затруднений достаточно механического диспергирования тканей с помощью мешалки [c.508]

Клеточная мешалка (рис. 149) состоит нз полого вала, связанного посредством перемычек с дном или крышкой, к которым по окружности приварены прямоугольные лопатки. Перемешивание происходит за счет того, что жидкость подсасывается по центру и выталкивается в радиальном направлении между лопатками. Жидкость из мешалки вытекает в направлении стенок сосуда и отражается от них вверх и вниз. Лини тока, следовательно, будут такими же, как и у турбинной мешалки [238]. Направление засасывания жидкости определяется тем, открыт. и верх или низ мешалки. Устройства такого типа успешно применяются для растворения, перемешивания суспензий и при хк.мических реакциях. [c.312]

Для удобства изложения небольшие суспензионные культуры в этой главе будут определяться так же, как и в разд. 2.1. Это чисто условное определение, основанное на том, что увеличение объема культуры выше 2 л требует введения в систему дополнительных факторов. Культивирование клеточной суспензии в лабораторных условиях осуществляется обычно во вращательных сосудах, названных так потому, что они содержат в качестве перемешивающего элемента магнитный стержень, приводимый в движение внешней магнитной мешалкой. Детали некоторых широко доступных вращательных сосудов, а также названия фирм-поставщиков и размеры приведены на рис. 3.12. Важно иметь магнитную мешалку высокого качества, чтобы создавалось достаточно сильное магнитное поле, плавно поворачивающее магнит в желаемом диапазоне скоростей вращения (50—500 об/мин), безотказно работающую в течение долгого времени. Кроме того, магнитная мешалка не должна слишком нагреваться, поскольку культуральный сосуд устанавливается прямо на ее верхушку, и желательно включать в систему тахометр, обеспечивающий регистрацию истинной скорости вращения. Всегда проверяйте, может ли мешалка запускаться из всех возможных положений после перерыва в энергоснабжении. [c.97]

Сравнение статических и нестатических условий инкубации клеточной суспензии выявляет существенные различия в характере кривой зависимости эффекта препарата от его концентрации [51]. Поэтому клетки следует постоянно поддерживать в суспендированном состоянии для равномерного распределения лекарства. Если отношение площади поверхности к глубине среды в культуральном сосуде невелико, то инкубация в водяной бане на мешалке не обеспечивает поддержания клеток в суспензии, и в этом случае рекомендуется периодически встряхивать сосуд рукой (например, каждые 10 мин). [c.280]

К клеточной суспензии добавляют вирус в концентрации 10—50 БОЕ на клетку инкубируют ее на магнитной мешалке в течение 1 ч при 35 °С. [c.51]

В сосуды емкостью 250 мл вносили по 20 мл взвеси, содержащей 500 ООО клеток в 1 мл. Культивирование проводили при 37,5 . Клеточную взвесь перемешивали мешалкой со скоростью 230 об/мин. Культуру постоянно продували медленным током воздуха, содержащего 5% углекислоты. [c.89]

Рис. 11.11. Аппарат для щадящего концентрирования чувствительных микроорганизмов с помощью обратной фильтрации [107]. Перепад давления через мембрану определяется высотой жидкости во внешней камере для щадящего концентрирования столб жидкости не должен превышать 5 см при концентрировании разбавленных клеточных суспензий поверхность мембраны должна быть не менее 400 см I высота жидкости во внешней камере 2—фильтрат (вакуум) 5 —ввод пробы — мембранный фильтр 5 — зазор между камерами, где помещается стержень для перемешивания суспензии с помощью магнитной мешалки.

