Гидролиз полинуклеотидов фосфорных

Известно, что структурными единицами нуклеиновых кислот являются мономерные молекулы - мононуклеотиды. Следовательно, нуклеиновые кислоты представляют собой полинуклеотиды. Это продукты полимеризации мононуклеотидов, число и последовательность расположения которых в цепях ДНК и РНК определяются в строгом соответствии с программой, заложенной в молекуле матрицы (см. главу 14). Мононуклеотиды легко образуются при гидролизе ДНК и РНК в присутствии нуклеаз, состоят из трех специфических компонентов азотистого основания, углевода и фосфорной кислоты. В этой триаде мононуклеотида углевод занимает среднее положение. Соединения азотистого (любого) основания и углевода (рибозы или дезоксирибозы), получившие название нуклеозидов, легко образуются из мононуклеотида при гидролитическом отщеплении фосфорной кислоты в присутствии щелочи или при участии специфических ферментов - нуклеотидаз. [c.102]

Определение молекулярного веса нуклеиновых кислот (полинуклеотидов) седиментационным методом на ультрацентрифуге дает величины от 200 ООО и менее до нескольких миллионов. При полном гидролизе нуклеиновых кислот ядра клетки установлено наличие трех групп составных частей этих так называемых дезоксирибонуклеиновых кислот (они обычно обозначаются как ДНК). Это — фосфорная кислота, Д-2-дезоксирибоза (т. е. Д-рибоза, у которой второй углеродный атом несет второй водородный атом вместо гидроксила, кн. I, стр. 461) и смесь четырех гетероциклов двух пуриновых — аденина и гуанина и двух пиримидиновых — тимина и цитозина (см. стр. 349, 361). Полный гидролиз нуклеиновых [c.711]

Если фосфорилировать тритильное производное без защиты вторичных спиртовых групп ацетоннрованием, остаток фосфорной кислоты этерифицирует гидроксил при втором или третьем углероде, и после снятия тритилыюй группы гидрогенолизом можно получить нуклеотид, изомерный изображенному выше по положению остатка фосфорной кислоты. Положения 5 и 3 — это как раз те положения, которые остаток фосфорной кислоты занимает в природных нуклеотидах, полученных ферментативным гидролизом полинуклеотидов. [c.678]

К фосфатазам относятся также ферменты, катализирующие гидролиз полинуклеотидов (рибонуклеиновых и дезоксирибонуклеиновых кислот),— рибонуклеаза и дезоксирибонуклеаза. Оба эти фермента выделены из тканей животных в кристаллическом виде. При их действии происходит гидролиз полинуклеотидов с разрывом сложноэфирных связей, идущих от остатков фосфорной 1СИСЛ0ТЫ к спиртовым группам рибозы или же дезоксирибозы. [c.180]

Нуклеиновые кислоты представляют собой полинуклеотиды, в которых отдельные нуклеотиды связаны фосфодиэфир-ными мостиками, образующимися в результате этерификации гидроксильной группы при одного полинуклеотида остатком фосфорной кислоты при С другого нуклеотида. Фосфо-диэфирная связь характерна и для РНК, и для ДНК, так как в её образовании не участвует атом замещение которого отличает РНК и ДНК друг от друга. Доказательства наличия фосфодиэфирных мостиков получены при изучении результатов ферментативного гидролиза нуклеиновых кислот. Последовательный гидролиз нуклеиновых кислот панкреатической дезоксирибонуклеазой и фосфоди эстеразой змеиного яда приводит к образованию нуклеозид-З -фосфатов. При гидролизе панкреатической дезоксирибонуклеазой в комбинации с фос-фодиэстеразой селезёнки получаются нуклеозид-З -фосфаты. Изображение структуры нуклеиновых кислот привычными структурными формулами (формула а на приводимой далее схеме) оказывается слишком громоздким, поэтому для описания последовательностей нуклеиновых кислот можно использовать более краткие записи. В первом варианте (запись б на приводимой схеме) остатки пентоз изображаются горизонтальными линиями, на которых указаны условные положения всех атомов углерода пентозы, участвующих в образовании молекулы (Г, 3 и 5 ). На конце черты возле атома С указывают обозначение нуклеинового основания (на приведённой схеме тимин, аденин и гуанин), а атомы С и С соединяют через атом Р. Второй вариант обозначения (запись в) — буквенная система, в которой используются буквенные обозначения нуклеиновых оснований (А, О, Т, U, С), а фосфатная группа обозначается буквой "р . Если она находится справа от обозначения нуклеинового основания, это означает, по зтери-фицирована группа при С , а если слева — при С . [c.115]

В отличие от протеидов других классов простетические группы нуклеопротеидов— нуклеиновые кислоты, или полинуклеотиды, — являются макромолекулярными соединениями. Они имеют сложное строение и дают в результате гидролиза фосфорную кислоту, пентозу и пиримидиновые и пуриновые основания. Строение нуклеиновых кислот будет описано ниже (см. Нуклеиновые кислоты ). В плазме клетки (цитоплазме) было обнаружено также очень большое число шарообразных частиц, называемых микросомами, с молекулярными весами порядка нескольких миллионов, также состоящих из нуклеиновых кислот (рибонуклеиновой кислоты) и белков, В этих микросомах происходит синтез белков. Нуклеиновые кислоты микросомов действуют как матрицы или клише (гены), служащие для синтеза специфичных белков и для своего собственного воспроизведения (Н. Е, Паладе, 1955 г,), В этом синтезе участвуют также и ферменты, связывающие аминокислоты с аденозиимонофосфорпой кислотой (М, Хогланд, 1956 г.). [c.455]