Процессы глубинного культивирования аэробных микроорганизмов используются для получения пищевых добавок, витаминов, аминокислот и других продуктов. При непрерывном процессе культивирования используют емкостной биореактор с мешалкой. Скорость протекания процесса определяется кинетикой клеточного роста и скоростью массообмена на границе газ - жидкость. Рост микроорганизмов описывается мультршликативной зависимостью, учитывающей лимитирование субстратом и кислородом, растворенным в ферментационной жидкости. Математическая модель процесса при условии выращивания микроорганизмов одной популяции, идеального перемеошвания рабочей жидкости, постоянства экономических коэффициентов по кислороду и субстрату в безразмерных величинах записывается в виде системы трех нелинейных дифференциальных уравнений [c.182]

Экстрактор системы Гришина—Шешалевича. Высота аппарата 4,4 м, рабочий объем 3,5 м . В загрузочной колонне / лопастная мешалка 2 погружает сырье в растворитель частицы сырья опускаются вниз и горизонтальным шнеком 3 передаются на вертикальный шнек 5 экстракционной колонны 4. Истощенное сырье слегка отжимается и выводится из аппарата лопатками 6, имеющимися в расширенной верхней части экстракционной колонны. Условия экстракции характеризуются низкой скоростью движения растворителя относительно частиц сырья и, следовательно, малой скоростью извлечения конкрета. Продолжительность пребывания сырья в аппарате 120—150 мин. При экстракции розы выделяется 16 % клеточного сока относительно массы сырья. [c.192]

Приготовление клеточной взвеси. Ткань, доставленную в лабораторию, отмывают от крови, жировых компонентов, клеточного детрита и других примесей в растворе Хенкса или фосфатного буфера с антибиотиками, измельчают ножницами и продолжают отмывать до полной прозрачности раствора. Затем ее заливают трипсином (на 100 г ткани — 200 — 300 мл раствора трипсина) и диспергируют при помощи магнитной мешалки или пипетирова-нием. Надосадочную жидкость, содержащую трипсинизированные клетки, сливают и помещают в холодильник при 4 °С. [c.260]

Перемещение О2 в этих системах неравноценно по интенсивности и зависит от растворимости газа в жидкой фазе, от мощности барботажа, размера пузырьков, скорости вращения вала и формы мешалки, химического состава питательной среды, температуры, толщины невозмущаемых слоев жидкости вокруг газового пузырька и клетки, от наличия и химического состава капсул, толщины и особенностей клеточной стенки и клеточной мембраны биообъекта и некоторых других причин [c.261]

Клеточный материал гомогенизуют в стеклянном капилляре диаметром 400 мкм. Чистая вода растворяет 39% суммарного белка из образца нервных клеток (гиппокамп крысы). При использовании раствора грас-буфера, имеющего pH 7,4, содержащего 0,1% Тритона Х-100, экстрагируется 72% суммарного белка. Как показали радиометрические измерения, в результате электрофореза 92% этого белка переходит в полиакриламидный гель. Если кроме Тритона Х-100 к экстрагирующему раствору добавлять 0,1% натрийдодецилсульфат, то в раствор переходит 92% суммарного белка. Более 90% этого материала при электрофорезе переходит в гель. Образец гомогенизуют, вводя в раствор с клетками прикрепленную к отрезку тефлоновой трубки петлю из стальной проволоки толщиной 28—70 мкм. Эту мешалку прикрепляют к зубоврачебной бор-машине, вращающейся со скоростью Л2 ООО об/мин [18]. Гомогенизацию ведут 1—3 минуты, наблюдая за ее ходом в микроскоп. Раствор центрифугируют 5—10 мин в гематокритной центрифуге при скорости вращения 11 000 об/мин. При такой обработке получается прозрачная надосадочная жидкость. [c.281]

Ранее считалось, что вероятность повреждений бактериальных клеток определяется скоростью вращения лопастей мешалки. Однако, согласно наиболее правдоподобной современной гипотезе о механизме повреждений, они обусловлены кавитационными явлениями в вихрях, возникающих сразу за лопастями мешалок. Вопрос о повреждении бактериальных клеток в интенсивно перемешиваемых культурах все еще не решен. Если анализировать свойства суспензий бактериальных клеток в потоке, используя для определения гидродинамических характеристик любой отдельной бактериальной клетки предположение,, что она представляет собой сферическую частицу соответствующего диаметра, то оценить силы, вызывающие механическое повреждение клетки, не удается. Подобный подход не учитывает наличие жгутиков или фимбрий они — особенно это касается жгутиков — могут в несколько раз превосходить по длине самые крупные несущие их бактериальные клетки. Вполне возможно, что именно разрыв этих структур и последующее вытекание клеточного содержимого ответственны за разрушение клеток при интенсивном перемешивании бактериальных культур. Заметим, что значительная часть исследований по генетической инженерии направлена на осуществление передачи специфических свойств от различных бактерий к Es heri hia olij которая не особенно пригодна для использования ее в процессах с интенсивным перемешиванием именно из-за наличия фимрий и жгутиков и, следовательно, подверженности механическим повреждениям. [c.415]

Экстракционное отделение включает оборудование для проведения собственно процесса экстракции и выделения липидов из биомассы, при этом параллельно получаются 2 продукта обезжиренная микробная биомасса (обезжиренный белковый препарат) и микробный жир. В экстракторах различных конструкций под действием растворителей происходит выделение липидов из клеточной биомассы. Обезжиренная биомасса через разгрузочную мешалку экстрактора и конвейер поступает в десольвентор 23, в который по всей высоте подается острый пар. Под действием пара и высокой температуры происходит удаление из биомассы остатков растворителя, пары которого улавливаются и собираются в паровом скруббере 26. Освобожденная от растворителя и частично подсушенная биомасса транспортером разгрузки десольвентора передается на грануляцию и фасовку. [c.347]

Значительное влияние на деструкцию целлюлозы при мерсеризации и фильтруемость получаемых растворов оказывает интенсивность перемешивания [6]. Например, при увеличении числа оборотов мешалки (до 400 в 1 мин) резко уменьшается молекулярный вес целлюлозы (больше воздуха попадает в раствор щелочи) и одновременно значительно улучшается растворимость получаемого ксантогената целлюлозы. По-видимому, в результате механических воздействий на целлюлозу более полно разрушаются остатки клеточной стенки, обладающей низкой реакционной способностью. [c.216]

Культуральную жидкость гибридов собирают, когда погибнет около 80% клеток. Объединяют вместе несколько культур объемом 200 мл и клеточный дебрис отделяют либо фильтрованием, либо центрифугированием при 1000 д 15 мин. После этого к надосадочной жидкости добавляют сульфат аммония из расчета 350—400 г/л. Суспензию перемешивают на магнитной мешалке 1 ч при 4°С и затем еще инкубируют 18—24 ч при 4°С без встряхивания. В результате практически весь преципи-тированный материал оседает на дне. Осторожно удаляют >80% надосадочной жидкости, а оставшуюся взвесь центрифугируют при 5000 д 30 мин для осаждения фракции, содержащей иммуноглобулины. Осадок ресуспендируют в минимальном объеме ЗФР или ЗБР и диализуют против избытка того или другого буфера. Предпочтительнее использовать ЗБР, так как при этом существенно снижается опасность бактериального роста. После хроматографии на носителе 5ерЬасгу1 5-200 (для выделения IgG) или 5ерЬасгу1 8-300 (для выделения IgM) получают МА 95%-ной чистоты. [c.190]

I, в который добавлен ЭГТА (0,3—0,5 мг/мл). ЭГТА действует как релаксант и эффективно подготавливает ткань к последующему воздействию коллагеназы. Затем кусочки ткани переносят в бюкс с находящимся в нем остекленным магнитом и заливают 5—10 мл свежеприготовленного раствора трипсина (на растворе I, концентрация 1 мг/мл). Бюкс помещают в термостат (36 °С) на магнитную мешалку при вращении магната со скоростью 50—60 об/мин. Через 1 ч переваривание ингибируют соевым ингибитором трипсина (3 мг/мл). Затем раствор трипсина заменяют раствором коллагеназы (0,4—0,5 мг/мл, приготовленным на растворе II, в котором содержатся ионы Са +, активирующие коллагеназу). Через 30—40 мин клеточную суспензию осаждают центрифугированием (1000 об/мин) и осадок, состоящий из изолированных клеток, ресуспендируют в растворе I (рис. 35). [c.147]