В результате полного гидролиза нуклеиновых кислот минеральными кислотами образуется смесь пиримидинов и пуринов (см. ниже), сахар (а именно пентоза) и фосфорная кислота. Таким образом, нуклеиновые кислоты построены как продукты поликонденсации более простых компонентов, называемых нуклеотидами. Последние получаются при мягком гидролизе нуклеиновых кислот разбавленным аммиаком. Следовательно, нуклеиновые кислоты являются полинуклеотидами. [c.773]

Реакции гидролиза фосфомоноэфирных связей, хорошо изученные для разнообразных моноэфиров фосфорной, кислоты, в том числе и природных , в ряду производных нуклеиновых кислот исследованы относительно мало. Это связано прежде всего с тем, что существуют хорошо разработанные методы ферментативного дефосфорилирования мононуклеотидов и концевых нуклеотидных звеньев в олиго- и полинуклеотидах, в то время как химические методы расщепления фосфомоноэфирных связей в рассматриваемых соединениях далеки от совершенства. [c.542]

Химические и биохимические свойства синтетических гомополимеров (и сополимеров) также находятся в полном соответствии с приписанной им структурой. В результате раскрытия концевого циклического фосфата при кислотном гидролизе в мягких условиях образуются олиго- и полинуклеотиды, содержащие концевой остаток фосфорной кислоты в положении 2 (или 3 ). При гидролизе кислотами в более жестких условиях получаются либо пурины, или пиримидиннуклеозид-2 - и пиримидиннуклеозид-З -фосфаты, [c.501]

Дальнейшее развитие ферментативных методов гидролиза позволит подробнее исследовать порядок чередования мономерных звеньев в цепи ДНК и РНК. Панкреатическая РНК-аза расщепляет цепь РНК между рибозой с присоединенным пиримидиновым основанием и впереди идущей фосфорной кислотой. Гидролизат содержит при этом немного мономерных единиц п значительные количества димеров, тримеров и тетрамеров. Разделение гидролизата РНК производится на DEAE-целлюлозе с элюцией солевым градиентом. Хроматография ди- и тримеров оказывается весьма эффективной. Количества мононуклеотидов и динуклеотидов каждого типа не сильно отличаются от ожидаемых по теории вероятности, если, зная концентрацию каждого тина мономеров в цени и считая их расположение случайньш, рассчитать выход каждого типа двойников после разрыва цепочки около всех пири-мидинов. На три- и тетрамерах уже обнаруживаются сильнейшие Отступления от статистики. Так, например, тринуклеотид АГЦ встречается в РНК из дрожжей в 2,5 раза чаще, чем ГАЦ. Подобные изомерные полинуклеотиды встречались бы одинаково часто, если бы звенья распределялись в цени по закону случая. [c.247]

Определение молекулярного веса нуклеиновых кислот (полинуклеотидов) седиментационным методом на ультрацентрнфуге дает величины от 200 000 и менее до нескольких миллионов. При полном гидролизе нуклеиновых кислот ядра клетки уста1Ювлено наличие трех групп составных частей этих так называемых дезоксирибонуклеиновых кислот (они обычно обозначаются как ДНК). Это — фосфорная кислота, D-2-дез-оксирибоза (т, е. й-рибоза, у которой второй углеродный атом несет второй водородный атом вместо гидроксила, кн. I, стр. 432) и смесь четырех гетероциклов двух пуриновых — аденина и гуанина и двух пиримидиновых— тимина и цитозина (см. стр. 319, 329). Полный гидролиз нуклеиновых кислот клеточной плазмы, так называемых рибонуклеиновых кислот (РНК), также дает фосфорную кислоту, /)-рибозу (вместо )-дезоксирибозы) и смесь тех же аденина, гуанина, цитозина и, кроме того, урацила. Тимин (метильный гомолог урацила) в них отсутствует. [c.673]

При осторожном щелочном гидролизе рибонуклеиновых кислот или гидролизе с помощью ферментов (например, рибонуклеазой для рибонуклеиновых кислот, фосфодиэстеразой змеиного яда для дезоксирибонуклеиновых кислот) можно расщепить высокомолекулярные полинуклеотиды на простые нуклеотиды. В молекуле простого нуклеотида тот или иной из перечисленных выше гетероциклов связан с рибозой (в ДНК — с дезоксирибозой) и фосфорной кислотой, этерифицирующей сахарную часть нуклеотида. Это явствует из того, что среди продуктов гидролиза, проведенного в соответствующих условиях, можно найти свободный гетероцикл и изомерные фосфаты Д-рибозы (соответственно /)-2-дезоксири-бозы). С другой стороны, гидролиз нуклеиновых кислот или изолированных нуклеотидов можно (ферментативно или действием аммиака) довести и до соответствующих нуклеозидов, т. е. отщепить фосфорную кислоту, оставив связанными гетероцикл и сахар. Таким образом, нуклеотиды — мономеры , поликонденсацией которых (с отщеплением воды) образуются полинуклеотиды ( полимеры ), — представляют собой фосфорные вфиры нуклеозидов. Поскольку продукты гидролиза нуклеозидов — пириииди-новые и пуриновые гетероциклы (а также рибоза или дезоксирибова), идентифицируются сличением с известными образцами, остается установить место связи гетероцикла с сахаром, характер их циклизации, конфигурацию гликозидного центра и, наконец, место фосфорилирования сахарной части молекулы. [c.712]