Суспензию костномозговых клеток приготовляют путем механической или ферментативной обработки. В первом случае костномозговую ткань в небольшом объеме среды многократно пропускают через шприц с иглами уменьшающегося диаметра, во втором — помещают в раствор трипсина (0.25 %) с виаказой на магнитную мешалку на 30 мин при комнатной температуре, а затем также пропускают через шприц. В обоих случаях полученную взвесь фильтруют затем через 4-слойный капроновый фильтр, центрифугируют в течение 10 мин при 800—900 об/мин, клеточный осадок ресуспензируют в среде а-МЕМ, доводя концентрацию до 1 10 ядерных клеток на 1 мл. Эксплантацию полученных суспензий производят [c.278]

Питательную среду (депротеинизированный сок картофеля, содержащий 3% СВ, без добавочных солей и ростовых факторов) стерилизовали при 0,075 МПа, доводили pH до 5,0—5,8, засевали 4% гриба и выращивали его в течение 20—24 ч. Затем в среду с растущим грибом вносили 3—5% 1-суточного инокулюма бактерии, выращенной на клеточном соке картофеля при pH 7,0—8,0 и температуре 24—26°С. Совместное культивирование осуществляли в колбах на качалке (200 об/мин) в течение 48—60 ч, в ферментере при скорости перемешивания среды мешалкой 200 об/мин, норме аэрации 0,5—1,0 л воздуха на 1 л жидкой среды в 1 мин и продолжительности процесса 30—36 ч. Выращивание в ферментере значительно сокращало время культивирования. Биомассу отделяли фильтрованием и высушивали. [c.223]

Ткань помещают в колбу Фурко емкостью 125 мл, содержащую магнит. 0,25% раствор трипсина добавляют в объеме, равном троекратному весу ткани. Колбу с тканью оставляют при комнатной температуре на 30 минут или при 4 на 4 часа. Жидкость удаляют и заменяют равным количеством свежего раствора трипсина. Колбу с тканью 1П0мещают на магнитную мешалку при 4 и перемешивают в течение 16 часов. Полученную клеточную суспензию фильтруют, центрифугируют. Клетки промывают 2 раза фосфатнобуферным раствором и ресуспендируют в питательной среде для роста. [c.66]

Эрл с сотрудниками (1956) Вестфол, Пеппере, Бриант, Шиллинг, Эрл (1958) Бриант, Шиллинг, Эрл (1958) разработали методы практического культивирования клеток животных в больщих масштабах. Применяя литровые флаконы со специаль-ными мешалками, эти исследователи успешно выращивали ряд перевиваемых клеточных -штаммов и изучали характер их роста и метаболизм. [c.88]

Для глубинного культивирования (суспензионные культуры) растительных клеток применяют приемы, используемые в микробиологии. Это и выращивание в замкнутых или открытых системах, при периодическом или непрерывном режимах, однако наиболее изученным и наиболее распространенным способом глубинного культивирования суспензии растительных клеток пока еще остается закрытая периодическая система с использованием ферменторов с механическими мешалками или с аэрацией восходящими воздушными потоками. При указанном способе выращивания рост клеточной популяции характеризуется показателями, довольно близко напоминающими таковые при аналогичном культивировании микробных клеток, т. е. выделяют фазу задержанного роста (лаг-фазу), экспоненциальную фазу, фазу замедленного роста, стационарную и фазу отмирания или деградации клеток. Продолжительность фаз зависит от ряда факторов, связанных как с особенностями выращиваемых объектов, так и составом среды и некоторыми внешними воздействиями. [c.97]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология